香蕉Ma TIFY9基因的克隆及表达

为探究一个受低温诱导的香蕉MaTIFY9基因的序列特征及在不同激素和逆境胁迫处理下的表达模式,分别使用PCR和反转录PCR(RT-PCR)技术克隆该基因的gDNA和cDNA序列,分析其核苷酸和编码蛋白序列特性,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术研究其在不同器官和不同激素、逆境胁迫处理下的表达情况.结果显示:MaTIFY9编码了一个分子式为C_(841)H_(1346)N_(236)O_(249)S_(7),氨基酸大小为172 aa,分子量为18 989.93,等电点为9.55的不稳定亲水性蛋白.MaTIFY9无信号肽和跨膜结构,具有TIFY和Jas(CCT-2)两个保守结构域,属于JAZ亚家族,与小果野蕉TIFY9亲缘关系最近.亚细胞定位预测结果显示MaTIFY9主要定位于细胞核. MaTIFY9启动子含有大量的光响应相关元件,此外还含有许多防御及应激、SA和ABA响应元件. qRT-PCR结果显示MaTIFY9在根中表达量最高,其次是假茎和球茎,叶最低;其表达受脱落酸ABA、水杨酸SA和枯萎病显著诱导,受高温抑制.本研究表明,与其他植物TIFY类似,MaTIFY表达受多种激素和逆境调控,可能在香蕉响应非生物和生物逆境胁迫过程中发挥重要作用.