MaAQP1过表达拟南芥及对转基因植株抗旱性的分析

MaAQP1属于水通道蛋白家族的基因,其能响应干旱胁迫。构建植物表达载体pCAMBIA1304-MaAQP1获得转基因拟南芥植株,GUS染色分析表明,其主要分布于转基因植株的根部。通过Southern blot检测,选取双拷贝和单拷贝的两个转基因植株进行后续试验。与野生型植株相比,经过干旱胁迫处理后,转基因植株具有较高的存活率,脯氨酸、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量增加,同时其丙二醛含量降低,提高了对干旱胁迫的抵御能力。

香蕉MaAQP1启动子诱饵载体及干旱胁迫酵母单杂交cDNA文库的构建

【目的】香蕉MaAQP1能够提高植物的耐旱性,研究香蕉MaAQP1的相关特性可为了解其干旱胁迫响应机制奠定基础。【方法】通过克隆MaAQP1的启动子,将启动子构建到pHIS2诱饵质粒上,转化酵母菌构建诱饵表达载体,同时构建干旱胁迫的香蕉(Musa acuminat L. AAA group cv. Brazilian)cDNA文库。【结果】克隆获得1 362 bp的启动子序列,通过分析其顺式作用元件,结果显示启动子序列中共有72个顺式作用元件,包括了TATA-box和CAAT-box核心元件,ABA响应元件、MYB元件、MYC元件、ERE元件、MeJA响应元件、光响应元件以及分生组织响应元件等;成功构建了MaAQP1诱饵载体和干旱胁迫条件下的cDNA文库,文库库容为1.25×107 CFU,插入片段平均在1 200 bp左右。【结论】本研究克隆获得了香蕉MaAQP1启动子并构建了干旱胁迫酵母单杂交cDNA文库,为下一步运用酵母单杂交筛选MaAQP1互作的转录因子、解析MaAQP1响应干旱胁迫的作用机制奠定了基础。