电离辐射对人肝细胞MXR7基因表达的影响及放射性工作人员外周血MXR7的表达分析

为探讨电离辐射对人正常肝细胞及外周血MXR7基因表达的影响,利用^(60)Coγ射线对培养的人肝细胞HL-7702进行照射,同时,抽取某工厂放射性工作人员外周血,通过实时荧光定量PCR对照射后的各剂量组肝细胞及放射性工作人员外周血MXR7基因的表达情况进行检测分析。结果表明,电离辐射可诱导人正常肝细胞MXR7基因的差异表达,且基因表达与照射剂量存在一定的剂量相关性;放射性工作人员外周血MXR7基因表达与非放射性工作人员相比显著升高。

gpc3/mxr7基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

目的 :通过原核表达并纯化GPC3蛋白 ,免疫家兔获得抗 -GPC3多克隆抗体 ,为深入研究 gpc3/mxr7基因的功能及其临床应用奠定基础。方法 :将 gpc3/mxr7基因片段亚克隆至 pPROEXTMHTb原核表达载体 ,采用融合 6 -his的融合蛋白方法原核表达GPC3蛋白质 ,纯化蛋白后免疫家兔 ,鉴定并纯化出抗 -GPC3多克隆抗体。结果 :原核诱导表达出GPC3蛋白 ,免疫家兔后获得多克隆抗体 ,经鉴定为抗一GPC3特异性多克隆抗体 ,并能识别原核、真核表达的外源性及HepG2和Hu -h7细胞内源性GPC3蛋白。结论 :GPC3蛋白多克隆抗体能特异识别GPC3蛋白 ,可应用于gpc3/mxr7基因的功能研究 ,并为临床原发性肝癌的血清学早期诊断提供新的标记物。

MXR7基因与原发性肝癌关系的研究进展

米托蒽醌抗性相关7（mitoxantrone resistance7,MXR 7）基因又称磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（glypi-can 3,GPC3）,属于glypican家族。MXR7基因在成人除胎盘组织呈高表达外,仅在心、肺、肾、卵巢等少数组织中呈低表达;在Wilm’s瘤、成神经细胞瘤及米托蒽醌耐药胃癌细胞系中呈高表达。有文献[4]报道,MXR7基因在原发性肝癌中呈异常高表达,与原发性肝癌的发生、发展以及临床预后有密切的关系。本文就MXR7基因与原发性肝癌关系的研究进展作一综述。

gpc3/mxr7基因在原发性肝癌及其他肿瘤组织中的表达

目的：探讨gpc3/mxr7基因在原发性肝癌及其他肿瘤组织中的表达。方法：收集2013年2月-2014年12月笔者所在医院诊断为原发性肝癌的患者作为本次研究对象,定义为研究组。对照组为同期来笔者所在医院诊断为其他类型肿瘤的患者。对比研究组和对照组gpc3/mxr7基因表达阳性率。比较研究组中不同病理类型患者的gpc3/mxr7基因表达阳性率。结果：研究组和对照组gpc3/mxr7基因表达阳性率分别为74%、15%,差异有统计学意义（P〈0.05）。AFP大于40μg/μl者、肿瘤〉5 cm者、Ⅲ~Ⅳ病理分级者的gpc3/mxr7基因表达阳性率明显高于AFP〈40μg/μl者、肿瘤〈5 cm者、Ⅰ~Ⅱ的病理分级者。结论：本次研究认为Glypcian3/mxr7基因在肝癌中的表达阳性率明显高于其他肿瘤组织,可将Glypcian3/mxr7基因用于肝癌的早期临床诊断。

MXR7基因的克隆及其在人正常和肿瘤组织中的表达

进行ＭＸＲ７基因ｃＤＮＡ的克隆鉴定并检测其在人正常组织和肿瘤组织中的表达。方法以人肝癌组织的ｃＤＮＡ为模板，应用ＰＣＲ方法合成ＭＸＲ７基因ｃＤＮＡ，连接于融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－５Ｘ－１，构建成符合读框的融合基因；应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ对正常人１２种不同组织和术前做治疗的７例非肝脏肿瘤组织及３０例肝癌和癌旁肝组织、１２例正常肝组织中ＭＸＲ７基因的表达进行检测。结果ＭＸＲ７ｍＲＮＡ在人肝脏等１２种正常组织及７例其它部位肿瘤组织中均不表达；在人肝癌中呈高表达，而癌旁肝组织中呈低表达，其阳性表达率分别为７６．７％和１３．３％。结论ＭＸＲ７．基因在人肝癌组织中的高水平表达具有普遍性和特异性，提示ＭＸＲ７基因可以作为肝癌的生物学标志物。

^(60)Co γ射线诱发人正常肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因表达变化研究

目的探讨电离辐射诱导人正常肝细胞HL-7702甲型肝炎病毒受体2(HAVCR2)和MXR7基因的表达变化,为寻找辐射致肝脏损伤早期诊断标志物提供实验依据。方法将对数生长期的人正常肝细胞HL-7702分为10组,利用中国辐射防护研究院钴-60(60Co)照射装置对各组肝细胞照射,吸收剂量率为1.29 Gy/min,吸收剂量分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 Gy,利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因的变化,分析剂量-反应关系。结果 HAVCR2基因表达在照射后4、24 h总体上调;其中,0.2～0.8 Gy剂量组在照射后24 h基因相对表达量与照射剂量具有很好的剂量-反应关系,满足回归方程:y=0.14x2-0.48x+1.34;1.0～3.0Gy剂量组在照射后24 h,基因相对表达量与照射剂量呈现很好的剂量-反应关系,满足回归方程:y=0.44 x+0.56。MXR7基因表达在照射后4、24 h较对照组显示出明显差异;其中,0.2～0.8 Gy剂量组MXR7基因表达在照射后4 h与对照组相比总体上调,但随照射剂量增大,上调幅度降低;照射后24 h,其基因表达未见明显规律;1.0～5.0 Gy剂量组MXR7基因表达在照射后24 h整体上调,且基因的表达与照射剂量呈现一定的剂量相关性,满足方程为y=0.57x+0.43。结论电离辐射可以诱导人正常肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因的差异表达,且基因表达与照射剂量存在一定的剂量相关性。

MXR7、COX-2和p16基因与肿瘤的关系

MXR7基因定位于人染色体X26.10,该基因编码的蛋白属于硫酸乙酰肝素类蛋白聚糖(HSPGs),其在机体的发育中具有重要作用;COX-2是前列腺素生物合成过程中的一个重要限速酶,将花生四烯酸代谢为各种PG产物,参与机体的病理生理过程;p16基因是参与细胞周期调控的抑癌基因,其产物p16蛋白参与细胞周期的调节。以上3种基因在机体的发育过程中具有重要作用,并与肿瘤的发生、发展有着密切关系。本文综述三者与肿瘤的关系。