澳洲鳕鲈(Maccullochella peelii peelii)全人工繁殖技术研究

澳洲鳕鲈(Maccullochella peelii peelii)为澳大利亚国宴用鱼,已引入国内开始工厂化养殖,但人工繁殖还有若干问题未解决。为实现其全人工繁殖,本研究就澳洲鳕鲈精卵同步、精子存活时间延长、选取室内工厂化养殖培育的个体作为亲本进行繁殖等人工繁殖过程中关键步骤进行了研究。结果表明精子样本常温保存6h后精子动性降低,存活时间显著缩短,96h后未发现游动精子。添加2.5%葡萄糖或1.25%葡萄糖+2.25%。氯化钠激活精子动性升高,存活时间得以延长,提示葡萄糖可能能够充当外源性能量来源,显著增强精子活力、提高繁殖效率。实验选取6-8龄室内工厂化养殖澳洲鳕鲈作为繁殖亲本,运用该方法最终获得50万尾鱼苗,证明了用室内工厂化养殖的个体作为亲本进行人工繁殖是可以满足工厂化养殖苗种需求的。

虫纹鳕鲈Maccullochella peelii染色体核型分析

采用PHA体内直接注射法制备了虫纹鳕鲈(Maccullochella peelii, Mitchell)染色体标本,经空气干燥法,Giemsa染色后,观察虫纹鳕鲈的染色体核型和特征,结果表明,虫纹鳕鲈染色体数目为48条,2n = 48所占的观察分裂相中的比例为82%;核型公式为:2n = 2sm + 10st + 36t,染色体臂数(NF)为50,其染色体相对长度范围为(5.40 ±0.02)^(2.56 ±0.01),未发现与性别相关的异型染色体。通过比较分析,虫纹鳕鲈属于高位类类群。本研究为麦鳕鲈属鱼类的细胞遗传学研究提供了重要资料,并为其种子资源的保护及人工繁育育种等奠定基础。

不同体质量虫纹鳕鲈对耗氧率、窒息点及排氨率的影响

开展了不同体质量虫纹鳕鲈对耗氧率、窒息点及排氨率的影响试验。采用密闭流水式呼吸试验法,测定了4种不同体质量[A组(100.3±5.8)g、B组(205.1±12.1)g、C组(298.5±17.2)g、D组(405.9±15.6)g]虫纹鳕鲈的耗氧率、窒息点及排氨率。结果表明,虫纹鳕鲈的耗氧率及排氨率,随其体质量的增加而降低;耗氧率日波动较大,每日的06:00—08:00与16:00—18:00处于高水平;窒息点随体质量的增加升高,且A组与D组之间差异显著(P<0.05)。提出,在实际生产中,可根据虫纹鳕鲈不同养殖阶段耗氧率、养殖密度及生物滤池总体耗氧率,测算液氧加入量,提高液氧利用率和循环水的养殖容量,增加养殖效益。

墨瑞鳕幼鱼形态性状对体质量通径分析及生长曲线拟合

为研究墨瑞鳕(Maccullochella peelii)形态性状与体质量之间关系,找出适用于选育的主要形态性状,本研究测量了4月龄墨瑞鳕幼鱼的体质量及11个形态性状,采用相关性分析、通径分析、回归分析、曲线拟合等方法,确定影响体质量的主要形态性状指标。在相关性分析中,11个形态性状与体质量均表现极显著正相关,其中全长和体长的相关系数最大(0.994),体长与体质量的相关系数最大(0.903)。经通径分析,体长、尾柄高、眼径对体质量的通径系数显著水平,其中体长对体质量的直接作用系数最大(0.676),眼径对体质量直接作用系数最小且产生负向效应,主要通过间接作用来影响体质量;决定系数分析显示,3个形态性状(体长、尾柄高、眼径)对体质量的R^(2)=0.861>0.85,确定了3个形态性状为影响体质量的重要形态指标。通过逐步回归分析方法,建立回归方程:Y=-1.568+0.055 X_(2)-0.124 X_(7)+0.267 X_(11)(R^(2)=0.857),并筛选出最优拟合曲线模型。在生产中,4月龄墨瑞鳕幼鱼选优时,除体质量为首选目标性状外,应以体长作为主要参考性状,尾柄高和眼径为辅助参考性状。

澳洲龙纹斑鱼种生长特性研究

在福建山区养殖条件下,进行澳洲龙纹斑Maccullochella peelii peeli鱼种的饲养试验。澳洲龙纹斑鱼种的平均体重和全长分别为(1.29±0.23)g和(4.56±0.30)cm;试验期水温22~28℃,投喂粗蛋白51.2%的商品饲料。经97d培育,澳洲龙纹斑鱼种的平均体重和全长分别达(12.84±1.30)g和(10.03±0.36)cm。澳洲龙纹斑鱼种体重和全长特定生长率分别为2.37%和0.81%;该鱼种体重与全长的最优回归方程为幂函数方程W=0.016L^(2.884)。以Gompertz非线性生长模型算得澳洲龙纹斑鱼种体重和全长生长拐点分别为11.8g和8.5cm,拐点日龄分别为170d和149d;全长生长拐点日龄的出现先于体重生长拐点。

虫纹鳕鲈的生物学特性及人工养殖技术研究

虫纹鳕鲈(Maccullochella peelii peelii)是原产于澳大利亚墨累河流域的一种著名经济鱼类,是澳大利亚乃至世界上最大类型的淡水鱼类之一。对虫纹鳕鲈的生物学特性、人工养殖技术、经济价值和养殖前景进行了介绍。

澳洲龙纹斑肌肉氨基酸的分析研究

为研究不同生长阶段的澳洲龙纹斑肌肉氨基酸组成的动态变化,同时探讨并比较处于商品鱼阶段的澳洲龙纹斑、石斑鱼、鲟鱼肌肉氨基酸的组成与含量变化,以期推广澳洲龙纹斑的养殖技术与引导消费,本研究通过氨基酸自动分析仪检测澳洲龙纹斑亲鱼、商品鱼、幼鱼以及石斑鱼商品鱼、鲟鱼商品鱼中肌肉氨基酸含量,系统分析了澳洲龙纹斑不同生长阶段氨基酸组成的变化规律,同时比较了不同种类商品鱼氨基酸组成的含量。结果表明:3种不同生长阶段的澳洲龙纹斑氨基酸总含量最高为商品鱼70.96%、其次为幼鱼69.24%、亲鱼最低为65.36%(以干基计算),在氨基酸组成中亲鱼和商品鱼的比例较为接近,而幼鱼的氨基酸组成比例则有所变化,在必需氨基酸中,其EAA/TAA值则比亲鱼以及商品鱼低2%左右,而在非必需氨基酸中,EAA/NEAA比值又高于亲鱼与商品鱼2%左右;澳洲龙纹斑、石斑鱼、鲟鱼3种商品鱼肌肉中甜味氨基酸和鲜味氨基酸的含量之和均超过50%(澳洲龙纹斑57.17%,石斑鱼57.68%,鲟鱼57.85%),其反映了3种商品鱼肉质味道鲜美度是处在同一等级上;同时,澳洲龙纹斑商品鱼(E/T比值为40.34、E/NT比值为67.62)符合WHO/FAO提出的E/T应为40%左右和E/NT应为60%以上的参考蛋白质模式标准。

不同药物对澳洲龙纹斑幼鱼小瓜虫病的治疗效果

小瓜虫病是澳洲龙纹斑鱼人工养殖过程中威胁最大的病害,特别是在幼鱼阶段,致死率高达100%。通过两组药物治疗方案,对比和分析治疗澳洲龙纹斑小瓜虫病的效果。结果表明,试验组药物治疗方案(鱼康乐+氟苯尼考+盐酸土霉素药物制剂+活性腐殖酸钠)防治小瓜虫病鱼的鱼苗成活率高达93.3%,而参照组药物(福尔马林+工业盐)防治小瓜虫病鱼苗存活率仅30.0%。试验药物的优化配方为:鱼康乐2g·t^(-1),氟苯尼考3g·t^(-1),盐酸土霉素药物制剂3g·t^(-1),活性腐殖酸钠0.8g·t^(-1)。

2种不同生长规格墨瑞鳕肌肉组织转录组测序分析

【目的】掌握不同生长规格墨瑞鳕个体间差异表达基因的表达特点,为其功能相关基因深度挖掘及分子遗传育种提供科学依据。【方法】挑选同一养殖条件下极大个体和极小个体的墨瑞鳕,构建肌肉组织cDNA文库后,采用Illumina HiSeq^(TM) 4000测序平台对存在生长差异的墨瑞鳕肌肉组织进行转录组测序分析,获得的Unigenes在Nr、Nt、Pfam、KOG/COG、Swiss-Prot、KEGG和GO等数据库中进行比对;通过FPKM及DEGseq筛选出差异表达基因,以GOseq和KOBAS对差异表达基因分别进行GO功能注释及KEGG信号通路富集分析,并采用MISA进行SSR鉴定分析。【结果】从墨瑞鳕肌肉组织中共测序获得39749条Unigenes,其长度范围在301~55230 bp,平均长度为1705 bp。注释到Nt、Nr、Swiss-Prot、Pfam数据库的Unigenes分别有27046、20824、18268和17772条,在7个数据库中均得到注释的Unigenes共计6742条,占Unigenes总数的16.96%。根据差异表达基因筛选条件P<0.05且|log2 Fold Change|>1,共筛选出722个差异表达基因,其中上调基因308个、下调基因414个。差异表达基因GO功能注释分析结果表明,注释基因数目较多的GO功能条目包括细胞过程、代谢过程、膜、细胞器及结合等;KEGG信号通路富集分析发现,差异表达基因被成功富集到234条信号通路上,主要涉及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶信号通路、MAPK信号通路、胰岛素信号通路及FoxO信号通路等。在39749条Unigenes中鉴定筛选出22120个SSRs,占Unigene总数的55.65%,SSR的平均间距为3063 bp。【结论】基于转录组测序分析获得的墨瑞鳕肌肉组织差异表达基因以发挥结合、细胞过程及代谢过程等功能为主,且主要富集在PI3K-Akt信号通路、核糖体信号通路、FoxO信号通路及细胞凋亡等能量代谢相关通路上,通过共同协调而对墨瑞鳕的生长发育起调控作用。

着力农业科技创新 服务新兴产业发展——写在《澳洲龙纹斑种苗繁育与养殖技术研究》完稿之际

概述澳洲龙纹斑的特征与开发意义,以及"澳洲龙纹斑设施种苗工厂化繁育技术产业化工程"项目的实施成效与体会;并介绍《澳洲龙纹斑种苗繁育与养殖技术研究》一书的主要内容及其出版的目的与意义。

黄河三角洲地区墨瑞鳕养殖试验

为综合利用黄河三角洲地区丰富的盐碱地水资源,在黄河三角洲农业高新技术产业示范区开展了墨瑞鳕(Maccullochella peelii peelii)养成试验,对该品种的本地水质适应性及生长状况进行了初步探索。通过8个月的养殖试验,初步确定墨瑞鳕可适应当地地下水环境,生长状况良好。

3种特种水产品肌肉中脂肪酸组成比较及主成分综合评价

【目的】分析3种特种水产品肌肉中脂肪酸组成差异,并对脂肪酸品质进行综合评价,为特种水产品的开发利用提供参考依据。【方法】根据国家标准GB 5009.168-2016对澳洲龙纹斑、青石斑鱼和史氏鲟成鱼肌肉中脂肪酸组成进行测定,再通过SPSS 17.0对各脂肪酸组成进行主成分分析。【结果】澳洲龙纹斑、青石斑鱼和史氏鲟3种成鱼肌肉中含量最高的脂肪酸分别为棕榈酸、棕榈酸和油酸,15种脂肪酸中有7种脂肪酸含量差异显著(P<0.05);3种成鱼肌肉中饱和脂肪酸总量(∑SFA)、多不饱和脂肪酸总量(∑PUFA)、高不饱和脂肪酸总量(∑HUFA)、必需脂肪酸总量(∑EFA)、(n-6)系多不饱和脂肪酸总量[∑(n-6)PUFA]和(n-3)系多不饱和脂肪酸总量[∑(n-3)PUFA]的高低顺序为青石斑鱼>澳洲龙纹斑>史氏鲟;3种成鱼肌肉中∑PUFA/∑SFA排序为澳洲龙纹斑>青石斑鱼>史氏鲟,均高于世界卫生组织建议的最低值0.4~0.5。肉豆蔻酸、硬脂酸、棕榈油酸、亚油酸、亚麻酸(C18:3n3)和二十碳五烯酸(EPA)等6种脂肪酸是3种成鱼肌肉的主要特征脂肪酸;3种成鱼脂肪酸品质综合得分排序为青石斑鱼>澳洲龙纹斑>史氏鲟。【结论】3种特种水产品中以青石斑鱼肌肉的脂肪酸品质最佳,具有较高的营养价值和开发利用潜力。

澳洲龙纹斑源致病菌嗜水气单胞菌TPF-2的分离鉴定及药敏特性研究

为查明浙江某养殖场导致澳洲龙纹斑暴发性死亡的病原,并提供有效的防控措施,本研究利用传统病原菌分离方法从该场患病澳洲龙纹斑肝脏、肾脏和腹水中均分离到1株优势菌,命名为TPF-2。采用形态学特征分析、16S r RNA基因序列分析、构建系统发育树并结合API全自动细菌鉴定仪对其进行鉴定,确定菌株TPF-2为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。菌株TPF-2人工回归感染试验结果显示,其对澳洲龙纹斑具有致病性,人工感染澳洲龙纹斑肝脏、肾脏等多个组织出现肿大充血等症状,且从其肝脏和肾脏中再次分离到相同的病原菌。菌株TPF-2在哥伦比亚血琼脂培养基上呈现β溶血现象。药敏试验显示,菌株TPF-2对先锋必素、菌必治、硫酸锌霉素、氟苯尼考、诺氟沙星、恩诺沙星6种药物敏感,对氨苄青霉素、多西环素、磺胺异恶唑等10种药物耐药。本研究首次发现嗜水气单胞菌可以感染引进的澳洲龙纹斑且具有较强的致病性,初步研究了该病原菌的生物学特性和药物敏感性,为澳洲龙纹斑嗜水气单胞菌病害的防治和澳洲龙纹斑高密度循环水健康养殖产业化提供了依据。

联合使用药物对澳洲龙纹斑鱼种感染小瓜虫的影响

淡水鱼类小瓜虫病(白点病)是由多子小瓜虫(I.multiifliis)引发的一种重要原虫病,其对澳洲龙纹斑(M.peelii peelii)苗种阶段鱼体有强致病力,可导致澳洲龙纹斑苗种全部死亡。为合理用药防控澳洲龙纹斑苗种培育阶段小瓜虫感染,本实验选取平均体重为14.94±3.28 g,平均体长为11.57±2.20 cm的澳洲龙纹斑鱼种,自然感染小瓜虫后,采取具有抗小瓜虫、抗继发感染和促进上皮组织收敛愈合的3种药物联合使用,以小瓜虫感染率、感染强度和鱼种死亡率等指标,观察和评估联合使用药物对澳洲龙纹斑鱼种小瓜虫病防控效果。结果显示,药物实验组澳洲龙纹斑鱼种60 d内发生零星死亡,总死亡率为5.6%;对照组感染小瓜虫后陆续死亡,感染后第11 d感染率上升为100%,死亡率达50%,第16 d时澳洲龙纹斑鱼种全部死亡。实验组澳洲龙纹斑鱼种鳃部、背鳍和体表皮肤小瓜虫感染率和感染强度均显著低于对照组(p<0.01)。表明参照本研究联合使用药物可有效控制澳洲龙纹斑苗种感染小瓜虫,使澳洲龙纹斑苗种小瓜虫病得到有效的控制。本研究结果对澳洲龙纹斑苗种小瓜虫病防控具有借鉴意义。

小瓜虫侵染澳洲龙纹斑鳃的扫描电镜观察

应用扫描电镜对患小瓜虫病的澳洲龙纹斑的鳃丝及鳃小片的表面形态变化进行研究。结果表明,小瓜虫分布在澳洲龙纹斑鳃的扁平上皮细胞之下、鳃丝表面及鳃小片之间,感染小瓜虫后澳洲龙纹斑的鳃丝及鳃小片出现一定程度的膨胀变形,鳃丝小骨裸露变形,鳃小片变粗且间距缩小,鳃小片末端膨大变形,顶端充血呈球状或棒状,黏液细胞分泌增多,而且在鳃丝及鳃小片上观察到氯细胞的分泌增多。

澳洲龙纹斑库区网箱养殖试验

放养平均全长(13.30±1.21)cm、平均体重(20.41±3.81)g的澳洲龙纹斑鱼种进行水库网箱养殖试验。试验期水温为7.4~27.6℃,投喂粗蛋白为48.9%的定制人工配合饲料,经26个月饲养,平均体重达到(1618.04±24.33)g,平均全长达到(46.30±5.26)cm,饲料系数为1.53。澳洲龙纹斑体重和全长的最优回归方程为幂函数方程W=0.003 L 3.394。以Von Bertalanffy非线性生长模型测算得出澳洲龙纹斑的拐点体重为756.7 g,拐点全长为13.7 cm,其拐点试验时间分别为12.1个月和1.4个月。试验结果表明澳洲龙纹斑适合库区网箱养殖。

小瓜虫在澳洲龙纹斑鳃器官上的分布及其影响

【目的】小瓜虫病是澳洲龙纹斑苗种阶段危害巨大的寄生虫病。探究小瓜虫在澳洲龙纹斑鳃器官上的分布及其影响可以丰富小瓜虫的致病性及病理学方面的研究内容,也可以为渔业生产中小瓜虫病的防治提供参考。【方法】采用光镜及扫描电镜技术确定病原,并观察小瓜虫在澳洲龙纹斑鳃丝、鳃小片及鳃盖上的分布情况及这些器官的变化情况。【结果】小瓜虫侵染澳洲龙纹斑的鳃器官后,分布在鳃丝、鳃小片及鳃盖的表面,上皮细胞之下及鳃小片之间,或是包裹在黏液细胞里,但侵染后期在鳃丝及鳃小片上的数量明显少于鳃盖。侵染后期,鳃丝、鳃小片及鳃盖出现一定程度的膨胀变形,黏液细胞分泌增多,鳃小片末端膨大变形甚至黏连融合,顶端充血呈球状或棒状。【结论】对于鳃部而言,侵染后期小瓜虫主要分布在澳洲龙纹斑的鳃盖上。小瓜虫主要通过侵染引发澳洲龙纹斑鳃部器官的变形膨大,使其丧失正常的功能,造成血液循环受阻、渗透压调节失衡,最终导致鱼体缺氧死亡。

澳洲墨瑞鳕源寄鱼不动杆菌的致病性及药敏特性研究

为进一步探明本实验室前期从澳洲墨瑞鳕溃疡组织中首次分离的寄鱼不动杆菌(Acinetobacter piscicola)LW15的致病性和药敏特性,本实验再次明确了该菌株的系统进化地位,同时进行人工回归感染试验检测其致病性。结果显示菌株LW15的16SrDNA与Acinetobacter guillouiae CIP63.46T同源性最高,为97.7%,与本实验室前期分离的系同一菌株,为寄鱼不动杆菌;动物回归实验结果显示该菌为澳洲墨瑞鳕致病菌,半数致死浓度为4.26×106 cfu/mL。基于生物信息学方法对该分离菌进行毒力基因分析,结果显示其携带224个毒力基因,其中invasion、adherence和toxin等3类毒力基因中分别包含2、43和3个基因。对LW15病原菌进行药物敏感性检测,结果显示该菌株对氧氟沙星、环丙沙星、卡那霉素、庆大霉素、头孢曲松、丁胺卡那、哌拉西林等21种药物敏感,对羧苄西林和呋喃唑酮2种药物中度敏感,对四环素、克林霉素、头孢拉定、头孢氨苄、苯唑西林等7种药物不敏感。本研究为由寄鱼不动杆菌引起的澳洲墨瑞鳕溃疡疾病有效防治提供参考依据和实验数据。

澳洲墨瑞鳕源鱼假单胞菌的致病性及药敏特性研究

为进一步研究本实验室前期分离的一株鱼假单胞菌(Pseudomonas piscis)MC042基因的进化和生物学特性,本研究对菌株MC042的16S rRNA及看家基因gyrB,rpoD和rpoB基因序列进行分析,结果显示菌株MC042与模式菌株Pseudomonas protegens CHA0T和Pseudomonas saponiphila DSM 9751T聚集到一个进化分支。经回归感染试验和致病性检测,结果显示该菌株对澳洲墨瑞鳕具有一定的致病性,感染该菌的澳洲墨瑞鳕多个组织出现肿大充血等症状,且从其溃疡组织中再次分离到相同的菌株,其对澳洲墨瑞鳕源鱼的半数致死浓度(7 d)为4.82×106cfu/mL。该分离株的药物敏感性试验结果显示,菌株MC042对头孢他啶、环丙沙星、卡那霉素等11种药物敏感;对多西环素和头孢曲松2种药物中度敏感;对四环素、头孢拉定、呋喃唑酮等17种药物耐药。本实验为由鱼假单胞菌引起的澳洲墨瑞鳕溃疡疾病的有效防治提供了参考依据。

墨瑞鳕生物学特性及养殖技术

本文阐述了墨瑞鳕的生物学特性,总结了墨瑞鳕的养殖技术,包括池塘条件、养殖密度、日常管理、饵料饲养要求、病害防治等方面内容,以期为墨瑞鳕的人工养殖提供参考。