胃癌腹膜转移相关基因MYH-9与胃癌转移及其预后的关系

目的研究胃癌腹膜转移相关基因MYH-9与胃癌转移及预后的关系。方法 50例组织标本取自手术切除的胃癌组织及同一患者的腹膜转移组织标本。组织固定在10%的缓冲甲醛溶液用于病理诊断,冷冻于液氮中备于免疫印迹分析、细胞培养、siRNA转染、细胞粘附实验。结果 MYH-9在所有的鳞状细胞癌组织(100%)和8个邻近正常组织中表达(26.7%,P=0.000)。癌组织中MYH-9高表达水平与腹膜转移、肿瘤分化程度差和较晚的肿瘤分期显著相关。单变量分析结果显示:肿瘤分期、胃癌病灶是否切除、腹膜转移的存在、MYH9高表达(基于免疫组化染色)与患者总生存率显著相关(P=0.008、P=0.001、P=0.006和P=0.007)。进一步的多因素回归分析显示,肿瘤分期与MYH-9高表达是与总生存期相关的独立不良预后因素。结论 MYH-9的过度表达可能与较高的癌细胞迁移性相关。

胃癌组织MYH-9蛋白表达及MYH-9 siRNA下调SGC-7901细胞MYH-9表达对细胞侵袭转移的影响

目的非肌性肌球蛋白重链9基因（non-muscular myosin heavy chain9，MYH-9）在多种恶性肿瘤中高表达，且预后差。检测胃癌组织MYH-9的表达及利用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术特异性，抑制胃癌SGC-7901细胞中MYH-9的表达对细胞侵袭和转移的影响，探讨在胃癌治疗中将MYH-9作为基因治疗靶点的价值。方法选取2009-06-01-2010-01-01南昌大学第一附属医院126例胃癌及癌旁组织。利用RNA技术将MYH-9 siRNA转染到胃癌SGC-7901细胞中，蛋白质印迹法检测MYH-9蛋白的表达，RT-PCR法检测MYH-9 mRNA的表达；运用细胞迁移和侵袭实验检测MYH-9 siRNA下调胃癌SGC-7901细胞中MYH-9的表达对细胞侵袭转移的影响。结果MYH-9在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织，χ2=77．83，P〈0．001。胃癌MYH-9蛋白表达与肿瘤Lauren分型（χ2=5．296，P=0．020）、肿瘤分化程度（χ2=14．39，P=0．002）、肿瘤浸润深度（χ2=5．296，P=0．026）、肿瘤淋巴结转移数（χ2=11．15,P=0．003）、脉管癌栓（χ2=5．255，P=0．022）、肿瘤远处转移状态（χ2=6．683，P=0．009）和TNM分期（χ2=10．73，P=0．002）密切相关。MYH-9蛋白表达（HR=2．825，95％CI=1．104～3．706，P=0．041）、胃癌远处转移状态（HR=1．749，95％CI=0．983～3．503，P=0．035）和胃癌淋巴结转移数（HR=3．235，95％CI=1．579～5．358，P〈0．001）可作为预测患者不良预后的独立指标。与空白对照组及阴性对照组比较，特异性siRNA可以高效抑制SGC-7901细胞MYH-9基因的表达，在mRNA水平其表达抑制率分别为87．5％（t=48．22，P〈0．001）和86．9％（t=57．30，P〈0．001）；在蛋白质水平其表达抑制率分别为52．9％（t=11．01，P〈O．001）和60．1％（t=15．53，P〈O．001）。在侵袭实验中，实验组细胞数为（49．5±13．8）个，显著低于阴性对照组（112±4．34）个（t=15．53，P〈0．001）和空白对照组（116±5．57）个（t=28．12，P〈O．001）。在迁移实验中，实验组细胞数为（81．5±7．26）个，显著低于阴性对照组（185±7．33）个（t=47．29，P〈0．001）和空白对照组（189±3．46）个，t=46．40，P〈O．001。结论MYH-9高表达患者预后较差，MYH-9可能成为胃癌基因治疗的新靶点。