ESR和MUC13基因多态性位点与美系大白猪生长性状的关联性分析

为探究雌激素受体(ESR)Pvu II酶切位点和粘蛋白13(MUC13)c.908A>G位点的多态性与美系大白猪生长性状的关联性,本研究应用PCR扩增和Sanger测序检测了399头150日龄美系大白猪的ESR基因PvuII酶切位点和MUC13基因的c.908A>G位点的多态性,并结合生长性状进行关联分析。多态性检测结果显示,大白猪ESR基因Pvu II酶切位点共有3种基因型:AA、AB和BB,优势等位基因型为AB(0.474),优势等位基因为B(0.518);MUC13基因的c.908A>G位点的基因型为:AA、AG和GG,优势等位基因型为AG(0.566),优势等位基因为A(0.551)。群体遗传分析表明,这2个位点在美系大白猪群体中属于中度多态性(0.25AB型>AA型的遗传趋势;MUC13基因c.908A>G位点与大白猪的体重、日增重、背膘厚、眼肌面积和瘦肉率显著相关。体重、日增重和背膘厚总趋势为GG型>AG型>AA型,而AG型的眼肌面积和瘦肉率显著大于GG型。有利于产仔数和抗腹泻的合并基因型BB-GG个体的体重和日增重高于其他基因型。综上,ESR和MUC13基因多态性与大白猪的部分生长性状相关,可为育成综合高产仔、抗腹泻和快速生长为一体的大白猪品系提供重要的参考。

非M3型急性白血病患者中MUC1基因和MDR1基因表达及其与临床疗效的关系

背景与目的:MUC1基因在胃癌、卵巢癌、多发性骨髓瘤、恶性淋巴瘤等肿瘤中有表达,在急性白血病患者中有较高的表达。但MUC1基因和多药耐药基因(MDR1)相互关系以及两者的表达与急性白血病治疗效果的关系尚有待探讨。本研究拟探讨MUC1基因与MDR1基因表达及其与非M3型急性白血病患者治疗效果的关系。方法:应用逆转录鄄聚合酶链反应(RT鄄PCR)法检测34例初治非M3型急性白血病患者MUC1和MDR1的表达,并观察两种基因表达及其与临床疗效的关系。结果:34例初治非M3型急性白血病患者中MUC1基因阳性率为50%,MDR1基因阳性率为29.4%。MUC1基因阳性患者的MDR1阳性率为52.9%,明显高于MUC1阴性者的5.9%(P=0.003)。MUC1基因阴性者完全缓解(CR)率达94.1%,阳性患者CR率52.9%,两组有显著性差异(P<0.05);MDR1基因阴性者CR率为91.7%,明显高于阳性患者的50.0%(P<0.05)。MUC1基因和MDR1基因均阳性者CR率为55.6%,MUC1基因和MDR1基因均阴性者16例,全部获得CR。结论:非M3型急性白血病MUC1基因阳性者MDR1基因表达率较高,MUC1基因及MDR1基因均为阴性者治疗缓解率高。提示联合检测MUC1基因和MDR1基因对判断初治非M3型急性白血病的疗效有良好的预测作用,可作为临床判断疗效的一项有意义的指标。

用BC2单抗检测人正常腺上皮组织中MUC1基因的表达

目的:揭示MUC1基因在人正常腺上皮中的表达规律。方法:用BC2单克隆抗体和ABC免疫组织化学方法检测腺上皮组织中的MUC1核粘蛋白的表达。结果:MUC1核粘蛋白主要分布于胃粘膜的上皮层和基底部，上皮层内以核周明显，腺须及基底都是弥漫胞浆型;胃窦、胃底的表达无差异。十二指肠及空肠的表达类似，杯状细胞和住状细胞弥漫胞浆，呈弱阳性，两种细胞的表达模式一敷。结肠粘膜上皮层及隐窝处有弱阳性表达，胆囊上皮及宫颈上皮细胞内的表达亦较弱。结论:MUC1核粘蛋白广泛地存在于人正常腺上皮细胞内，但具组织异质性。

胃癌及癌前病变组织中MUC2基因的表达

目的 揭示MUC2基因在正常胃肠道粘膜、癌前病变和胃癌组织中的表达规律及其临床病理意义。 方法 应用免疫组织化学SP法检测组织中MUC2核粘蛋白的表达,应用原位杂交方法检测组织中MUC2 mRNA的表达。 结果 MUC2核粘蛋白及其mRNA主要在十二指肠内表达,正常胃粘膜内不表达;肠上皮化生(n=27)和胃癌组织(n=46)的表达率分别为85％,32％和67％,58％;肠化内MUC2基因表达与肠化分型之间无关(P>0.05);胃癌组织中MUC2基因表达与肿瘤浸润、淋巴结转移、临床分期和胃癌的分型之间无关(P>0.05),而MUC2核粘蛋白阳性组与阴性组之间的肿瘤分化存在明显的差别(P<0.05)。 结论 MUC2基因在胃粘膜的癌变过程中是明显上调表达的,胃癌内MUC2核粘蛋白的表达与胃癌的分化有关。

用BC2单抗检测胃癌及癌前病变组织中MUC1基因表达及其意义

目的 揭示胃癌及肠化组织中MUC1基因的表达与其临床病理行为之间的联系。方法 用BC2抗体和免疫组化SP法检测人正常胃肠道粘膜、肠化粘膜以及胃癌组织中MUC1基因核心肽的表达。结果 人正常胃粘膜组织中广泛分布MUC1基因产物 (10 0 % ) ,抗原主要位于上皮层和胃腺的中下部 ;肠化和胃癌组织中的表达阳性率分别为 79 3%和 82 6 % ;胃癌组织中MUC1基因表达与患者的性别、部位、大小、淋巴结转移、分化类型、浸润深度、临床分期和Lauren氏分型之间无关 (P >0 0 5) ;但MUC1基因强阳性者与中弱阳性者之间的临床分期存在明显的差别 (P <0 0 5) ,表达越强 ,Ⅰ～Ⅱ期的可能性越小 ;不同类型肠化中MUC1基因的表达无差异 (P >0 0 5)。结论 上述结果提示用BC2抗体检测的MUC1基因可能是胃癌进展的有用标志 ,可能与胃癌患者的临床病理行为之间有关 ,而与肠化分型无关。

MUC13、FUT1基因在2个种猪核心群中的分子标记辅助选择研究

【目的】MUC13、FUT1基因分别为大肠埃希菌引起的断奶前和断奶后仔猪腹泻的主效基因,通过探索2个基因在不同种猪群中的分子标记辅助选择方法,提高种猪抗病性的选育效率.【方法】利用PCR-SNa Pshot和PCRRFLP的方法分别检测影响断奶前仔猪腹泻的MUC13基因及断奶后仔猪腹泻的FUT1基因在温氏集团2个专门化父系群体(666头杜洛克和512头皮特兰)中的基因分布情况.【结果和结论】MUC13基因频率在2个群体中表现出明显的群体特异性,有利等位基因频率分别为0.890和0.180,而FUT1基因则相差不大,分别为0.754和0.677.MUC13与FUT1基因的有利等位基因型组合个体比例在2个群体中差异较大,在杜洛克群体中达36.75%,而在皮特兰群体中仅为3.49%.通过基因型与选育性状表型的相关分析,发现优势基因型对皮特兰群体的体型外貌负面影响较大,但却不影响杜洛克群体.综合现场育种实践,建议杜洛克群体先实现MUC13基因的辅助选育纯化,再启动FUT1基因的选育工作.皮特兰群体有利等位基因型组合个体比例太低,暂时不宜进行抗腹泻基因纯化选育.

胃癌及癌前病变组织中MUC5AC基因的异常表达及意义

目的 :揭示正常胃粘膜、癌前病变和胃癌组织中MUC5AC基因的表达与其临床病理分型之间的联系。方法 :应用免疫组织化学SP法检测人正常胃粘膜、癌前病变粘膜以及胃癌组织中MUC5AC核粘蛋白的表达。结果 :人正常胃粘膜中的浅表 1/ 3范围内广泛分布MUC5AC基因产物 ( 10 0 % ) ,肠化、不典型增生和胃癌组织中的表达阳性率分别是 2 9.6%、10 0 %和 4 0 .0 %。胃癌组织中MUC5AC核粘蛋白的表达与胃癌患者的性别、肿瘤的部位和大小、淋巴结转移、肿瘤的分化和浸润、临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ,但MUC5AC阳性组与阴性组之间的胃癌的Lau ren’氏分型差别显著 (P <0 .0 5 )。结论 :MUC5AC是组成胃粘膜的粘蛋白基因之一 ,在胃癌和癌前病变是下调表达 。

急性白血病患者MUC1与WT1基因表达的临床意义

目的:探讨MUC1基因及WT1基因在急性白血病的表达及临床意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测54例初发或复发急性白血病(AL)患者MUC1基因以及WT1基因的表达,观察MUC1基因及WT1基因的表达与急性白血病患者疗效关系。结果:54例初治或复发AL中MUC1基因表达阳性率50.0%,WT1基因表达阳性率74.1%。MUC1基因阴性表达的初治非M3型AL19例治疗完全缓解率达94.7%,MUC1阳性表达的初治非M3型AL18例治疗完全缓解率55.6%;两组比较有显著性差异(P<0.05)。WT1基因表达阳性与否与化疗疗效无关。结论:MUC1和WT1基因在急性白血病中有一定的表达,MUC1基因阳性表达可作为急性白血病患者预后不良的一项分子生物学指标。

MUC1基因遗传多态性与密码子偏好性的生物信息学分析

为分析MUC1基因在物种间的遗传多态性和密码子偏好性,本文运用生物信息学方法对来自普通牛、印度牛、冈比亚按蚊、褐家鼠、野猪、人这6个物种的32条MUC1完全编码区域序列进行分析.结果表明,MUC1基因具有丰富的遗传多态性,且它的遗传多态性在种间大于种内;MUC1基因在GCT等27个密码子的使用上具有偏好性,尤其在GGC、CCA、TGA上偏好性较强.

MUC1基因免疫抑制H22肝癌生长的实验研究

目的:观察MUC1基因免疫对H22肝癌生长的特异性抑制作用。方法:采用股四头肌肌肉注射法将构建的MUCl基因疫苗pcDNA3.1-MUC1免疫 Balb/c小鼠,每次 100μg,3 wk/次,共3次,最后一次基因免疫后 3wk,接种表达MUC1的H22肝癌细胞。2 wk后观察、记录肿瘤的生长情况。于肿瘤细胞接种后43 d,处死全部动物,称肿瘤的质量。荷瘤小鼠的瘤组织常规HE染色。结果:肿瘤细胞接种后43d,MUC1预防组,质粒pcDNA3.1对照组及生理盐水阴性对照组H22肝癌大小分别为547±59mm^3,1185±84mm^3和1220±95 mm^3(P<0.01);平均瘤质量分别为 1.87 ± 0.96 g,4.19 ±1.34 g和4.23±1.32 g(P<0.01);pcDNA3.1对照组和生理盐水阴性对照组100％可见瘤体形成,肿瘤生长,而MUC1基因疫苗预防组仅见50％(5/10)的小鼠有瘤体形成,与对照组相比,MUC1预防组H22肝癌生长受到明显抑制(P<0.01);MUC1预防组小鼠免疫保护有显著差异(P<0.05).病理学检查结果显示,与pcDNA3.1对照组相比,MUC1 DNA疫苗预防组鼠H22肝癌组织大量坏死。结论:MUC1基因免疫显著抑制H22肝癌生长。

人MUC5AC基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其转录活性分析(英文)

目的:克隆人黏蛋白/黏液素5AC(MUC5AC)基因启动子并构建该启动子的荧光素酶报告系统,探讨该启动子的活性及转录靶向性。方法:运用Vector NT1软件包对MUC5AC基因5′端1 348 bp进行启动子特征分析;以人A549细胞基因组DNA为模板分离出人MUC5AC基因5′端非翻译区大小为1 348 bp的片段并进行测序鉴定,再以扩增产物为模板对启动子进行5′端删除分析,分别扩增737 bp(-689/+48),372 bp(-324/+48),112 bp(-64/+48)的片段,与荧光素酶报告基因载体重组构建,通过双荧光素酶活性进行转录活性分析。应用定点突变技术,在重组质粒的基础上建立MUC5AC启动子区SP-l结合位点和核因子(NF)-κB结合位点单独突变体,并测定中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的转染细胞荧光素酶的相对活性。结果:序列分析发现人MUC5AC基因5′端1 348 bp的区域内存在多个顺式作用元件,成功构建了4个不同长度的MUC5AC启动子报告基因载体。双荧光素酶活性分析372 bp片段为有活性的最小片段。NE可诱导含有MUC5AC启动子区NF-кB结合位点单独突变体(pGL3E-MUC5AC-NF-кB-MU)荧光素酶相对光强度增加,而NE不能诱导SP-l结合位点单独突变体(pGL3E-MUC5AC-SP-1-MU)荧光素酶表达增加。结论:上述载体的成功构建及序列分析为进一步研究MUC5AC基因的启动子活性及基因表达调控奠定了基础。MUC5AC 5′上游序列中-324/-64位点存在参与NE诱导MUC5AC基因表达的重要调控元件,位于此区域的顺式作用元件SP-1位点在NE诱导MUC5AC基因表达机制中起重要作用。

ITGB5和MUC13基因在产肠毒素大肠杆菌抗性和易感大白仔猪间的差异表达分析

为分析仔猪腹泻抗性候选基因在大白仔猪抗性和易感个体间的差异表达情况及组织表达特异性,实验利用荧光定量PCR技术检测整合素β5(ITGB5)基因和黏蛋白13(MUC13)基因在仔猪小肠、脾脏、肺脏、胸腺、肝脏和淋巴6种组织中的表达水平以及在产肠毒素大肠杆菌(ETEC F4)抗性和易感仔猪个体间的差异表达情况。结果表明:大白仔猪ITGB5基因在6种组织中均有一定的表达,在抗性个体小肠组织中的表达量低于易感个体(P>0.05);MUC13基因在小肠中高度表达,在其他组织中表达量较低,且抗性个体的表达量显著高于易感个体(P<0.05)。由此可知,小肠组织中ITGB5基因的低表达和MUC13基因的高表达可能有助于降低致病性大肠杆菌黏附到小肠上皮细胞上,进而实现对致病性大肠杆菌的抗性。ITGB5基因和MUC13基因可能与仔猪腹泻抗性存在密切关系,都可以作为抗性候选基因用于标记辅助选择,应用于抗腹泻仔猪的选育。

MUC1及同种型MUC1/Y基因mRNA在膀胱癌中的表达及临床意义

目的:探讨肿瘤相关抗原MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因在膀胱癌中mRNA的表达及其临床意义。方法:22例膀胱癌的组织样本(实验组)和10例正常膀胱组织样本(对照组)中提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测两组样本中MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因mRNA表达水平。结果:膀胱癌组织的MUC1mRNA水平较正常膀胱组织显著增高(P<0.01);Ⅲ-Ⅳ期膀胱癌组织的MUC1/YmRNA水平较Ⅰ-Ⅱ期膀胱癌组织显著增高(P<0.01)。结论:MUC1及同种型MUC1/Y粘蛋白基因mRNA表达水平与膀胱癌有关,对膀胱癌的诊断和治疗有临床意义。

Muc15基因在卵巢癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系

目的：检测Muc15基因在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌组织发生、发展中所起的作用。方法应用Western blot、RT-PCR技术检测本院2012年9月~2014年3月收治的65例正常卵巢组织、30例良性卵巢肿瘤组织及65例卵巢癌组织中Muc15蛋白相对表达量及mRNA相对表达量，分析其在三种组织中表达的差异。结果 Muc15蛋白相对表达量、mRNA相对表达量在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤组织及卵巢癌组织中比较差异有统计学意义（p〈0.05）；Muc15蛋白相对表达量、mRNA相对表达量在临床分期为0~Ⅱ期及Ⅲ~Ⅳ期的卵巢癌组织中比较差异有统计学意义（p〈0.05）；Muc15蛋白相对表达量、mRNA相对表达量在有淋巴结转移组和无淋巴转移组的卵巢癌组织中比较差异有统计学意义（p〈0.05）；Muc15蛋白相对表达量、mRNA相对表达量在不同年龄和肿瘤直径卵巢癌组织中比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Muc15基因在卵巢癌组织中的表达量升高，其高表达水平可能与卵巢癌的发生有关。

MUC1基因,CA15-3与肺癌的临床研究进展

随着肺癌发病率的升高．肺癌的早期诊断和临床监测已经越来越受到重视。近年来分子生物学的进展．对肿瘤发生机制在分子水平上有了更新的认识。基因研究越来越受到重视．MUC1基因在人类肿瘤的发生过程中起重要作用．其与肿瘤侵袭和转移等关系密切。血清MUC1粘蛋白（亦MUC1基因的编码产物），又称CA15—3，其对肺癌辅助诊断，预后，临床监测有重要意义。

磁转染MUC1/Y基因入树突状细胞抗膀胱肿瘤的免疫效应研究

目的:研究体外磁转染人MUC1/Y基因至人树突状细胞(DC)的可行性,以及在体外诱导特异性抗MUC1/Y膀胱癌的免疫效应。方法:以葡聚糖磁性纳米颗粒(DMN)作为载体,在多聚赖氨酸(PLL)的辅助下,通过静电作用结合MUC1/Y基因的真核表达载体pEGFP-C1-MUC1/Y,在铜-硼-锡磁块的固定磁场作用下转染至人DC中,荧光显微镜下以及流式细胞仪观察其转染效率;再将这种转基因DC与自体T细胞共培养,观察其致敏的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对MUC1/Y特异性抗膀胱癌(膀胱肿瘤BIU87细胞系)的杀伤活性,即分别用LDH释放法检测CTL杀伤活性和透射电镜观察CTL诱导靶细胞凋亡情况;ELISA法测定基因修饰后的DC刺激自体T细胞分泌IFN-γ的能力。结果:pEGFP-C1/-MUC1/Y转染效率为15%左右,荧光显微镜下可观察到明显绿色荧光蛋白的表达;与自体T细胞混合培养后能诱导出显著的MUC1/Y特异性的CTL,对BIU87细胞的杀伤实验表明T-DC-MUC1的杀伤活性约为52%,显著高于对照组T-DC诱导的CTL;在透射电镜下也可以清楚的观察到部分BIU87膀胱肿瘤细胞出现了细胞核核仁消失,染色质浓集于核膜周围等早期凋亡表现;基因修饰后的DC能刺激自体T细胞分泌高水平的IFN-γ,与未转染的DC相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:葡聚糖磁性纳米颗粒(DMN)在固定磁场的作用下成功将MUC1/Y基因转入DC,并可有效诱导出特异性的抗MUC1/Y膀胱癌的免疫效应。

RT-PCR检测MUC1基因转染树突状细胞的表达

目的 向人外周血来源的树突状细胞 (DCs) 转染人MUC1质粒, 使DCs特异性的表达和提呈MUC1。方法 应用脂质体将人MUC1质粒转染体外培养的外周血来源的DCs, RT-PCR检测转染人MUC1质粒DCs的表达。结果 转染MUC1质粒的DCs, RT-PCR检测有一特异性扩增带。结论 用脂质体能成功地将人MUC1质粒转入DCs并表达。

人正常腺上皮组织中MUC6基因的表达

应用免疫组织化学和原位杂交方法检测人正常腺上皮中 MU C6基因的表达 ,揭示 MU C6基因在正常人腺上皮组织中的分布异质性及其特点。结果显示 :MU C6基因编码的核心蛋白及其 m RNA主要分布于正常胃粘膜胃腺的基底部 ,上皮细胞无 MU C6基因表达 ,呈细颗粒状 ,位于细胞核周 ,胃底、胃窦的表达无区别 ;十二指肠绒毛上皮内的表达呈弥漫性 ,均质状 ,杯状和柱状细胞的表达类似 ,杯状细胞的粘液滴内未测得 MUC6基因产物 ;空肠、结肠组织中无 MUC6基因的表达 ;胆囊上皮组织内有强阳性 MUC6核心蛋白的表达 ,而宫颈上皮中表达较弱。实验提示

MUC6基因的一个单核苷酸多态性与胃癌没有关联

目的:检测粘液素MUC6基因单核苷酸多态性(SNP)rs7943115与胃癌的关系。方法:应用TaqMan方法对272名胃癌患者和374名健康者进行基因分型,并用非条件性Logistic回归分析所检测的SNP与胃癌的关系。结果:MUC6基因SNP与胃癌的发病没有关联。结论:SNP7943115在胃癌的发病过程中不起主要作用。

人胰腺癌细胞株MUC2基因启动子区甲基化状态检测和分析

背景:近年表观遗传学修饰方式之一的DNA甲基化成为肿瘤研究的热点。目前已发现胰腺癌中存在MUC2表达异常。目的:探讨人胰腺癌细胞株MUC2表达与其基因启动子区甲基化的关系,以了解胰腺癌的发生机制。方法:以人胰腺癌细胞株AsPC-1、BxPC-3、CFPAC-1、PANC-1、SW1990和PaTu8988s为研究对象,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测去甲基化制剂DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后各胰腺癌细胞株MUC2 mRNA/蛋白表达的变化,以甲基化特异性PCR(MSP)结合测序检测MUC2基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果:5-Aza-CdR处理前,胰腺癌细胞株AsPC-1、CFPAC-1和SW1990无MUC2 mRNA/蛋白表达或低表达:经5-Aza-CdR处理后,MUC2 mRNA/蛋白重新表达。MSP结合测序显示上述胰腺癌细胞株MUC2基因启动子区CpG岛存在高甲基化。结论:人胰腺癌细胞株MUC2表达抑制与其基因启动子区CpG岛高甲基化相关。MUC2基因启动子区CpG岛高甲基化可能在胰腺癌的发生、发展中起一定作用。