MaFGF对顺铂所致海马神经元损害保护作用的体外实验研究

目的探讨改构体酸性成纤维细胞生长因子(MaF-GF)对体外培养的海马神经元顺铂(DDP)损伤的保护作用。方法取新生SD乳鼠海马神经元进行原代培养,采用高分子量神经丝蛋白多克隆抗体(NF-H)进行免疫细胞化学染色鉴定。原代细胞接种于96孔培养板:①培养7 d后加入一系列浓度的DDP,继续培养24 h,采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率;②以DDP建立损伤模型,并在加DDP同时加入一系列浓度的MaFGF,观察MaFGF对海马神经元的保护作用。结果①DDP对体外培养神经元活力具有明显的抑制作用,随着DDP浓度的增加,细胞活力降低;②浓度为5.2～10.4μg.L-1的MaFGF能使DDP损伤的神经元活力明显提高;③MaFGF+DDP组和DDP组比较,各生化和酶学指标差异均有统计学意义(P<0.01),MaFGF+DDP组中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活性升高,丙二醇(MDA)、一氧化氮(NO)水平降低。结论MaFGF对DDP损伤的海马神经细胞具有一定的保护作用。

MaFGF对急性染顺铂小鼠肾损害的保护作用研究

目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)对急性染顺铂(DDP)小鼠肾损害的保护作用及其机制。方法腹腔注射(ip)DDP 10 mg/kg,建立小鼠肾损伤模型,然后每日ipMa FGF 10或20μg/kg,连续7 d。采用全自动分析仪测定肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量,试剂盒测定丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量和超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,观察肾脏病理学变化。结果 Ma FGF可明显降低血清Scr、BUN及肾皮质MDA、NO含量(P<0.05),引起SOD、GSH-Px活性明显升高(P<0.05),使受损的肾结构明显改善。结论 Ma FGF对顺铂致肾功能损伤有保护作用,其机制可能与抗顺铂的脂质过氧化反应有关。

酸性成纤维细胞生长因子的基础与应用研究

原型aFGF是由154个氨基酸残基组成的相对分子质量是16.5×103的小蛋白质分子,等电点5～7,呈酸性,改构体aFGF(MaFGF)则是改变aFGF的结构,即切除1～25位的残基,保留26和27位但替换为蛋氨酸。原型aFGF具有两大类型的活性:其一,促有丝分裂活性,可促进组织细胞分裂、增殖;其二,非促有丝分裂活性,包括舒张血管、神经保护、心肌保护和局部缺血保护等。本文就aFGF的结构及其受体、生物学活性及应用基础研究、可能存在的负面效应以及MaFGF的特性等进行宗述。

改构型酸性成纤维细胞生长因子对顺铂肾损害保护作用的研究

目的:研究改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)对顺铂(DDP)引起的体外培养的肾小管上皮细胞损害的保护作用。方法:将原代培养的肾小管上皮细胞接种于96孔培养板:(1)培养72h后加入一系列浓度的DDP,实验组在DDP作用12h后加入不同浓度MaFGF,再培养36h后用WST-8法检测细胞存活率。(2)以DDP建立损伤模型,并在加药后12h加入一定量的MaFGF,观察MaFGF对肾小管上皮细胞的保护作用。结果:(1)MaFGF能使DDP对肾小管上皮细胞的半数抑制浓度(IC50)升高。(2)DDP组与对照组比较,各生化和酶学指标差异均有统计学意义;而MaFGF+DDP组与对照组比较,SOD、GSH-Px酶活性差异无统计学意义,MDA、NO升高差异仍有统计学意义。结论:MaFGF对DDP损伤的肾小管上皮细胞有明显的保护作用。

改构型酸性成纤维细胞生长因子对紫杉醇诱导体外大鼠肝细胞损伤保护作用的体外实验研究

目的：探究改构型酸性成纤维细胞生长因子（MaFGF）对紫杉醇（Taxol）诱导体外培养的大鼠肝细胞损伤的保护作用.方法：选用新生SD大鼠培养原代肝细胞,将原代肝细胞种于96孔培养板：培养7d后加入各种不同浓度的紫杉醇,作用24h,采用四唑盐（MTT）比色法检测细胞抑制率;建立紫杉醇损伤肝细胞的模型,与此同时加入系列质量浓度的MaFGF,观察MaFGF对肝细胞的保护作用.结果：紫杉醇对体外培养的肝细胞具有一定的抑制作用,并呈质量浓度依赖型;在质量浓度为3.25×10^-3~8.20×10^-3mg/L范围内,MaFGF降低了紫杉醇对肝细胞的抑制率,增高了肝细胞的活性;Taxol组与对照组比较,各生化和酶学指标差异均有显著性（P〈0.05）;Taxol＋MaFGF（3.25×10-3~8.20×10-3mg/L）组和Taxol组比较,各生化和酶学指标差异均有统计学意义（P〈0.01）,Taxol＋MaFGF组中超氧化物歧化酶（SOD）活性升高,一氧化氮（NO）、谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）水平降低.结论：MaFGF对紫杉醇损伤的肝细胞具有一定的保护作用.

白花丹素致体外培养肝细胞的损伤及改构型酸性成纤维细胞生长因子对肝细胞的保护作用

目的研究白花丹素(plumbagin)对肝细胞的抑制作用及改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)是否对白花丹素引起的肝细胞损伤有保护作用。方法将原代培养的肝细胞接种于96孔培养板:①72 h后加入一系列浓度的白花丹素,实验组在白花丹素作用24 h后加入不同浓度MaF-GF,再培养24 h后用MTT法检测细胞存活率。②以白花丹素建立损伤模型,并在加药后24 h加入一定量的MaFGF,观察MaFGF对白花丹素诱导的肝细胞损伤保护作用。③采用倒置相差显微镜对细胞进行连续的观察并照相,记录对照组、致伤组、细胞生长因子组细胞形态的变化。结果①成功建立白花丹素致肝细胞损伤的模型:白花丹素能明显抑制肝细胞的增殖,抑制效应与白花丹素的浓度相关。②白花丹素+不同浓度的MaFGF对肝细胞的抑制率随MaFGF浓度的增大而减小;IC50随着MaFGF浓度的增大而明显增高,并呈现比较明显的剂量-效应特点。③白花丹素组与对照组比较,各生化和酶学指标差异均有显著性(P<0.01或P<0.05);白花丹素+MaFGF组与白花丹素组比较,SOD活性升高、NO、MDA、LDH、GPT、GOT下降,差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。而白花丹素+MaFGF组与对照组比较,各生化和酶学指标活性或含量均未回落至正常水平,差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论白花丹素对肝细胞有毒性作用;MaFGF对白花丹素损伤的原代培养肝细胞有一定的保护作用。

改构型酸性成纤维细胞生长因子对细胞增殖活性的影响

目的:研究aFGF和MaFGF对正常的肾小管上皮细胞及胃癌细胞增殖的影响。方法:用不同浓度的aFGF和MaFGF分别作用于肾小管上皮细胞及胃癌细胞,48h后采用WST-8法测定aFGF和MaFGF对两种细胞的促增殖活性。结果:在各浓度下,MaFGF组对肾小管上皮细胞和胃癌细胞的促增殖作用都显著低于aFGF组。结论:MaFGF对肾小管上皮细胞及胃癌细胞的促分裂活性较aFGF明显下降。

改构型酸性成纤维细胞生长因子对大鼠动脉血栓形成的影响

目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(modified acidic fibroblast growth factor,MaFGF)对大鼠颈总动脉血栓形成的影响。方法Wistar大鼠50只,随机分成生理盐水组、肝素组、MaFGF组(又分MaFGF1组、MaFGF组、MaFGF组),每组10只。于大鼠的股静脉分别注射生理盐水(0.5ml/100g)、肝素钠(0.1U/10023g),MaFGF1组(10U/100g)、MaFGF2组(100U/100g)、MaFGF3组(1000U/100g),给药后5min,用保护电极刺激颈总动脉,直至血压曲线逐渐消失,记录刺激开始至压力曲线消失的时间,即血栓堵塞时间。结果肝素组、MaFGF2组、MaFGF3组与生理盐水组比较,平均堵塞时间延长(P<0.05或P<0.01);肝素组与各MaFGF组之间比较,肝素的平均堵塞时间明显较长(P<0.001)。结论MaFGF可以延长大鼠动脉血栓形成的时间,并呈现一定的量效关系。

小鼠脂肪来源基质细胞向成骨细胞的分化

目的研究小鼠脂肪来源基质细胞的分离培养、鉴定及向成骨方向分化的潜能。方法取小鼠睾丸脂肪垫用胶原酶消化后获得血管基质层(SVFs),进行体外培养。取第4代细胞用流式细胞技术检测细胞表面分子CD29、CD44、Sca-1,用碱性磷酸酶染色及矿化结节染色法鉴定分化的成骨细胞。结果小鼠脂肪来源基质细胞高表达CD29、CD44,双阳性达84.9%,但Sca-1成阴性表达。经诱导的成骨细胞碱性磷酸酶染色胞质成黑色,矿化结节-茜素红与Von Kossa染色成红褐色与黑色。结论小鼠脂肪来源基质细胞为一种理想的成体干细胞,可用于基础实验研究,且能成功分化为成骨细胞。

改构型酸性成纤维细胞生长因子对体外培养肝细胞增殖活性的影响

目的探讨改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)对体外培养大鼠肝细胞增殖的影响。方法采用"0.25%胰酶+0.1%胶原酶"消化法分离培养大鼠肝细胞并传代纯化扩增,取第3代细胞鉴定后实验:(1)形态学法观察在不同浓度MaFGF组中细胞的形态变化;(2)将实验随机分为对照组和MaFGF组,MaFGF组加入一系列浓度的MaFGF,MTT法测定不同浓度MaFGF组作用于肝细胞24、48、72h的促增殖活性;(3)MTT法筛选出最适的MaFGF浓度,用此浓度和不加生长因子2种方式培养细胞,并绘制细胞生长曲线。结果(1)MaFGF对体外培养的肝细胞有一定的促增殖作用,但是与浓度不成正比;且实验表明24h的增殖率较其它时间点显著增高(P<0.05);比较对照组和各组(4.68×10^(-3)~7.80×10^(-3)mg/LMaFGF组)均差异有统计学意义(P<0.05),但各组间对肝细胞的促增殖作用的差异无统计学意义;(2)最适浓度(6.24×10^(-3)mg/L)MaFGF的第4天细胞数量较对照组明显增加(P<0.05);MaFGF组的第10天细胞数(12.4×10~4)是对照组(6×10~4)的2.1倍(P<0.05)。结论在适宜浓度和时间内,MaFGF对肝细胞具有一定的促增殖作用且不具有浓度依赖性。