长链非编码RNA MYU对宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其机制

目的探讨长链非编码RNA MYU对宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其机制。方法检测长链非编码RNA MYU在宫颈癌组织和癌旁组织中的表达差异,将Hela细胞株分为:1组:转染对照NC序列;2组:转染MYU siRNA;3组:转染对照pc DNA3.1;4组:转染pc DNA3.1-MYU过表达序列。采用CCK-8法检测各组细胞细胞增殖活力,Western blotting和RT-PCR检测c-myc、CDK4、CDK6基因mRNA及蛋白的表达,采用RNA结合蛋白免疫沉淀试验验证WDR5与MYU的结合,染色质免疫沉淀试验检测组蛋白H3赖氨酸4三甲基化(H3K4me3)水平。结果癌组织LncRNA MYU的表达量高于癌旁组织(P<0.05);转染24、48 h,OD值比较,2组低于1组,4组高于3组,P均<0.05;Ki-67阳性细胞所占百分比比较,1组高于2组,3组低于4组,P均<0.05;c-myc、CDK4、CDK6mRNA及蛋白比较,1组高于2组,3组低于4组,P均<0.05;LncRNA MYU与WDR5的富集量高于阴性对照(P<0.05);H3K4me3水平比较,1组低于2组,3组高于4组,P均<0.05。结论长链非编码RNA MYU通过募集WDR5抑制c-myc基因启动子区H3K4me3,上调c-myc转录从而促进Hela细胞增殖。

LncRNA MYU对胶质瘤细胞周期分布、增殖、转移和凋亡以及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)MYU对胶质瘤细胞周期分布、细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人脑正常胶质细胞HEB和胶质瘤细胞(U-251MG、A172、SHG139)中LncRNA MYU的表达情况。选取SHG139细胞,分为正常对照(NC)组、si-con组、si-LncRNA MYU组进行转染实验,行RT-qPCR检测转染效果。分别采用流式细胞术、细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验检测沉默LncRNA MYU对SHG139细胞周期分布和凋亡、细胞增殖、细胞迁移和侵袭的影响。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、Cleaved caspase-9以及磷脂酰肌醇-3-羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白表达情况。结果:LncRNA MYU在胶质瘤细胞株中比人脑正常胶质细胞中的表达水平显著升高(P<0.05),因此选择表达量最高的SHG139细胞进行转染实验。沉默LncRNA MYU能够显著诱导SHG139细胞G0-G1期阻滞、抑制细胞增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡(P<0.05)。沉默LncRNA MYU可显著抑制MMP-2、MMP-9、p-PI3K和p-AKT表达并促进Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达(P<0.05)。结论:沉默LncRNA MYU可诱导胶质瘤细胞G0-G1期阻滞,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

长链非编码RNAMYU表达异常对非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力的影响

长链非编码RNA (lncRNAs)促进肿瘤发生、进展的机制。其中,LncRNA MYU表达异常已经在几种常见癌症中被报道。近年来的相关研究结果表明,非小细胞肺癌中同样存在lncRNA MYU表达异常,但医学界尚未阐明其作用机制,本研究计划通过细胞体外试验研究其对非小细胞肺癌细胞株生物学行为的影响。方法 构建lncRNA MYU的表达载体和shRNA表达载体,得到非小细胞肺癌细胞株A549的转染株,之后对样本进行检测,以明确lncRNA MY的表达改变情况,最后分析其在癌变细胞分裂、扩散中所起的作用。结果 本文通过瞬时转染A549细胞以及开展相关实验研究,发现MYU敲低会损害A549细胞的生长和迁移(P<0.01)。而MYU过表达则表现出相反的效果。结论LncRNA MYU在非小细胞肺癌中可加快病变细胞的分裂、扩散,参与了癌症的形成和发展,并可能作为潜在的诊断生物标志物以及研制新药的依据。