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不同取材方法及检测技术在重症肺炎病原学诊断中的应用 被引量:1
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作者 刘龙群 唐敏 +2 位作者 张维维 吴可人 杨艳 《黑龙江医学》 2024年第3期271-273,共3页
目的:不同取材方法标本的合格率、不同微生物检测技术结果阳性率有差异,探究不同取材方法及检测技术在重症肺炎病原学诊断中的应用,以期提高病原学诊断的准确性。方法:回顾性分析2018年1月—2020年12月中国人民解放军联勤保障部队第九... 目的:不同取材方法标本的合格率、不同微生物检测技术结果阳性率有差异,探究不同取材方法及检测技术在重症肺炎病原学诊断中的应用,以期提高病原学诊断的准确性。方法:回顾性分析2018年1月—2020年12月中国人民解放军联勤保障部队第九〇四医院收治的123例重症肺炎患者的临床资料,同时收集患者经鼻或气管插管留痰培养、肺泡灌洗液培养、肺泡灌洗液宏基因组二代测序技术(mNGS)病原检测等数据,对标本的合格率及阳性率进行分析。结果:123例患者中经鼻或者气管插管留痰标本合格率70%、病原菌生长41例(33.3%),肺泡灌洗液标本合格率92%、病原菌生长76例(61.8%)、肺泡灌洗液mNGS病原菌核酸片段检出107例(86.9%)。经抗感染、抗休克、器官支持等治疗后,115例患者治愈出院,8例死亡。结论:肺泡灌洗液mNGS可以提高重症肺炎患者病原诊断阳性率,可为临床治疗提供依据。 展开更多
关键词 重症肺炎 肺泡灌洗液 宏基因组二代测序技术 痰培养
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A Comprehensive Transcriptome Assembly of Pigeonpea (Cajanus cajan L.) using Sanger and Second-Generation Sequencing Platforms
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作者 Himabindu Kudapa Arvind K. Bharti +16 位作者 Steven B. Cannon Andrew D. Farmer Benjamin Mulaosmanovi Robin Kramer Abhishek Bohra Nathan T. Weeks John A. Crow Reetu Tuteja Trushar Shah Sutapa Dutta Deepak K. Gupta Archana Singh Kishor Gaikwad Tilak R. Sharma Gregory D. May Nagendra K. Singh Rajeev K. Varshney 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2012年第5期1020-1028,共9页
A comprehensive transcriptome assembly for pigeonpea has been developed by analyzing 128.9 million short Illumina GA IIx single end reads, 2.19 million single end FLX/454 reads, and 18 353 Sanger expressed sequenced t... A comprehensive transcriptome assembly for pigeonpea has been developed by analyzing 128.9 million short Illumina GA IIx single end reads, 2.19 million single end FLX/454 reads, and 18 353 Sanger expressed sequenced tags from more than 16 genotypes. The resultant transcriptome assembly, referred to as CcTA v2, comprised 21 434 transcript as- sembly contigs (TACs) with an N50 of 1510 bp, the largest one being -8 kb. Of the 21 434 TACs, 16 622 (77.5%) could be mapped on to the soybean genome build 1.0.9 under fairly stringent alignment parameters. Based on knowledge of intron junctions, 10 009 primer pairs were designed from 5033 TACs for amplifying intron spanning regions (ISRs). By using in silico mapping of BAC-end-derived SSR loci of pigeonpea on the soybean genome as a reference, putative mapping posi- tions at the chromosome level were predicted for 6284 ISR markers, covering all 11 pigeonpea chromosomes. A subset of 128 ISR markers were analyzed on a set of eight genotypes. While 116 markers were validated, 70 markers showed one to three alleles, with an average of 0.16 polymorphism information content (PIC) value. In summary, the CcTA v2 transcript assembly and ISR markers will serve as a useful resource to accelerate genetic research and breeding applications in pigeonpea. 展开更多
关键词 Cajanus cajan (L.) second-generation sequencing transcriptome assembly intron spanning region (ISR)markers.
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宏基因组二代测序技术在神经外科颅内感染诊断中的应用价值 被引量:2
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作者 于海东 朱东 +1 位作者 高麟 李海龙 《临床医药实践》 2023年第11期803-804,833,共3页
目的:分析宏基因组二代测序技术(mNGS)在神经外科颅内感染病原学诊断中的应用价值。方法:选择2020年1月—2022年12月收治的20例神经外科术后拟诊颅内感染患者为研究对象,两周后由3位神经外科专家共同判断是否确诊为颅内感染。对20例患... 目的:分析宏基因组二代测序技术(mNGS)在神经外科颅内感染病原学诊断中的应用价值。方法:选择2020年1月—2022年12月收治的20例神经外科术后拟诊颅内感染患者为研究对象,两周后由3位神经外科专家共同判断是否确诊为颅内感染。对20例患者的脑脊液细菌培养结果和宏基因组二代测序检测结果进行对比。结果:宏基因组二代测序诊断神经外科术后颅内感染的灵敏度、特异度及准确率分别为100.0%(13/13),85.7%(6/7)及95.0%(19/20);细菌培养的灵敏度、特异度及准确率分别为69.2%(9/13),57.1%(4/7),65.0%(13/20);宏基因组二代测序的灵敏度、特异度及准确率均高于脑脊液细菌培养,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:宏基因组二代测序技术在神经外科颅内感染病原学诊断中具有一定价值。 展开更多
关键词 宏基因组二代测序技术 神经外科颅内感染 脑脊液细菌培养
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Diagnosis and treatment of Whipple disease after kidney transplantation:A case report
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作者 Qian Chen Yu-Lin Niu Tao Zhang 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2023年第25期6019-6024,共6页
BACKGROUND Kidney transplantation is the standard treatment for end-stage renal disease.Particularly,rare and specific pathogenic infections which are asymptomatic are often difficult to diagnose,causing delayed and i... BACKGROUND Kidney transplantation is the standard treatment for end-stage renal disease.Particularly,rare and specific pathogenic infections which are asymptomatic are often difficult to diagnose,causing delayed and ineffective treatment and thus seriously affecting prognosis.Tropheryma whipplei(T.whipplei)is a Gram-positive actinomycete widely found in soil,sewage,and other external environments and is present in the population as an asymptomatic pathogen.There is relatively little documented research on T.whipplei in renal transplant patients,and there are no uniform criteria for treating this group of post-transplant patients.This article describes the treatment of a 42-year-old individual with post-transplant T.whipplei infection following kidney transplantation.CASE SUMMARY To analyze clinical features of Whipple’s disease and summarize its diagnosis and treatment effects after renal transplantation.Clinical data of a Whipple’s disease patient treated in the affiliated hospital of Guizhou Medical University were collected and assessed retrospectively.The treatment outcomes and clinical experience were then summarized via literature review.The patient was admitted to the hospital due to recurrent diarrhea for 1 mo,shortness of breath,and 1 wk of fever,after 3 years of renal transplantation.The symptoms of the digestive and respiratory systems were not significantly improved after adjusting immunosuppressive regimen and anti-diarrheal,empirical antibiotic treatments.Bronchoscopic alveolar fluid was collected for meta-genomic next-generation sequencing(mNGS).The deoxyribonucleic acid sequence of Tropheryma whipplei was detected,and Whipple’s disease was diagnosed.Meropenem,ceftriaxone,and other symptomatic treatments were given,and water-electrolyte balance was maintained.Symptoms resolved quickly,and the patient was discharged after 20 d of hospitalization.The compound sulfamethoxazole tablet was continued for 3 mo after discharge.No diarrhea,fever,and other symptoms occurred during the 6-month follow-up.CONCLUSION Whipple’s disease is rare,with no specific symptoms,which makes diagnosis difficult.Polymerase chain reaction or mNGS should be immediately performed when the disease is suspected to confirm the diagnosis. 展开更多
关键词 Kidney transplantation IMMUNOSUPPRESSION Whipple disease Whipple’s nutrient barrier macrogenomics secondgeneration sequencing technology Case report
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新一代测序技术在养猪中的应用
5
作者 张文静 于超 《养猪》 2023年第3期53-57,共5页
新一代测序技术以其高通量、高信息量为优势,随着检测成本的降低及技术的迭代,在养猪中已经逐步得到应用,成为必不可少的技术工具。本文首先对常用的测序技术(全基因组测序、宏基因组测序、外显子测序、简化基因组测序和转录组测序)进... 新一代测序技术以其高通量、高信息量为优势,随着检测成本的降低及技术的迭代,在养猪中已经逐步得到应用,成为必不可少的技术工具。本文首先对常用的测序技术(全基因组测序、宏基因组测序、外显子测序、简化基因组测序和转录组测序)进行概述,继而对其在养猪中的应用进行综述,最后做出总结并对其应用前景加以展望。 展开更多
关键词 新一代测序 全基因组测序 宏基因组测序
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东寨港红树林湿地沉积物抗生素抗性基因的分布特征及其影响因素
6
作者 林倩如 杨雪倩 +2 位作者 张攀 赵毅夫 谢先军 《安全与环境工程》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期221-231,共11页
红树林是生长于热带与亚热带潮间带的一类常绿灌木及小乔木群落,其生境极易受污染影响,是抗生素抗性基因(ARGs)的储存库。以海南省东寨港红树林湿地演丰西河为研究区,通过采集研究区沉积物样品,利用宏基因组测序技术,分析研究区沉积物中... 红树林是生长于热带与亚热带潮间带的一类常绿灌木及小乔木群落,其生境极易受污染影响,是抗生素抗性基因(ARGs)的储存库。以海南省东寨港红树林湿地演丰西河为研究区,通过采集研究区沉积物样品,利用宏基因组测序技术,分析研究区沉积物中ARGs的分布特征及其影响因素,并对沉积物中ARGs与环境因子、微生物群落结构的相关性进行分析。结果表明:研究区沉积物中共检测出212种ARGs亚型,所属12种抗生素抗性类型以利福霉素、氨基糖苷、大环内酯、肽类和磺胺类为主,主要的抗性机制为抗生素靶点改变与靶点置换;研究区不同区域沉积物中优势ARGs基本一致,但不同深度沉积物中的优势ARGs略有差别;Pearson相关分析结果显示,研究区内沉积物中有25种ARGs与环境因子具有显著的相关关系(p<0.05),且相对丰度前20名的ARGs除Paer_CpxR(多药耐药抗性基因)外,均与一个或多个细菌属具有不同程度的相关性(p<0.05)。通过全面评估东寨港红树林湿地沉积物中ARGs污染,可为红树林湿地环境中ARGs传播的生态风险分析与ARGs污染治理提供科学依据。 展开更多
关键词 抗生素抗性基因 红树林湿地沉积物 微生物群落结构 宏基因组测序 环境因子
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宏基因组二代测序对下呼吸道感染诊断治疗的价值研究
7
作者 刘莉琼 刘露 +2 位作者 黄晖 徐艳 万敏娜 《上海医药》 CAS 2023年第22期34-37,52,共5页
目的:探讨宏基因组二代测序对下呼吸道感染诊断治疗的价值。方法:收集2019年11月至2022年11月江西省宜春市人民医院收治的下呼吸道感染患者100例。采取随机数字表法分为两组,每组50例。A组纤支镜肺泡灌洗液接受宏基因组二代测序(metagen... 目的:探讨宏基因组二代测序对下呼吸道感染诊断治疗的价值。方法:收集2019年11月至2022年11月江西省宜春市人民医院收治的下呼吸道感染患者100例。采取随机数字表法分为两组,每组50例。A组纤支镜肺泡灌洗液接受宏基因组二代测序(metagenomic next generation sequencing,mNGS)及常规培养、细菌、真菌涂片或PCR等传统检测。B组纤支镜肺泡灌洗液采用常规培养、细菌、真菌涂片或PCR等传统检测。分析两组检测耗时及诊断价值,评定两组急性生理与慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ);检测两组白细胞(white blood cell,WBC)、降钙素原(proealcitonin,PCT)及C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP);观察两组体温、啰音、CRP、WBC、胸片检查改善时间;比较两组临床疗效。结果:A组经临床最终诊断确诊43例为下呼吸道感染;B组41例为下呼吸道感染。A组检测耗时短于B组,且诊断下呼吸道感染的灵敏度和准确度均高于B组(P<0.05)。治疗后,两组APACHEⅡ评分、WBC、PCT及CRP水平均低于治疗前(P<0.05),且A组低于B组(P<0.05)。A组体温、啰音、CRP、WBC、胸片检查改善时间均早于B组(P<0.05)。A组治疗总有效率为100.00%,高于B组的80.00%(P<0.05)。结论:mNGS对下呼吸道感染的诊断价值较好,可以辅助临床诊治,值得临床推荐。 展开更多
关键词 下呼吸道感染 宏基因组二代测序 诊断 价值
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注意缺陷多动障碍患儿的肠道菌群特征 被引量:6
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作者 张珊 万林 +1 位作者 孙于林 杨光 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期264-268,共5页
目的探索注意缺陷多动障碍(ADHD)患儿肠道菌群分布特征,以及肠道菌群在其发病过程中的可能作用及其机制。方法采用病例对照研究方法,2019年1月至2019年6月选取6~12岁ADHD患儿17例,并征集同年龄健康儿童17例为对照,进行粪便菌群的宏基因... 目的探索注意缺陷多动障碍(ADHD)患儿肠道菌群分布特征,以及肠道菌群在其发病过程中的可能作用及其机制。方法采用病例对照研究方法,2019年1月至2019年6月选取6~12岁ADHD患儿17例,并征集同年龄健康儿童17例为对照,进行粪便菌群的宏基因组测序及分析,比较组间菌群α多样性及物种分类(属、种)的相对丰度等差异。结果ADHD患儿与对照组肠道菌群的α多样性差异无统计学意义(P>0.05)。在菌属水平上,ADHD患儿的粪肠杆菌属Facelibacterium及韦荣球菌属Veillonellaceae丰度降低,气味杆菌属Odoribacter丰度增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。肠球菌属Enterococcus增高,差异有统计学意义(LDA>2)。在菌种水平上,ADHD患儿普氏栖粪杆菌Faecalibacterium prausnitzii、毛螺科菌Lachnospiraceae bacterium以及活泼瘤胃球菌Ruminococcus gnavus丰度降低,而粪拟杆菌Bacteroides caccae、内脏拟杆菌Odoribacter splanchnicus、木假单胞菌Paraprevotella xylaniphila以及小韦荣球菌Veillonella parvula丰度增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ADHD患儿的肠道菌群构成存在异常。 展开更多
关键词 注意缺陷多动障碍 肠道菌群 宏基因组测序 儿童
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氯虫苯甲酰胺胁迫下二化螟中肠细菌类微生物的多样性 被引量:1
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作者 张珏锋 张琴 +2 位作者 李芳 钟海英 陈建明 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期586-594,共9页
【目的】明确氯虫苯甲酰胺处理下二化螟中肠细菌类微生物多样性的变化。【方法】综合运用宏基因组测序以及传统微生物分离纯化的方法分析不同浓度氯虫苯甲酰胺处理的二化螟种群中肠微生物的多样性。【结果】不同浓度(100、200、400μg/m... 【目的】明确氯虫苯甲酰胺处理下二化螟中肠细菌类微生物多样性的变化。【方法】综合运用宏基因组测序以及传统微生物分离纯化的方法分析不同浓度氯虫苯甲酰胺处理的二化螟种群中肠微生物的多样性。【结果】不同浓度(100、200、400μg/m L)氯虫苯甲酰胺处理后二化螟中肠细菌类微生物丰度及多样性降低,处理种群中肠细菌类微生物的OTU数值、特有的OTU数值均低于对照;摩根氏菌属(Morganella)、普罗威登斯菌属(Providencia)以及变形菌属(Proteus)在处理种群中的比例明显升高;同时培养结果显示氯虫苯甲酰胺处理种群获得的菌株除肠杆菌属(Enterobacter)外,还存在超压莱略特氏菌(Lelliottia nimipressuralis)、非脱羧勒菌(Leclercia adecarboxylata)、成团泛菌(Pantoea agglomerans)等其他菌属。COG数据库对比与KEGG分析显示,对照与处理二化螟种群的各功能分类基因数量及相对丰度无明显差异。【结论】解析了氯虫苯甲酰胺胁迫下二化螟中肠细菌类微生物的多样性。这些结果为进一步研究中肠细菌在二化螟对氯虫苯甲酰胺的抗药性奠定基础。 展开更多
关键词 二化螟 氯虫苯甲酰胺 宏基因组 中肠细菌 微生物多样性
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伏立康唑联合米卡芬净治疗曲霉菌性心内膜炎患者的药学监护
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作者 张新茹 王冬雪 +1 位作者 于玲 李馨 《中国药房》 CAS 北大核心 2022年第4期503-506,共4页
目的为真菌性心内膜炎的临床诊疗提供思路。方法对临床药师全程参与的1例曲霉菌性心内膜炎患者的诊断和治疗过程进行分析。临床药师建议行血宏基因组二代测序(mNGS)检测和血培养来辅助真菌性心内膜炎的诊断;从药物的作用机制、作用靶点... 目的为真菌性心内膜炎的临床诊疗提供思路。方法对临床药师全程参与的1例曲霉菌性心内膜炎患者的诊断和治疗过程进行分析。临床药师建议行血宏基因组二代测序(mNGS)检测和血培养来辅助真菌性心内膜炎的诊断;从药物的作用机制、作用靶点和安全性等方面考虑,建议采用伏立康唑联合米卡芬净进行抗真菌治疗;结合患者病情,权衡利弊,将米卡芬净调整至每天300 mg;预防、评估和处理治疗过程中的药物不良反应,并对患者进行用药指导和出院长期随访。结果医师采纳了临床药师的建议。患者血mNGS检出烟曲霉,为其早期诊断和个体化治疗争取了时间;采用伏立康唑联合米卡芬净进行抗真菌治疗1个月后,患者病情得到了良好控制;给予丁二磺酸腺苷蛋氨酸治疗后,患者碱性磷酸酶和γ-谷氨酰转肽酶恢复正常;在临床药师的用药指导、教育和出院随访协助下,患者的用药依从性良好,病情平稳。结论临床药师参与了该患者的诊疗过程,为其制订了个体化的抗感染治疗方案并取得了良好的效果,体现了临床药师的专业能力和服务水平,为真菌性心内膜炎的临床诊疗提供了思路。 展开更多
关键词 真菌性心内膜炎 曲霉菌性心内膜炎 烟曲霉 伏立康唑 米卡芬净 宏基因组二代测序 药学监护 临床药师
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宏基因组下一代测序用于病原体检测的现状及展望 被引量:3
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作者 刘佳育 李冠华 《齐齐哈尔医学院学报》 2020年第3期329-332,共4页
所有的病原体都含有DNA或RNA基因组,这使得基因测序成为一独特的病原体检测方法。自2004年以来,高通量测序(也称作下一代测序next generation sequencing,NGS)的成本已经降低了几个数量级,而且它已经发展成为一个能够检测患者临床样本... 所有的病原体都含有DNA或RNA基因组,这使得基因测序成为一独特的病原体检测方法。自2004年以来,高通量测序(也称作下一代测序next generation sequencing,NGS)的成本已经降低了几个数量级,而且它已经发展成为一个能够检测患者临床样本中的微生物,并对其进行分类的技术平台。本文综述了非靶向宏基因组测序技术在感染性疾病临床诊断中的应用,特别是在传统诊断方法有局限性的领域。综述内容包括下一代测序在病原体检测的优势、宏基因测序的临床应用、宏基因检测的局限性及可能的解决方案。 展开更多
关键词 宏基因组 下一代测序
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自然生草改变苹果园土壤根际细菌群落的组成与结构 被引量:7
12
作者 姚城城 张杰 +2 位作者 卢艳芬 马孟霞 姚允聪 《北京农学院学报》 2017年第4期36-41,共6页
【目的】为了研究自然生草对果园土壤微生物群落的组成、结构及时空变化特征的影响,进而对增强果园土壤肥力、改善理化性状、促进果树生长发育方面产生的积极作用。【方法】利用Miseq高通量测序技术对自然生草(TR)与清耕(CK)条件下,根... 【目的】为了研究自然生草对果园土壤微生物群落的组成、结构及时空变化特征的影响,进而对增强果园土壤肥力、改善理化性状、促进果树生长发育方面产生的积极作用。【方法】利用Miseq高通量测序技术对自然生草(TR)与清耕(CK)条件下,根际土壤细菌群落进行测定与分析。【结果】结果表明,与清耕相比,自然生草明显提高果实膨大期土壤0~20cm、20~40cm的土层的有机质、全氮、碱解氮、速效磷及速效钾含量;降低土壤pH值。自然生草比清耕明显提高土壤细菌群落的丰度、种类丰富度和多样性指数(Shannon Index)。在门级水平上,宏基因组检测样本中共有37个门,变形菌门是比较明显的优势菌群,其次为酸杆菌门、浮霉菌门、放线菌门;在属分类级别上,宏基因组检测样本中共有470类菌属,芽单胞菌属(Gemmatimonas)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、类似牙球菌属Blastocatella是优势菌属。自然生草明显提高Ohtaekwangia、Chryseolinea的比例,降低Gaiella、化螺菌属(Nitrospira)比例;韦恩图显示细菌群落自然生草与清耕共有470类菌属,自然生草有63类独特的菌属,清耕有72类独特的菌属。【结论】自然生草提高苹果园土壤细菌群落的多样性,改良群落的结构和组成,明显提升土壤的养分状况。 展开更多
关键词 苹果园 自然生草 清耕 宏基因组测序
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民勤绿洲退耕地土壤微生物群落结构与功能多样性特征 被引量:1
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作者 李常乐 张富 +3 位作者 王理德 赵赫然 赵学成 张恒平 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1821-1829,共9页
为明确退耕阶段对土壤微生物群落结构和功能的影响,选取3个不同退耕阶段的荒漠绿洲区土壤为研究对象,通过宏基因组测序技术来研究不同阶段退耕地中土壤微生物群落的结构和功能多样性特征.结果表明,3个阶段退耕地土壤中放线菌门(Actinoba... 为明确退耕阶段对土壤微生物群落结构和功能的影响,选取3个不同退耕阶段的荒漠绿洲区土壤为研究对象,通过宏基因组测序技术来研究不同阶段退耕地中土壤微生物群落的结构和功能多样性特征.结果表明,3个阶段退耕地土壤中放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)和芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)的相对丰度存在显著差异,为优势菌门.与退耕前期相比,退耕修复后期增加了群体感应、卟啉与叶绿素代谢、泛酸盐和辅酶A生物合成以及苯乙烯降解的功能基因比例,且相对丰度存在显著差异(P<0.05),表明不同退耕阶段改变了土壤微生物群落营养循环与能量代谢的功能潜力. RDA结果表明电导率(EC)、速效钾(AK)和全氮(TN)对土壤微生物功能组成具有显著影响,其中EC对微生物功能组成的影响最大.不同退耕阶段对土壤微生物群落结构和功能组成多样性具有显著影响,在民勤绿洲退耕地生态修复中,微生物群落结构和功能组成对不同阶段的土壤修复敏感性可综合相关指标进行考虑. 展开更多
关键词 民勤绿洲 退耕地 宏基因组测序 功能多样性 群落结构
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一株羊肠道病毒的分离鉴定及其基因组特征分析
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作者 张雨星 马雪青 +12 位作者 李平花 魏达礼 李冬 张婧 王卉 袁红 王萌 白兴文 刘在新 卢曾军 曾巧英 王桂荣 孙普 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期511-518,共8页
本研究利用宏基因组测序技术,从死亡湖羊淋巴组织中检测出小反刍兽疫病毒与羊肠道病毒混合感染,为了分离羊肠道病毒,采取病毒总RNA转染BHK21细胞方法,连续传代后,通过致细胞病变、测序、TCID_(50)测定和病毒一步生长曲线、电镜观察等鉴... 本研究利用宏基因组测序技术,从死亡湖羊淋巴组织中检测出小反刍兽疫病毒与羊肠道病毒混合感染,为了分离羊肠道病毒,采取病毒总RNA转染BHK21细胞方法,连续传代后,通过致细胞病变、测序、TCID_(50)测定和病毒一步生长曲线、电镜观察等鉴定分离出病毒,并与参考毒株比对分析分离病毒的基因特征。结果显示,转染病毒总RNA的BHK21细胞传至第2代就出现了明显的致细胞病变效应,测序证明培养物中仅含羊肠道病毒,其基因组全长为7446 nt,其中5′UTR长821 nt,3′UTR长109 nt,ORF长6516 nt,与参考毒株比较可划分为G种肠道病毒,病毒粒子大小为20~30 nm,第6代细胞毒感染8 h时TCID_(50)值最高,为10^(-4.2)/0.1 mL,命名为JSNT/1/2022株。本研究首次利用组织病料RNA转染细胞的方法成功分离出1株羊肠道病毒,说明羊肠道病毒核酸具有感染性,为羊肠道病毒的分离鉴定探索了一种更为可靠的方法,也为羊肠道病毒相关基础与应用研究奠定了病原学基础。 展开更多
关键词 羊肠道病毒 分离鉴定 RNA感染性 基因组
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基于宏基因组学分析安徽地区畜禽粪便微生物耐药性特征
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作者 桑金慧 何振杰 +4 位作者 余相宇 余波 宋祥军 邵颖 祁钊 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期29-40,共12页
目的为深入了解在食用动物生产过程中滥用抗生素,迫使肠道共生细菌成为微生物耐药性(antimicrobial resistance,AMR)重要宿主之一的现象,本研究利用宏基因组学针对食用动物的肠道细菌AMR进行分析。方法利用宏基因组学技术对安徽地区猪... 目的为深入了解在食用动物生产过程中滥用抗生素,迫使肠道共生细菌成为微生物耐药性(antimicrobial resistance,AMR)重要宿主之一的现象,本研究利用宏基因组学针对食用动物的肠道细菌AMR进行分析。方法利用宏基因组学技术对安徽地区猪和鸡粪便中的AMR及可移动遗传元件进行定量和表征,并且在核心抗性基因亚型水平上研究猪和鸡共生细菌群落的耐药性特征。结果从抗性基因(antimicrobial resistance gene,ARG)的丰度和多样性来看,鸡肠道共生菌中ARG的多样性和检出率高于猪,而猪肠道共生菌中ARG总丰度高于鸡。大环内酯―林可酰胺―链菌素类抗性基因和四环素抗性基因是所有样本中含量最高的2种ARG,研究也检测到了世界范围内流行的ARG,包括optrA、qnrS、lsaE和tem等,同时,一些可移动遗传元件,包括噬菌体、质粒和插入序列也显示出与ARG存在一定相关性,这揭示了ARG的水平转移潜力。此外,食物链动物的抗性组和微生物组之间在统计学上也被证明存在正相关性。宿主溯源分析表明,在鸡样本中的拟杆菌和大肠埃希菌被检测出含有大量ARG,而在猪的样本中被检测出含有丰富ARG的为瘤胃球菌和罗氏菌。结论本研究通过对猪和鸡共生细菌群落中AMR的调查统计,证实肠道微生物群是ARG的重要宿主及传播途径之一,为评价食用动物安全性及后续泛耐药基因数据库的构建提供科学依据,对公共健康具有重要意义。 展开更多
关键词 禽畜粪便 肠道微生物 耐药性 宏基因组学 二代测序
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碳氮比对MBBR系统脱氮性能及微生物群落的影响
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作者 曾锦涌 柯水洲 +3 位作者 袁辉洲 祝凉 马晶伟 袁佳佳 《环境工程》 CAS CSCD 2024年第4期100-110,共11页
采用不同碳氮比(C/N)的合成废水,比较了连续流和序批式2种运行方式下单级移动床生物膜反应器(MBBR)的脱氮性能差异。结合宏基因组测序技术,对不同阶段载体上的生物膜进行了微生物群落和功能基因丰度分析,并分析了反应器内主要的氮素代... 采用不同碳氮比(C/N)的合成废水,比较了连续流和序批式2种运行方式下单级移动床生物膜反应器(MBBR)的脱氮性能差异。结合宏基因组测序技术,对不同阶段载体上的生物膜进行了微生物群落和功能基因丰度分析,并分析了反应器内主要的氮素代谢通路,旨在探讨不同C/N和运行方式对MBBR系统脱氮性能和生物膜群落结构的影响。结果显示:C/N的变化对MBBR工艺NH_(4)^(+)-N去除影响不大,各阶段NH_(4)^(+)-N去除率均保持在95%以上,但同步硝化反硝化(SND)效率因受到反硝化性能的限制,各阶段存在较大差异。此外,SBMBBR反应器中总无机氮(TIN)去除率始终高于CFMBBR反应器,原因可能是反硝化过程中起关键作用的narGHI、napAB、nirK、nirS、norBC和nosZ功能基因的序列数总和存在差异。不同运行方式下的反应器中主要优势菌门和菌种差异明显,也是SBMBBR与CFMBBR反应器之间脱氮性能差异较大的重要原因之一。该结果可为MBBR反应器处理较低C/N的城市生活废水的优化设计和运行提供参考。 展开更多
关键词 移动床生物膜反应器 碳氮比 宏基因组测序 功能基因 氮素代谢通路 微生物群落结构
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老年鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床特征分析
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作者 李友堂 陈盛文 +2 位作者 赖燕琴 梁荣章 马志益 《热带医学杂志》 CAS 2024年第3期374-377,382,共5页
目的探讨老年鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床特点、影像学、实验室检查及治疗策略。方法回顾性分析2020年1月-2021年10月福建医科大学附属龙岩第一医院采用宏基因组二代测序(mNGS)技术诊断的14例老年鹦鹉热衣原体肺炎患者的诊治过程,记录... 目的探讨老年鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床特点、影像学、实验室检查及治疗策略。方法回顾性分析2020年1月-2021年10月福建医科大学附属龙岩第一医院采用宏基因组二代测序(mNGS)技术诊断的14例老年鹦鹉热衣原体肺炎患者的诊治过程,记录患者临床表现、实验室检查、影像学表现和治疗及预后情况。结果14例患者平均年龄(68.9±5.9)岁,7例有明确禽类接触史;临床主要表现包括发热(100.0%,14/14)、乏力(71.4%,10/14)、Ⅰ型呼吸衰竭(50.0%,7/14)。实验室检查白细胞(WBC)有6例高于9.95×10^(9)/L,中性粒细胞比例(NR)多数增高,13例NR高于75%。所有病例均表现为C反应蛋白(CRP)明显增高。最常见的影像改变是实变,表现为大叶性肺炎,下叶及单肺叶大叶性肺炎常见(57.1%,8/14),常伴胸腔积液(71.4%,10/14)。治疗过程中,用药方案主要为单用莫西沙星、多西环素联合莫西沙星或者多西环素联合其他用药。最终出现休克2例,给予呼吸支持治疗2例,仅有1例死亡,其他均好转。结论老年鹦鹉热衣原体肺炎较易出现低氧血症,甚至呼吸衰竭,经恰当的治疗,总体预后良好,能取得明显的效果。 展开更多
关键词 老年 鹦鹉热衣原体 社区获得性肺炎 宏基因组二代测序
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宏基因组第二代测序技术在神经外科颅内感染病原学诊断中的应用价值
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作者 于海东 朱东 +1 位作者 高麟 李海龙 《首都食品与医药》 2023年第12期44-45,共2页
目的分析宏基因组第二代测序技术在神经外科颅内感染病原学诊断中的应用价值。方法选择包头医学院第二附属医院2020年1月-2022年1月收治的18例神经外科手术后拟诊颅内感染患者为研究对象,两周后由3位神经外科专家共同判断是否确诊为颅... 目的分析宏基因组第二代测序技术在神经外科颅内感染病原学诊断中的应用价值。方法选择包头医学院第二附属医院2020年1月-2022年1月收治的18例神经外科手术后拟诊颅内感染患者为研究对象,两周后由3位神经外科专家共同判断是否确诊为颅内感染。18例患者均进行常规脑脊液细菌培养和宏基因组第二代测序,将宏基因组二代测序技术检测结果和脑脊液细菌培养结果进行对比。结果宏基因组第二代测序技术检测诊断神经外科术后颅内感染的灵敏度和特异度及准确率分别为100%(12/12)、83.3%(5/6)、94.4%(17/18);脑脊液细菌培养组灵敏度和特异度及准确率分别为66.7%(8/12)、50.0%(3/6)、61.1%(11/18);宏基因组第二代测序技术灵敏度、特异度、准确率均高于脑脊液细菌培养组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论宏基因组第二代测序技术在神经外科颅内感染病原学诊断中具有一定价值,值得临床重视并推广。 展开更多
关键词 宏基因组第二代测序技术 神经外科颅内感染 脑脊液细菌培养
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诊断性支气管镜检查对重症鹦鹉热衣原体肺炎早期病原体的快速评估 被引量:3
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作者 李婧文 李生全 +7 位作者 刘娜 宋甜甜 赵立孝 王雪莉 郭孟亚 高亚梅 万秋风 徐思成 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期37-42,共6页
目的:探讨床边诊断性支气管镜检查对重症鹦鹉热衣原体肺炎早期病原体的快速评估,旨在宏基因组二代测序(mNGS)检测结果出来前开始有效的抗感染治疗。方法:回顾性分析2020年10月至2021年6月新疆医科大学第一附属医院、新疆阿克苏地区第一... 目的:探讨床边诊断性支气管镜检查对重症鹦鹉热衣原体肺炎早期病原体的快速评估,旨在宏基因组二代测序(mNGS)检测结果出来前开始有效的抗感染治疗。方法:回顾性分析2020年10月至2021年6月新疆医科大学第一附属医院、新疆阿克苏地区第一人民医院以及新疆生产建设兵团第一师医院成功救治的3例重症鹦鹉热衣原体肺炎患者的临床资料,包括床边诊断性支气管镜检查对病原体的快速评估结果以及开始抗感染的抗菌药物使用情况。结果:3例患者均为男性,年龄分别为63、45和58岁;发病前均有明确的鸟类接触史;临床表现主要为发热、干咳、气短及呼吸困难,其中1例伴嗜睡、腹痛。实验室检查结果显示,入院后及入重症监护病房(ICU)时,2例患者外周血白细胞计数(WBC)偏高〔(10.2~11.9)×10^(9)/L〕,3例患者中性粒细胞百分比均升高(85.2%~94.6%),淋巴细胞百分比均降低(3.2%~7.7%)。3例患者入院后降钙素原(PCT)升高,至入ICU时仍升高(0.3~4.8 ng/L);C-反应蛋白(CRP)均升高(58.0~162.0 mg/L),红细胞沉降率(ESR)均升高(36.0~90.0 mm/1 h)。入院后血清丙氨酸转氨酶(ALT)升高2例(136.7 U/L、220.5 U/L),天冬氨酸转氨酶(AST)升高2例(249.6 U/L、164.2 U/L);入ICU时3例患者ALT(162.2~267.9 U/L)、AST(189.8~223.2 U/L)均升高。3例患者入院后、入ICU时血肌酐(SCr)均正常。3例患者胸部CT表现为急性间质性肺炎、支气管肺炎以及肺实变,以1个肺叶为主的多肺叶受累,其中2例伴少量胸腔积液,1例伴较多规则的小气囊。3例患者入ICU时氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))分别为100.0、57.5和105.4 mmHg(1 mmHg≈0.133 kPa),符合中重度急性呼吸窘迫综合征(ARDS),均接受气管插管机械通气。3例患者床边支气管镜下均可见黏膜明显充血、水肿,无脓性分泌物,有1例黏膜出血。3例患者床边诊断性支气管镜检查病原体评估结果可能为非典型病原体感染,分别快速给予莫西沙星、希舒美和多西环素静脉注射,同时联合碳青霉烯类抗菌药物静脉注射。3 d后支气管肺泡灌洗液(BALF)的mNGS结果提示只有鹦鹉热衣原体感染,此时病情明显改善,PaO_(2)/FiO_(2)明显升高,故抗菌药物治疗方案不变,mNGS仅起到验证初始诊断的作用。2例患者分别于入ICU 7 d、12 d拔管,1例因发生院内感染于入ICU 16 d拔管。3例患者均在病情平稳后转入呼吸科病房。结论:以临床特点为基础的床边诊断性支气管镜检查,不仅有助于重症鹦鹉热衣原体肺炎早期病原体的快速评估,并且在mNGS检测结果回报之前开始有效的抗感染治疗,还可弥补mNGS检测结果滞后性及不确定性等缺陷。 展开更多
关键词 肺炎 鹦鹉热衣原体 支气管镜检查 宏基因组二代测序
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红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响
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作者 程学英 陈琳双 +4 位作者 刘奔 孙杰 董雯 潘凌鸿 伦永志 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2023年第11期1248-1256,共9页
目的探讨红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响,为从微生态角度研究红茶在人体肠道菌群形成过程中的作用机制奠定基础。方法利用宏基因组测序技术检测4周龄新生幼鼠(4weeks组,n=30)、12周龄正常对照组小鼠(control组,n=15)和12周龄喂饲红... 目的探讨红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响,为从微生态角度研究红茶在人体肠道菌群形成过程中的作用机制奠定基础。方法利用宏基因组测序技术检测4周龄新生幼鼠(4weeks组,n=30)、12周龄正常对照组小鼠(control组,n=15)和12周龄喂饲红茶水实验组小鼠(teadrink组,n=15)的肠道菌群分布,分析3组样本的菌群差异情况,探求红茶对新生幼鼠肠道菌群形成的影响。结果与control组相比,teadrink组小鼠肠道拟杆菌门(t=-7.711,P<0.001)、拟杆菌科(t=-3.411,P=0.009)、长尾嗤菌体科(t=-2.515,P=0.036)、拟杆菌属(t=-2.693,P=0.027)、邓肯菌属(t=-2.434,P=0.041)、居海事城球杆菌属(t=-3.327,P=0.029)、迪博邓肯菌(t=-2.679,P=0.028)、普通居海事城球杆菌(t=-3.401,P=0.027)和Duncaniella_sp._C9(t=-3.104,P=0.035)相对丰度显著增加,厚壁菌门(t=8.952,P<0.001)、乳杆菌科(t=13.102,P<0.001)、消化链球菌科(t=3.665,P=0.021)、爱格菌科(t=4.481,P=0.002)、理研菌科(t=3.626,P=0.022)、乳杆菌属(t=5.542,P=0.004)、黏液乳杆菌属(t=6.334,P=0.002)、龙包茨菌属(t=3.785,P=0.005)、阿德勒菌属(t=4.504,P=0.002)、约氏乳杆菌(t=4.282,P=0.011)和罗伊氏粘液乳杆菌(t=6.156,P=0.003)相对丰度显著减少。与4weeks组相比,teadrink组小鼠肠道菌群分布差异大于control组。结论红茶对新生幼鼠肠道菌群的形成能够产生影响,不同丰度的菌群可能通过调节碳水化合物代谢等途径来达到改善肠道菌群结构、增强肠道稳态的目的,具体代谢机制有待深入研究。 展开更多
关键词 红茶 新生幼鼠 肠道菌群 宏基因组测序
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