胃癌及癌前病变组织中MUC5AC基因的异常表达及意义

目的 :揭示正常胃粘膜、癌前病变和胃癌组织中MUC5AC基因的表达与其临床病理分型之间的联系。方法 :应用免疫组织化学SP法检测人正常胃粘膜、癌前病变粘膜以及胃癌组织中MUC5AC核粘蛋白的表达。结果 :人正常胃粘膜中的浅表 1/ 3范围内广泛分布MUC5AC基因产物 ( 10 0 % ) ,肠化、不典型增生和胃癌组织中的表达阳性率分别是 2 9.6%、10 0 %和 4 0 .0 %。胃癌组织中MUC5AC核粘蛋白的表达与胃癌患者的性别、肿瘤的部位和大小、淋巴结转移、肿瘤的分化和浸润、临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ,但MUC5AC阳性组与阴性组之间的胃癌的Lau ren’氏分型差别显著 (P <0 .0 5 )。结论 :MUC5AC是组成胃粘膜的粘蛋白基因之一 ,在胃癌和癌前病变是下调表达 。

人MUC5AC基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其转录活性分析(英文)

目的:克隆人黏蛋白/黏液素5AC(MUC5AC)基因启动子并构建该启动子的荧光素酶报告系统,探讨该启动子的活性及转录靶向性。方法:运用Vector NT1软件包对MUC5AC基因5′端1 348 bp进行启动子特征分析;以人A549细胞基因组DNA为模板分离出人MUC5AC基因5′端非翻译区大小为1 348 bp的片段并进行测序鉴定,再以扩增产物为模板对启动子进行5′端删除分析,分别扩增737 bp(-689/+48),372 bp(-324/+48),112 bp(-64/+48)的片段,与荧光素酶报告基因载体重组构建,通过双荧光素酶活性进行转录活性分析。应用定点突变技术,在重组质粒的基础上建立MUC5AC启动子区SP-l结合位点和核因子(NF)-κB结合位点单独突变体,并测定中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的转染细胞荧光素酶的相对活性。结果:序列分析发现人MUC5AC基因5′端1 348 bp的区域内存在多个顺式作用元件,成功构建了4个不同长度的MUC5AC启动子报告基因载体。双荧光素酶活性分析372 bp片段为有活性的最小片段。NE可诱导含有MUC5AC启动子区NF-кB结合位点单独突变体(pGL3E-MUC5AC-NF-кB-MU)荧光素酶相对光强度增加,而NE不能诱导SP-l结合位点单独突变体(pGL3E-MUC5AC-SP-1-MU)荧光素酶表达增加。结论:上述载体的成功构建及序列分析为进一步研究MUC5AC基因的启动子活性及基因表达调控奠定了基础。MUC5AC 5′上游序列中-324/-64位点存在参与NE诱导MUC5AC基因表达的重要调控元件,位于此区域的顺式作用元件SP-1位点在NE诱导MUC5AC基因表达机制中起重要作用。

^(32)P标记寡聚核苷酸探针检测胃癌组织中MUC5AC mRNA表达

目的 揭示正常胃粘膜、癌前病变和胃癌组织中MUC5AC基因转录水平的表达及其临床病理意义。方法 应用32 P标记寡聚核苷酸探针和原位杂交方法检测组织切片中的MUC5ACmRNA的表达。结果 人正常胃粘膜中的浅表 1/3范围内广泛分布MUC5AC基因的mRNA ,肠上皮化生和胃癌组织中的表达阳性率分别是 15 .4%和 2 5 %。胃癌组织中MUC5ACmRNA的表达与胃癌患者的性别、肿瘤的部位和大小、淋巴结转移、肿瘤的分化和浸润、临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ,但MUC5AC阳性组和阴性组之间的胃癌Lauren’氏分型差别显著 (P <0 .0 5 )。结论 MUC5ACmRNA在胃癌和肠上皮化生组织中呈下调表达 。

舒肺贴对COPD大鼠肺组织IL-8、TNF-α及黏蛋白MUC5AC表达的影响

目的探讨舒肺贴(芫花、芥子、延胡索等)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子水平,以及肺组织黏蛋白基因MUC5AC表达的影响。方法将80只健康SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、舒肺贴组、氨茶碱组。采用烟熏联合脂多糖(LPS)感染法建立大鼠慢阻肺模型,AniRes2005动物肺功能分析系统测定大鼠肺功能,ELISA法检测各组大鼠血清、BALF中IL-8、TNF-α含有量,免疫组织化学染色观察黏蛋白基因MUC5AC的表达。结果 ELISA检测结果显示,模型组、舒肺贴组和氨茶碱组大鼠BALF和血清中IL-8、TNF-α含有量明显高于正常对照组,舒肺贴组和氨茶碱组与模型组相比均显著降低。相比舒肺贴组,氨茶碱组在降低TNF-α含有量方面效果更显著,但两者在降低IL-8含有量方面效果无明显差异。免疫组化结果显示,黏蛋白基因MUC5AC主要表达于支气管管腔内,其次是上皮、间质组织,淋巴组织也有少量表达。模型组积分光密度IOD值较正常对照组升高,而舒肺贴组、氨茶碱组较模型组明显降低。结论舒肺贴可以明显改善慢阻肺大鼠的肺通气功能,降低炎症因子IL-8、TNF-α含有量,减轻气道及肺组织炎症,下调MUC5AC黏蛋白,对气道黏蛋白高分泌有明显的抑制作用。

氨气对4~6周龄肉鸡免疫器官中MUC5AC及E-cd基因表达的影响

为了研究鸡处于高浓度氨气环境中免疫系统的变化,试验采用实时荧光定量PCR方法检测经15,30,60,0 mg/m3氨气处理(A~D组)后的4~6周龄肉鸡法氏囊、胸腺及脾脏等免疫器官中相关免疫基因MUC5AC和E-cd的表达情况。结果表明:6周龄时,B组肉鸡法氏囊中MUC5AC与E-cd基因的相对表达水平为D组的10倍左右(P<0.05);胸腺中MUC5AC基因相对表达水平为D组的5倍左右(P<0.05),E-cd基因相对表达水平也升高但与D组比较差异不显著(P>0.05);脾脏中MUC5AC基因相对表达水平也升高但与D组比较差异不显著(P>0.05),而E-cd基因相对表达水平与D组比较差异显著(P<0.05)。B组4周龄肉鸡法氏囊中E-cd和MUC5AC基因相对表达水平升高,6周龄肉鸡胸腺中E-cd和MUC5AC基因相对表达水平也有升高趋势;C组各周龄肉鸡脾脏中MUC5AC基因的相对表达水平降低。说明在肉鸡长时间受到氨气刺激时,MUC5AC和E-cd基因的表达水平存在器官差异,法氏囊具有囊腔,与胸腺和脾脏相比,E-cd基因的总体相对表达水平升高,这与上皮细胞结构的完整性有关。