C12ORF66对MYCN扩增的高危神经母细胞瘤细胞的活性调控

目的探究12号染色体开放阅读框66(C12ORF66)对MYCN扩增神经母细胞瘤(NB)细胞系活性的调控效应。方法通过R2数据库GSE16476和GSE49710数据集,分析MYCN扩增和MYCN非扩增NB细胞中C12ORF66表达量,以及C12ORF66表达量与患儿预后的相关性。RT-qRCR检测正常组织永生化细胞系、MYCN扩增及MYCN非扩增细胞系中C12ORF66 mRNA表达差异。构建瞬时敲低和稳定敲低C12ORF66的MYCN扩增细胞株,对照组和敲低组细胞进行实时无标记动态细胞分析(RTCA)、集落形成能力检测及Ki67免疫荧光染色。结果R2数据库分析显示MYCN扩增NB患儿样本中C12ORF66表达显著高于MYCN非扩增NB患儿样本,并且C12ORF66表达与患儿预后负相关(P<0.05)。细胞实验表明,与MYCN非扩增细胞系CHLA-255和SH-SY5Y相比,C12ORF66在MYCN扩增细胞系BE(2)-C和SK-N-BE(2)中表达显著升高(P<0.001)。瞬时或稳定敲低C12ORF66,MYCN扩增NB细胞增殖显著减缓(P<0.001),集落形成能力显著降低(P<0.001),Ki67阳性细胞比例显著减少(P<0.05)。结论C12ORF66在MYCN扩增NB患儿样本和细胞系中高表达,且与患儿预后负相关,敲低C12ORF66显著抑制NB细胞活性。

溶质载体家族7成员11对MYCN基因扩增高危神经母细胞瘤细胞增殖的影响

目的分析溶质载体家族7成员11(SLC7A11)在有无MYCN基因扩增的神经母细胞瘤(NB)细胞系和临床样本中的表达及其与患儿预后相关性,研究SLC7A11对MYCN扩增高危NB增殖的影响。方法利用GEO数据库GSE49710数据集、TARGET数据库和R2数据库GSE45547数据集分析NB临床样本中SLC7A11 mRNA水平与MYCN基因扩增状态和NB患儿预后相关性。应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MYCN扩增NB细胞系SK-N-BE(2)和IMR32细胞以及MYCN非扩增NB细胞系CHLA-255和SH-SY5Y细胞中SLC7A11 mRNA水平。在MYCN扩增NB细胞系SK-N-BE(2)细胞中,利用2条不同序列小干扰RNA瞬时敲低SLC7A11 mRNA,应用RT-qPCR和Western印迹法检测SLC7A11 mRNA和SLC7A11表达及MYCN mRNA和N-MYC表达,采用结晶紫染色和实时无标记细胞分析(RTCA)技术观察NB细胞增殖情况。免疫荧光法检测增殖标记物Ki-67表达情况。利用短发夹RNA慢病毒感染方法构建稳定敲低SLC7A11的SK-N-BE(2)细胞,RT-qPCR和Western印迹法检测SLC7A11的稳定敲低效果和MYCN水平,采用克隆形成实验观察NB细胞克隆形成能力。结果分析NB临床样本GSE49710和GSE45547数据集发现,在MYCN扩增NB中,SLC7A11 mRNA水平显著高于非MYCN扩增NB(P<0.05,P<0.01),且TARGET数据库和R2数据库GSE45547数据集分析表明SLC7A11 mRNA水平与NB患儿生存率呈负相关(P<0.05,P<0.01)。SLC7A11在MYCN扩增NB细胞系SK-N-BE(2)和IMR32中的表达均显著高于非扩增细胞系CHLA-255和SH-SY5Y(P<0.01)。与对照敲低组相比,瞬时敲低SLC7A11导致MYCN扩增NB细胞增殖显著减慢(P<0.01),Ki-67阳性细胞比例明显减少(P<0.05);稳定敲低SLC7A11显著减少了NB细胞克隆形成数(P<0.01)。瞬时和稳定敲低SLC7A11对MYCN mRNA和N-MYC蛋白水平均未见明显影响。结论SLC7A11在MYCN扩增NB细胞系和临床样本中高表达,且其表达水平与患儿预后呈负相关,敲低SLC7A11显著抑制SK-N-BE(2)细胞的增殖和克隆形成能力。

神经母细胞瘤中MYCN相关长链非编码核糖核酸的功能研究

目的:筛选神经母细胞瘤(NB)中MYCN相关的长链非编码核糖核酸(lncRNA),分析其功能及对患者预后的影响,寻找潜在治疗靶点和分子标志物。方法:分别从TARGET及GEO数据库下载基因表达数据,并将两组数据分成MYCN高表达组和低表达组,R语言筛选出两组差异表达lncRNA,取共同差异表达lncRNA;通过ENCORI数据库预测与lncRNA互作的核糖核酸(RNA),DAVID数据库分析相关基因的功能与信号通路的富集情况;TARGET数据库进行相关生存分析。结果:TARGET数据库中共筛选出差异倍数在两倍以上的lncRNA 1104个,GEO数据库筛选出差异基因2849个,两个数据库中共同差异表达lncRNA 59个,ENCORI数据库预测与这些基因互作mRNA 547个,功能分析发现这些基因主要富集在调控神经系统疾病的相关通路,并通过调控转录、蛋白绑定等发挥相关生物学功能。利用TARGET数据库进行生存分析发现其中VPS9D1-AS1、LINC00649、LINC01234的异常表达可以影响患者生存。结论:运用生物信息学通过对MYCN相关差异表达lncRNA的分析发现VPS9D1-AS1、LINC00649、LINC01234可能与NB的发生发展密切相关,可为后续的研究提供方向与思路。

MYCN基因与PHOX2B基因联合检测对高危神经母细胞瘤患儿危险度及预后的评估价值

目的探讨MYCN基因与PHOX2B基因联合检测在高危神经母细胞瘤(NB)患儿危险度与预后评估中的应用价值。方法选取106例高危NB患儿,于初诊时检测MYCN、PHOX2B基因的表达情况,分析两项指标与患儿病理特征的关系,并在化疗6个疗程后随访1年,以Kaplan-Meier法分析MYCN基因与PHOX2B基因与患儿预后的关系。结果106例患儿中MYCN基因扩增60例(56.60%),PHOX2B基因阳性45例(42.45%)。MYCN基因扩增患儿初诊时乳酸脱氢酶(LDH)≥1500 U/L占比高于基因正常患儿,PHOX2B基因阳性患儿中肿瘤转移部位≥3个与高神经元特异性烯醇化酶(NSE)≥370μg/L占比高于基因阴性患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier结果显示:MYCN基因扩增患儿与PHOX2B基因阳性患儿的1年生存率分别为48.33%(29/60)、44.44%(20/45),明显低于MYCN基因正常患儿65.22%(30/46)与PHOX2B基因阴性患儿63.93%(39/61),差异有统计学意义(P<0.05)。结论MYCN基因与PHOX2B基因在高危NB患儿危险度分层与预后的评估中具有较高的临床价值,临床可进行大力推广。

苦参碱抑制神经母细胞瘤LA-N-5细胞增殖及MYCN基因mRNA的表达

目的神经母细胞瘤是4岁以下儿童最常见的恶性实体肿瘤,MYCN基因的高表达导致预后更加恶劣。苦参碱作为中药苦参的重要成分对多种肿瘤有治疗作用,该实验拟应用苦参碱作用神经母细胞瘤细胞(LA-N-5),对肿瘤细胞增殖及MYCN基因mRNA表达受抑制情况进行初步研究,希望可以为神经母细胞瘤的治疗开拓新的思路。方法以终浓度为0.25mg/mL,0.50mg/mL,0.75mg/mL,1.00mg/mL苦参碱作用神经母细胞瘤LA-N-5细胞,MTT法检测LA-N-5细胞增殖情况变化,采用SYBR绿色荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR检测MYCN基因mRNA表达受抑制情况。结果苦参碱对LA-N-5细胞增殖的抑制呈明显的剂量、时间依赖性,随剂量的增加,作用时间的延长,抑制效果逐渐加强。1.00mg/mL作用72h后肿瘤细胞增殖抑制效率达36.3%,单细胞MYCN基因mRNA表达9.7±0.35拷贝,抑制效率达44.6%。结论应用苦参碱在体外环境作用LA-N-5细胞,可以有效抑制该细胞的增殖、原癌基因MYCN mRNA的表达,为临床上神经母细胞瘤的治疗开拓了新的思路。

荧光定量RT-PCR检测神经母细胞瘤细胞MYCN基因mRNA的表达

目的MYCN基因表达对神经母细胞瘤的治疗及预后评估有指导意义,目前国内对于MYCN基因mRNA的定量检测未见报道,该研究拟采用SYBR绿色荧光染料Ⅰ(SYBRGREENⅠ)实时检测的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测神经母细胞瘤细胞系LA-N-5细胞MYCN基因mRNA的表达,并对其可行性及实用性进行研究,力争探索出微量瘤标本的MYCN基因mRNA定量检测的可行方法。方法提取神经母细胞瘤细胞系LA-N-5细胞总RNA,采用SYBRGREENI实时检测的RT-PCR检测其MYCN基因mRNA的表达,并用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照,将MYCN基因的mRNA拷贝数与GAPDH的拷贝数相除,结果为单细胞MYCN基因mRNA的表达水平。结果反应标准曲线有良好的相关性(R2>0.99),PCR产物特异,神经母细胞瘤细胞系LA-N-5MYCN基因mRNA的表达水平为17.4±1.2。结论只要严格控制PCR反应条件,SYBRGREENⅠ定量RT-PCR法可以作为一种良好的定量PCR方法对神经母细胞瘤细胞系LA-N-5MYCN基因mRNA的表达进行检测,此方法为临床微量神经母细胞瘤瘤组织的MYCN基因mRNA的定量检测提供了可能。

RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞MYCN基因的初步研究

目的对RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞(LAN-5)MYCN基因表达进行初步研究。方法体外化学合成针对MYCN基因的小干扰RNA(si RNA),经脂质体Lipofectamine2000包裹后转染神经母细胞瘤细胞,以无关si RNA和未转染的细胞为对照,采用SYBR绿色荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR检测si RNA的抑制效果。结果脂质体转染si RNA效率可达84.83%,化学合成的si RNA可抑制神经母细胞瘤细胞MYCN基因mRNA表达,转染72h后抑制率达58.3%。结论化学合成的si RNA可以有效抑制神经母细胞瘤MYCN基因的表达,为神经母细胞瘤基因治疗开辟了新的途径。

熊果酸对神经母细胞瘤细胞增殖凋亡及MYCN表达的影响

目的实验研究熊果酸作用于体外培养的神经母细胞瘤细胞株（SH—SY-5Y），对肿瘤细胞增殖、凋亡及MYCN基因mRNA表达的影响，探讨熊果酸对儿童神经母细胞瘤的治疗的作用。方法以终浓度为4uM／L、8uM／L、12uM／L的熊果酸作用于神经母细胞瘤细胞SH—SY-5Y，WST-1法检测SH—SY-5Y细胞增殖情况，流式细胞术检测SH—SY-5Y细胞凋亡情况，采用RealtimePCR方法检测MYCNmRNA的表达情况。结果熊果酸对SH—SY-5Y细胞增殖的抑制呈明显的剂量、时间依赖性，随剂量的增加，作用时间的延长，抑制效果逐渐加强；熊果酸对SHSY-5Y细胞凋亡的促进呈明显的剂量依赖性，随剂量的增加，促进凋亡效果逐渐加强；熊果酸对SH—SY-5Y细胞MYCN表达有抑制作用并有明显的剂量依赖性，随剂量的增加，抑制效果逐渐加强。12uM／L作用72h后神经母细胞瘤细胞增殖抑制效率达98．3％，MYCN基因mRNA表达抑制率达52．37％。结论应用熊果酸在体外环境作用SH—SY-5Y细胞，可以有效抑制该细胞的增殖、促进细胞凋亡、抑制原癌基因MYCNmRNA的表达。

MYCN基因表达抑制促TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究

目的神经母细胞瘤(NB)为小儿常见恶性肿瘤。MYCN基因高扩增NB细胞对TRAIL诱导凋亡多有抵抗。我们以MYCN基因高扩增NB细胞株为研究对象,抑制其MYCN基因的表达,探讨其对TRAIL诱导凋亡有无增强作用。方法构建MYCN siRNA,转染NB细胞株SK-N-BE(2),抑制MYCN基因表达后,Western-blot法检测SK-N-BE(2)细胞Bcl-2、Bcl-xL、Bid、DR4、DR5表达的变化,ELISA法检测细胞凋亡。结果转染MYCN siRNA的SK-N-BE(2)细胞中MY-CN基因表达显著降低(P<0.05)。MYCN基因表达抑制后,SK-N-BE(2)细胞DR5、Bid表达增高(P<0.05),Bcl-2、Bcl-xL表达降低(P<0.05),DR4表达无变化(P>0.05),TRAIL诱导细胞凋亡显著增强(P<0.05)。结论 MYCN基因表达抑制后,可调控Bcl家族中相关蛋白、DR5的表达,促进TRAIL诱导NB细胞凋亡。

砷剂对神经母细胞瘤MYCN mRNA表达的影响

选取生长良好的神经母细胞瘤LA-N-5细胞,分别按三氧化二砷(As2O3)终浓度为0.75、1.5、3.0、6.0μmol/L加药,作用24、48及72 h。RT-PCR法检测MYCN mRNA的表达。发现不同浓度的As2O3均可使MYCNmRNA的表达减少,以3.0μmol/L组减少最明显;砷剂的抑制作用出现在用药48 h后,延长时间仍能保持抑制作用。认为砷剂能够抑制神经母细胞瘤细胞MYCN mRNA的表达。

MYCN与神经母细胞瘤相关性研究进展

神经母细胞瘤是起源于神经嵴细胞的恶性肿瘤，发病率居儿童恶性肿瘤第四位，仅次于白血病、脑瘤、淋巴瘤。MYCN 是MYC家族成员，参与多种生理和病理过程，包括细胞生长和凋亡、新生血管形成和肿瘤浸润与转移等，MYCN 在肿瘤的发生发展过程中所起的作用正日益受到重视。本文对MYCN与神经母细胞瘤的关系作一综述。

以叶酸受体为靶向的脂质体介导MYCN基因小干扰RNA体外抑制神经母细胞瘤LA-N-5细胞的增殖

目的以氨基脂为主要成分、叶酸受体为靶向的脂质体包裹MYCN基因小干扰性RNA,研究其体外对神经母细胞瘤LA-N-5细胞MYCN基因表达的抑制及细胞增殖的影响。方法制备氨基脂为主要成分、叶酸受体为靶向的脂质体包裹CY3标记的MYCNsiRNA转染LA-N-5细胞,以每微克蛋白中荧光强度半定量siRNA的转染效果;用定量RT-PCR检测转染前后MYCN基因mRNA变化;MTT法检测细胞增殖受抑情况。结果以100nmol/L终浓度转染LA-N-5细胞后每微克蛋白含siRNA(1808.5±140.2)pg,作用72hMYCN基因mRNA表达显著下降,抑制率79.2%,瘤细胞增殖受抑达66.2%。结论叶酸受体为靶向脂质体介导MYCNsiRNA在体外对LA-N-5细胞MYCNmRNA表达有显著抑制作用,明显抑制LA-N-5细胞增殖,为神经母细胞瘤靶向治疗、基因治疗开辟了新的思路。

超声联合血清MYCN、Smad7 mRNA检测对神经母细胞瘤的诊断价值

目的:探讨彩色多普勒超声联合血清MYCN、Smad7 mRNA检测在诊断儿童神经母细胞瘤中的临床价值。方法:选取确诊的48例神经母细胞瘤患儿为神经母细胞瘤组,同期选取因腹胀、腹泻、便秘、呕吐等原因就诊最终排除神经母细胞瘤的患儿50例作为对照组,对其均行彩色多普勒超声检查。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清MYCN mRNA、Smad7 mRNA表达水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清MYCN mRNA、Smad7 mRNA对神经母细胞瘤的诊断效能,采用一致性Kappa检验分析各诊断方法与手术或穿刺病理结果的一致性。结果:神经母细胞瘤组血清MYCN mRNA、Smad7 mRNA表达水平显著高于对照组(均P<0.05)。血清MYCN mRNA、Smad7 mRNA诊断神经母细胞瘤的曲线下面积(AUC)分别为0.867(95%CI:0.795~0.938)、0.818(95%CI:0.734~0.901),特异度分别为88.00%、84.00%,灵敏度均为75.00%。超声检查结果中假阳性8例,假阴性11例,与手术或穿刺病理结果的一致性较高,Kappa值为0.612(P<0.05);超声联合血清MYCN mRNA、Smad7 mRNA检查结果中假阳性9例,假阴性4例,与手术或穿刺病理结果的一致性较高,Kappa值为0.735(P<0.05)。超声联合血清MYCN mRNA、Smad7 mRNA诊断神经母细胞瘤的灵敏度显著高于三者单独诊断(P<0.05)。结论:超声检查对儿童神经母细胞瘤有较高的诊断价值,其联合血清MYCN mRNA、Smad7 mRNA后诊断价值有一定的提高。

伴有MYCN基因扩增的神经母细胞瘤133例病例系列报告

背景伴有MYCN基因扩增的神经母细胞瘤(NB)患儿的长期生存率不容乐观,目前国内相关大宗病例报道不多。目的总结伴有MYCN基因扩增的NB患儿的临床特征、治疗效果及预后相关因素。设计病例系列报告。方法纳入2007年2月1日至2020年1月30日首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心确诊NB且经荧光原位杂交法确定伴有MYCN扩增的患儿,分析患儿瘤灶部位、大小、转移部位、肿瘤标记物、病理亚型、治疗情况及影响预后的相关因素。主要结局指标3年生存影响因素。结果纳入133例MYCN扩增的NB患儿,占同期收治总NB患儿的12.0%。男82例,女51例,中位发病年龄(35.7±9.8)个月;原发瘤灶位于腹膜后及肾上腺区129例(97.0%),位于后纵隔区域4例(3.0%);骨髓转移81例(60.9%),骨骼转移80例(60.2%),中枢转移24例(18.1%);99例(74.4%)血清LDH≥1500 U·L^(-1),126例(94.7%)神经元特异性烯醇化酶≥100 ng·mL^(-1);原发瘤灶最大直径≥10 cm者89例(66.9%)。3年OS和EFS分别为(19.7±3.5)%和(19.0±3.6)%。78例进展复发,在诱导、巩固、维持及停药后进展复发分别为8、20、46和4例,进展复发的部位以原发瘤灶、骨髓、中枢神经系统及骨骼最常见,中位首次进展时间为11.3月。伴有骨髓、骨转移、合并1p36缺失、年龄<18月及未行自体外周血造血干细胞移植患儿预后不良。结论伴有MYCN扩增的NB患儿原发瘤灶以腹膜后肾上腺区为主,早期远处转移率高,50%以上患儿在维持治疗期间肿瘤进展,3年OS仅为19.7%。伴有MYCN扩增的NB患儿迫切需要靶向治疗等新的治疗手段,以提高疗效,改善预后。

MYCN基因表达变化增强神经母细胞瘤细胞SK-N-BE(2)凋亡

目的:以MYCN基因高表达神经母细胞瘤细胞株SK-N-BE(2)为研究对象,改变神经母细胞瘤细胞中MYCN基因的表达水平,观察对肿瘤细胞凋亡的影响。方法:分别构建MYCN高表达载体和MYCN-siRNA,并转染神经母细胞瘤细胞株SK-N-BE(2),Western blot检测MYCN蛋白表达变化,使用ELISA法检验肿瘤细胞凋亡情况。结果:Western-blot结果显示转染MYCN高表达载体后SK-N-BE(2)细胞中MYCN蛋白表达显著增加(P<0.05),转染MYCN-siRNA后MYCN蛋白表达显著下降(P<0.05)。肿瘤细胞在MYCN表达改变后,凋亡率均显著增加。结论:神经母细胞瘤细胞株SK-N-BE(2)中MYCN基因表达抑制或增加均可诱导肿瘤细胞凋亡。

病理免疫组化法检测MYCN蛋白在儿童神经母细胞瘤早期分层诊疗中的意义

目的探索病理免疫组化方法检测MYCN蛋白的表达与荧光原位杂交法方法检测MYCN基因的一致性,初步建立价格低廉、操作简单且易于推广的MYCN检测手段,用于神经母细胞瘤患儿早期的分层诊疗。方法应用FISH及IHC共同检测NB患儿的肿瘤组织及转移骨髓的MYCN表达。结果共54例NB患儿纳入本研究,全部患儿的瘤组织均经FISH方法检测,其中MYCN基因扩增31例,非扩增23例;入组患儿中有25例患儿病初伴有骨髓转移,对转移骨髓应用FISH及IHC方法检测,17例患儿MYCN蛋白表达阳性,8例为阴性,与患儿瘤组织FISH方法检测结果完全一致;用IHC方法检测肿瘤组织及转移骨髓的MYCN蛋白,阳性一致率均为86%~94%,阴性一致率为100%。结论IHC方法对NB患儿的肿瘤组织及受累转移的骨髓进行MYCN蛋白的检测,其结果与FISH方法的检测结果具有较高的一致性,价格低廉、操作简单,适用于NB患儿早期的危险度评估及推广。

9-顺式维甲酸联合细胞毒药物对MYCN扩增型神经母细胞瘤细胞毒性及MYCN、MDR1表达的影响

目的:观察9-顺式维甲酸(9-cis retinoic acid,RA)联合细胞毒药物对MYCN扩增型神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞的毒性及MYCN、MDR1表达的影响,为临床合理用药提供依据。方法:RA分别与长春新碱(VCR)、顺铂(CDDP)、足叶乙甙(VP16)、阿霉素(ADR)双药联合或单独作用IMR32细胞株24h后:(1)CCK-8法测定细胞生长抑制率;(2)流式细胞仪检测细胞凋亡率;(3)实时荧光定量PCR法检测MYCN、MDR1的mRNA表达。结果:(1)细胞生长抑制率:各双药组高于相应单药组(P<0.01)。(2)细胞凋亡率:双药组高于相应单药组(P<0.01),RA+CDDP高于其他双药组(P<0.05)。(3)MYCN表达:各双药组均低于相应单药组(P<0.05),RA+VCR低于其他双药组(P<0.05);MDR1表达:双药组高于相应单药组(P<0.05),RA+ADR高于其他双药组(P<0.01)。结论:RA联合细胞毒药物对NB生长抑制、凋亡及下调MYCN表达有协同作用,可上调MDR1表达,综合分析RA与VCR或CDDP的组合可能为临床联合用药提供较合理的选择。

9-顺式维甲酸协同-干扰素下调神经母细胞瘤细胞MYCN和MDR1基因mRNA表达的实验研究

目的测定9-顺式维甲酸(9-cis retinoic acid,9-cis RA)联合γ-干扰素(gamma-interferon,γ-IFN)在体外诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)SK-N-SH细胞分化过程中MYCN和MDR1基因mRNA表达方面的变化,探讨其联合作用的分子生物学机制。方法将NB细胞分为A组(对照组)、B组(9-cis RA用药组)、C组(γ-IFN用药组)和D组(9-cis RA和γ-IFN联合用药组)4组,在处理后5d收集各组细胞,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法(fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,FQ-RT-PCR)检测细胞MYCN和MDR1基因mRNA的表达变化并对其进行相关性分析。结果 9-cis RA和γ-IFN体外皆可下调NB细胞MYCN和MDR1基因mRNA的表达,二者联合应用具有协同效应;两基因的表达呈显著的正相关关系。结论 9-cis RA协同?-IFN在体外诱导NB细胞分化、凋亡及生长抑制的作用机制可能为共同下调MYCN和MDR1基因mRNA的表达,一方面抑制了NB细胞原癌基因的生物学表现,另一方面预防了多药耐药(multidrug resistance,MDR),为其联合应用提供分子生物学依据和理论指导。

MYCN扩增型神经母细胞瘤潜在预后生物标志物的综合性分析

目的分析比较MYCN扩增型神经母细胞瘤(NB)和MYCN非扩增型NB表达mRNA的差别,筛选具有预测MYCN扩增型NB预后功能的基因并分析其对预后的预测价值.方法从TARGET数据库获得NB转录组数据和患儿临床资料,根据有无MYCN扩增分为MYCN扩增组(n=33)和MYCN非扩增组(n=121),对两组mRNA进行差异分析,得到差异表达基因(DEGs).采用GO和KEGG数据库分析DEGs的主要功能.采用Cox比例风险回归模型分析影响MYCN扩增组NB预后的基因,根据风险评分的中位值分为高风险组(n=77)和低风险组(n=77),采用生存分析法比较两组生存率,ROC曲线分析风险评分对MYCN扩增型NB患儿预后的预测价值.结果共筛选出582个DEGs,这些DEGs参与了核糖体组成、细胞黏附蛋白的表达以及膜蛋白受体活动等重要生物功能.多因素Cox回归模型分析结果显示FLVCR2、SCN7A、PRSS12、NTRK1、XAGE1A基因对MYCN扩增组NB患儿预后具有显著性影响(均P<0.05).生存分析发现,高风险组的总生存率低于低风险组(P<0.05).ROC分析显示,风险评分对MYCN扩增组NB患儿预后有预测价值(P<0.05),曲线下面积为0.729,最佳截断值为1.316,灵敏度为53.2%,特异度为84.4%.结论FLVCR2、SCN7A、PRSS12、NTRK1、XAGE1A基因的mRNA可作为预测MYCN扩增型NB预后的生物标志物,有助于细化临床危险分层.