MUC-5AC核粘蛋白在早期胃癌中的表达和意义

目的 探讨胃正常粘膜、不典型增生以及早期胃癌中MUC-5AC核粘蛋白的表达状态及临床病理意义。方法 应用免疫组织化学s-p法检测人正常胃粘膜、不典型增生及早期胃癌组织中的表达。结果 人正常胃粘膜中浅表1/3范围内广泛分布MUC-5Ac核粘蛋白(100％)。不典型增生和早期胃癌组织中表达的阳性率分别为70％和41.7％。早期胃癌中MUC-5AC核粘蛋白的表达与患者的性别、肿物的部位、大小、浸润深度、淋巴结转移和分化程度、异型度及癌旁肠化生和癌旁淋巴反应无关(P>0.05)。但与Lauren’s分型(肠型、胃型、混合型)密切相关,且差异显著(P<0.05)。结论 MUC-5AC核粘蛋白在胃粘膜不典型增生和胃癌早期阶段即出现不同程度的异常表达,整个过程呈下调趋势。且与Lauren's分型密切相关。

MUC5AC、MUC6核粘蛋白合成肽诱导小鼠抗肿瘤免疫反应

目的:探讨MUC5AC,MUC6核粘蛋白合成肽在诱导小鼠抗肿瘤免疫反应中的作用.方法:采用动物实验方法观察MUC5AC和MUC6黏核蛋白的合成肽诱导小鼠的细胞和体液免疫反应及其淋巴细胞体外抗肿瘤作用.结果:MUC5AC,MUC6合成肽可诱导小鼠产生相应的抗体及迟发型过敏反应,但不能产生脾淋巴细胞的明显增生及体外抗7901胃癌细胞株的作用.结论:MUC5AC,MUC6合成肽免疫小鼠可引发体液及细胞免疫反应,但尚不足以产生淋巴细胞毒作用.

人正常胃肠道、生殖道粘膜中MUC5AC核粘蛋白及其mRNA定位的研究

目的:揭示MUC5AC基因在人胃肠道和生殖道粘膜组织中的表达异质性及其特点,为进一步研究其与疾病关系提供正常的形态学基础。方法:应用免疫组织化学和原位杂交方法。结果:MUC5AC基因编码的核粘蛋白及其mRNA主要分布于人正常胃粘膜表面1/3,包括粘膜的上皮层和胃腺的中上部,呈细颗粒状,位于阳性细胞的胞浆内,核周明显,胃窦、胃底的表达无区别。十二指肠、空肠、结肠及宫颈组织内无表达,胆囊粘膜内灶状分布的阳性染色细胞。结论:MUC5AC基因主要在胃和胆囊组织内表达,而小肠、结肠、宫颈无表达,提示MUC5AC基因表达存在组织异质性。

MUC5AC、MUC6核粘蛋白合成肽诱导小鼠抗肿瘤免疫反应

目的 探讨MUC5AC、MUC6核粘蛋白合成肽在诱导小鼠抗肿瘤免疫反应中的作用。方法 采用动物实验方法观察MUC5AC和MUC6粘核蛋白的合成肽诱导小鼠的细胞和体液免疫反应及其淋巴细胞体外杭肿瘤作用。结果 MUC5AC、MUC6合成肽可诱导小鼠产生相应的抗体及迟发型过敏反应，但不能产生脾淋巴细胞的明显增殖及体外杭790l胃癌细胞株的作用。结论 MUC5AC、MUC6合成肽免疫小鼠可引发体液及细胞免疫反应，但尚不足以产生淋巴细胞毒作用。

钙激活的氯通道gob-5和粘蛋白基因Muc5ac在小鼠哮喘模型肺部的表达

目的:研究“钙激活的氯通道”成员之一gob-5和粘蛋白基因Muc5ac在小鼠哮喘模型肺部的表达。方法:22只清洁级BALB/c小鼠随机分成哮喘组和对照组,用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和免疫组化法分别测定肺组织gob-5mRNA和粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达。结果:小鼠哮喘组肺组织gob-5mRNA表达阳性(0·2297±0·0186,A),而对照组未出现gob-5mRNA的表达(P<0·01);哮喘组Muc5ac蛋白表达(0·6637±0·0127,A)明显高于对照组(0·2060±0·0179,A)(P<0·01);哮喘组肺组织gob-5mRNA表达与Muc5ac蛋白表达呈直线正相关(r=0·864,P<0·05)。结论:Gob-5mRNA表达的上调可能在哮喘小鼠气道粘液过度分泌中起着关键作用;抑制gob-5的表达将为哮喘的治疗提供新的策略。

基于核转录因子-κB信号通路研究小青龙汤对肺癌H292细胞分泌黏蛋白5AC的调控机制

目的探讨小青龙汤对人肺癌H292细胞活性及分泌黏蛋白5AC(MUC5AC)的影响,研究小青龙汤治疗肺癌的分子机制.方法选用对数分裂期的H292细胞,实验分为空白对照组、炎症模型组、核转录因子-κB(NF-κB)通路抑制剂组〔吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)100μmol/L〕、小青龙汤高、中、低剂量组(1000、500、250 mg/L).采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各剂量组小青龙汤对H292细胞活性的影响;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的H292细胞分泌MUC5AC的量以及高、中剂量小青龙汤对炎症模型细胞分泌MUC5AC、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测小青龙汤对炎症模型细胞NF-κB信号通路及其抑制蛋白(IκB)和P65蛋白表达的影响.结果与空白对照组比较,小青龙汤作用于细胞24 h和48 h后其吸光度值(A值)均明显降低,并呈现剂量依赖性,其中小青龙汤1000 mg/L和500 mg/L 2个浓度对细胞的抑制率比较适合后续实验.与炎症模型组比较,PDTC组、小青龙汤高、中剂量组MUC5AC、IL-8、TNF-α的分泌均明显降低,其中以小青龙汤高剂量组降低最为明显〔MUC5AC(ng/L):胞外含量为1318.63±126.86比2531.94±87.77,胞内含量为1048.96±54.33比1217.57±80.77,IL-8(ng/L):583.94±28.04比832.01±73.48,TNF-α(ng/L):104.99±6.79比151.95±8.21,均P<0.05〕.Western Blot结果显示:与空白对照组比较,炎症模型组中IκB的表达明显降低(IκB/β-actin:0.5246±0.0641比0.9182±0.1172,P<0.05),P65表达明显升高(P65/β-actin:1.2031±0.0379比0.9787±0.1605,P<0.05);与炎症模型组比较,PDTC组、小青龙汤高剂量组IκB表达均明显升高(IκB/β-actin:0.9352±0.0833、0.8178±0.0578比0.5246±0.0641,均P<0.05),而P65的表达均明显降低(P65/β-actin:0.8636±0.0592、0.9313±0.1133比1.2031±0.0379,均P<0.05).结论中、高剂量小青龙汤效果最佳,可抑制肺癌H292细胞活性,降低细胞MUC5AC分泌,减少IL-8、TNF-α释放,这可能与调控NF-κB信号通路有关.

胃肠化生黏膜小凹结构与粘蛋白MUC2、MUC5AC表达的关系

近年来,研究表明肠型胃癌的发生多由慢性胃炎开始,经历肠化生、异型增生等变化,直至最后发生癌变,在这一过程中,胃黏膜上皮细胞内粘蛋白的表达发生了明显的变化。肠化生是明确的胃癌癌前病变之一,目前,利用放大内镜已可对肠化生黏膜表面小凹的形态结构进行细微的观察,但黏膜小凹结构的这种变化与细胞内粘蛋白表达之间的关系,目前尚无明确结论,本文对此进行了相关探讨,报告如下。

中医药对慢性阻塞性肺疾病气道粘液高分泌粘蛋白Muc5ac的影响研究概况

慢性阻塞性肺疾病是一种严重威胁人类健康的常见病和多发病,气道粘液高分泌是其重要特征,Muc5ac作为气道粘液中最为重要的粘蛋白,通过其防治COPD已备受关注。中医药在治疗本病方面手段多样化,疗效也得到广泛认可。

粘蛋白MUC2,MUC5AC与卵巢转移性肿瘤

在临床妇科恶性肿瘤中 ,转移性卵巢癌以难以治疗而著称。转移性卵巢癌不易早期发现 ,许多患者在初诊时病程已到晚期 ,手术难以达到根治 ,患者往往需要术后化疗控制病情 ,而患者对化疗药物的抗药性更增加了治疗上的困难。来自胃、肠道的肿瘤是最常见的卵巢转移瘤 ,约占全部卵巢转移性肿瘤的 80 %左右 ,卵巢以外的肿瘤转移到卵巢后 ,其外形往往同原发性卵巢肿瘤相同 ,因此转移性卵巢肿瘤的诊断率不高 ,国外报道约 4 5%的结肠转移性卵巢肿瘤在临床被诊断为原发性卵巢肿瘤 ,因此对于各种卵巢肿瘤的诊断需要特别研究。另外 ,临床上原发性卵巢肿瘤和转移性卵巢肿瘤的治疗原则不同 ,因而对于来源于胃、肠道继发性的卵巢肿瘤患者的早期诊断也是十分重要的。首先 ,找到原发病灶更可以肯定转移性肿瘤的诊断 ;其次 ,根据原发病灶定位 ,可与继发性病灶一起制定出一个较适当的治疗方案。根据一般的规律 ,转移性肿瘤与原发性肿瘤的组织类型是一致的 ,尽管分化程度可能有所不同 ,但组织结构基本上相同。现今有许多方法可用于原发与胃、肠道转移性卵巢肿瘤的鉴别诊断研究 ,如 :大体与组织学分类 ,但有时对于一些特殊病例却不一定适用 ,近年来单克隆抗体 ,如 :CEA,细胞角蛋白 2 0。

乙酰半胱氨酸抑制脂多糖诱导的人肺NCI-H292细胞粘蛋白MUC5AC表达

目的:研究乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导的气道粘蛋白MUC5AC表达的调控作用并探讨可能的机制。方法:体外培养人气道上皮细胞NCI-H292,实验分为对照组、黏液高表达组(LPS组)及乙酰半胱氨酸干预组(NAC+LPS组),分别采用Real time PCR和Western blot方法检测NCI-H292细胞MUC5AC、Nrf2的m RNA含量及蛋白表达水平。结果:LPS刺激NCI-H292细胞表达MUC5AC,MUC5AC m RNA及蛋白表达分别增加7.169±1.785及1.473±0.098(P均<0.05)。NAC促进NCI-H292细胞Nrf2表达,抑制LPS诱导的MUC5AC表达(P<0.05),以30m M最为显著。结论:乙酰半胱氨酸通过促进Nrf2基因表达,抑制气道上皮细胞粘蛋白MUC5AC分泌。

MUC5AC粘蛋白在正常胆囊、结石性胆囊炎和胆囊腺瘤样息肉粘膜组织中表达的意义

目的通过对MUC5Ac基因在人正常胆囊、结石性胆囊炎和胆囊息肉黏膜组织中粘蛋白的表达规律的研究，探讨其在上述疾病发生发展中的作用。方法用BCl单抗和免疫组化方法检测上述组织中MUC3AC粘蛋白的表达。结果MUC5AC粘蛋白在正常胆囊阳性表达率为54．2％，粘蛋白弥漫均匀分布于胞浆的两极区域；在结石性胆囊炎：胆红素结石和胆固醇结石中粘蛋白的表达阳性率分别为47．4％、61．1％，在胆固醇结石黏膜表面的分布与正常组织相同，在胆红素结石黏膜的分布主要位于腺腔表面；胆囊腺瘤性息肉的MUC5Ac粘蛋白的表达最高，达79．2％，有50％的标本呈过表达，主要在柱状细胞表达，呈颗粒状分布。结论MUC5AC粘蛋白可在正常胆囊黏膜组织中存在；和 炎症性病变关系不大；但在正常黏膜向癌前病交(如胆囊腺瘤性息肉)转化过程中呈上调表达，提示黏膜的异常转化可能和粘蛋白基因(也可能是癌基因)的激活有关。

粘蛋白5AC-EGFR通路与哮喘关系及中医药研究进展

[目的]总结气道粘蛋白5AC(MUC5AC)高分泌中EGFR信号通路及其调控机制,探索其在中医药防治哮喘机制研究中的意义。[方法]查阅相关文献,整理、归纳MUC5AC生物学特性、MUC5AC与哮喘的关系、EGFR信号通路与MUC5AC的关系以及近年来中医药抑制气道MUC5AC高分泌的研究情况。[结果]EGFR信号通路是多种因素引起人类哮喘MUC5AC高分泌的共同通路。中医药对哮喘气道MUC5AC高分泌有较好的抑制作用,但其具体机制尚未见深入研究。[结论]气道MUC5AC高分泌中EGFR信号通路及其调控机制的研究对于中医药有效防治哮喘机制的探索具有重要意义。

粘蛋白MUC5AC和MUC6在胃印戒细胞癌中的表达及意义

目的 探讨粘蛋白MUC5AC和MUC6在胃印戒细胞癌中的表达及其与病理分型和肿瘤生物学行为的关系。方法 依据2000年WHO分类标准，将68例胃印戒细胞癌分成5种类型并进行临床病理分析；应用免疫组织化学SP法检测胃印戒细胞癌中MUC5AC和MUC6的表达并分析其与部分临床病理指标的关系。结果 胃印戒细胞癌中MUC5AC和MUC6蛋白阳性表达率分别为64．7％和39．7％。MUC5AC蛋白在肿瘤大小和浸润深度中表达的差异有统计学意义（P〈0．05）；MUC6蛋白在性别和发病部位中表达的差异亦有统计学意义（P〈0．05）。结论 MUC5AC粘蛋白的表达可能与胃印戒细胞癌的肿瘤大小与浸润深度有关；MUC6粘蛋白的表达可能与胃印戒细胞癌性别和发生部位有关。

脂多糖通过Nrf2信号通路诱导人气道上皮细胞MUC5AC表达

目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路在脂多糖(LPS)上调气道黏蛋白5AC(MUC5AC)表达中的作用。方法:LPS干预体外培养的人气道上皮细胞系A549细胞,以诱导MUC5AC表达。分别转染Nrf2小干扰RNA(siRNA)和Nrf2过表达质粒(pcDNA3-Myc3-Nrf2),敲减或过表达A549细胞中的Nrf2,再加入10 mg/L LPS干预24 h,RT-qPCR和Western blot法分别检测细胞MUC5AC、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、Nrf2及其下游抗氧化因子[NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)、谷胱甘肽S-转移酶pi(GST-pi)和血红素加氧酶1(HO-1)]的mRNA及蛋白表达情况。结果:(1)LPS上调A549细胞黏蛋白MUC5AC表达(P<0.01),上调Nrf2及其下游抗氧化因子NQO1、GCLC及GST-pi表达,下调HO-1表达(P<0.05)。(2)与阴性对照组相比,转染Nrf2 siRNA能有效抑制A549细胞Nrf2的表达;敲减Nrf2的A549细胞经LPS干预后,MUC5AC的表达显著增加(P<0.05)。(3)与对照组相比,转染过表达质粒pcDNA3-Myc3-Nrf2明显增加A549细胞Nrf2的表达;增强Nrf2表达后,LPS诱导的MUC5AC表达被抑制(P<0.05)。结论:Nrf2信号通路参与调控LPS诱导的气道上皮细胞MUC5AC表达。

Elafin在人支气管上皮细胞系16HBE胞质内对黏蛋白5AC生成的影响

目的探讨Elafin在胞质内对表皮生长因子(EGF)诱导的黏蛋白(MUC)5AC生成的影响及其作用机制。方法体外培养人支气管上皮细胞系16HBE,将已构建好的pEGFP-N1-Elafin载体通过LipofectamineTM2000转染到16HBE细胞中,以转染空质粒载体的16HBE细胞作为对照,均给予外源性EGF作为刺激物共同孵育。以RT-PCR和ELISA分别检测细胞内黏蛋白(MUC)5AC mRNA水平和MUC5AC含量。间接免疫荧光细胞化学法结合激光共聚焦显微镜检测细胞核中核因子(NF)-κB的活性。免疫共沉淀法结合Western blot检测SUMO-1-p-IκBα含量。结果转染重组质粒的细胞中MUC5ACmRNA水平、MUC5AC的含量(0.36±0.09)以及NF-κB的活性显著低于转染空载体的对照组细胞(MUC5AC的含量0.55±0.07)(P<0.01),而SUMO-1-p-IκBα的含量则显著高于后者(P<0.01)。结论 Elafin能够通过促进p-IκBα的类泛素化阻止NF-κB的活化,从而下调MUC5AC的生成。

Muc-5ac和MDR3在胆囊结石形成中的作用

目的探讨黏蛋白Muc-5ac基因和多重耐药因子3(MDR3)在胆囊结石形成中的作用及其相互关系。方法应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Muc-5ac和MDR3在36例胆囊结石、20例胆囊炎和12例正常胆囊的胆囊黏膜和肝组织中的表达。结果 Muc-5ac黏蛋白在胆囊结石和胆囊炎的胆囊黏膜中表达的阳性率分别为66.7%(24/36)和40%(8/20),显著高于正常对照组33.3%(4/12)(P<0.01),Muc-5ac黏蛋白表达的阳性率在胆囊结石组又显著高于胆囊炎组(66.7%vs 40%)(P<0.05)。胆囊结石的肝组织中MDR3 mRNA的表达量(1.14±0.31)极显著低于胆囊炎的肝组织(1.89±0.83)和正常肝组织(1.97±0.71)(P<0.01),但MDR3 mRNA的表达量在胆囊炎的肝组织中与正常肝组织之间无显著性差异(1.89±0.83 vs 1.97±0.71)(P>0.05)。胆囊结石的胆囊黏膜中,Muc-5ac蛋白阳性表达者,其肝组织中MDR3 mRNA表达量明显减少,与Muc-5ac蛋白阴性表达组相比,MDR3 mRNA的表达量在两组间差异极显著(0.82±0.17 vs 1.45±0.24)(P<0.01)。结论 Muc-5ac基因参与了胆囊结石形成的过程。在胆囊结石形成的后期阶段,MDR3与Muc-5ac基因相互作用,共同影响胆囊结石的形成。

甘草酸对炎性刺激诱导气道黏蛋白5AC高表达的抑制作用

目的:了解甘草酸对中性粒细胞弹力蛋白酶(HNE)诱导的人气道上皮细胞(16HBE)黏蛋白(MUC)5AC高表达的抑制作用,探讨可能参与其中的信号转导通路。方法:体外培养16HBE细胞,给予HNE刺激,以甘草酸为干预因素。RT-PCR检测干预前后细胞中MUC5AC,p38,核因子κB(NF-κB)p65和核转录因子κB抑制蛋白α(inhibitorαof nuclear transcription factorκB,IκBα)mRNA含量,Western印迹分析磷酸化p38(p-p38)、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)和磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光法检测细胞内MUC5AC蛋白含量。结果:HNE刺激后,MUC5AC,p38和NF-κB p65的基因转录及蛋白和磷酸化蛋白表达水平较对照组均明显升高(P<0.05),同时伴有IκBαmRNA表达和蛋白磷酸化水平的降低(P<0.05)。加入干预因素甘草酸后可显著抑制MUC5AC,p38和NF-κB p65的基因转录及蛋白和磷酸化蛋白的表达(P<0.05),而IκBα的mRNA和蛋白磷酸化水平明显升高(P<0.05)。结论:甘草酸可通过下调p38和NF-κB的表达,并同时上调NF-κB与IκBα的结合,抑制HNE诱导的MUC5AC高表达,为气道黏液高分泌疾病的治疗提供新的方向。

缺氧诱导因子1α与黏蛋白5在慢性鼻-鼻窦炎组织中的表达与意义

目的探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)与黏蛋白5AC(MUC5AC)、黏蛋白5B(MUC5B)m RNA在慢性鼻-鼻窦炎(CRS)中的表达水平及其相关性。方法选82例CRS伴鼻息肉(CRS with nasal polyps,CRSw NP)组、88例CRS不伴鼻息肉(CRS without nasal polyps,CRSs NP)组以及15例正常上颌窦口黏膜作为对照组。收集3组鼻窦黏膜,采用免疫组织化学法和逆转录定量PCR(q RT-PCR)检测HIF-1α与MUC5AC、MUC5B的表达并分析相关性。结果 1免疫组化结果:光镜下,CRSs NP或CRSw NP组中黏膜上皮MUC5AC的染色更多,主要位于胞浆内,呈浅黄色或棕黄色颗粒;MUC5B主要在黏膜下腺腺体的黏液细胞中表达;HIF-1α主要定位在黏膜上皮细胞核,在胞浆内也有表达,呈浅黄色或棕黄色颗粒,较对照组明显增多。2q RT-PCR结果:CRSw NP组中HIF-1α、MUC5AC、MUC5B m RNA的相对表达量分别为1.565±0.145、0.980±0.215、1.432±0.263;CRSs NP组中相对表达量分别为1.612±0.253、0.901±0.279、1.509±0.289;对照组中相对表达量分别为0.381±0.162、0.357±0.164、0.400±0.218;CRSs NP组、CRSw NP组与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。CRSs NP组、CRSw NP组中HIF-1α与M UC5AC、M UC5B m R NA的表达均呈正相关(CRSw NP组:r=0.501、0.676,CRSs NP组:r=0.527、0.601,P均<0.05)。结论 HIF-1α与MUC5AC、MUC5B m RNA在CRS中表达水平明显升高,且HIF-1α与MUC5AC、MUC5B m RNA表达存在密切联系。

三种粘蛋白在胃癌组织中表达及其临床意义

目的研究粘蛋白(MUC1,MUC2,MUC5AC)在胃癌组织中表达及它们与临床病理学行为之间的关系。方法应用免疫组化S—P法检测94例原发性的胃癌组织标本中MUC1,MUC2,MUC5AC在胃癌组织中的表达。结果 1.MUC1的阳性表达率为82％,不同组织学之间的表达有明显差异(P<0.05),在中高分化管状腺癌中表达最强,表达程度与病人年龄、淋巴结有无转移及肿瘤大小密切相关(P<0.05);2.MUC2表达的阳性率为84％,不同组织学类型肿瘤组织中的表达有显著性差异(P<0.05),在粘液腺癌中表达最强100％(7/7);3.MUC5的阳性率为40％(38/94),除性别之间存在差异外,与其它的临床资料无关。4.相关分析发现MUCl的表达与MUC2的表达呈正相关。结论 1、MUC1在不同的组织学类型的胃癌中表达不同,在中高分化腺癌中最高,并与淋巴结转移、肿瘤大小有关;2.MUC2在不同的组织学类型的胃癌中表达不同,粘液腺癌中表达最强,可作为研究粘液腺癌的较好指标;3.MUC5AC在胃癌组织中的表达下降,可作为研究胃癌发生、进展的较好指标。4.MUCl和MUC2之间可能有协同作用。