Small Maf转录因子在神经系统疾病中的作用研究进展

Small Maf转录因子(sMafs),即MafF、MafG、MafK,一组含有碱性亮氨酸拉链结构的高度同源性蛋白,由于其自身缺乏转录激活域,在体内主要与Cap‘n’Collar蛋白及Bach蛋白形成异源二聚体,以及自身之间形成同源二聚体发挥作用。氧化应激和炎症反应是神经系统疾病中的共同特征,并在神经损伤、神经认知、神经发育及其他神经功能中具有损伤性的作用。sMafs在氧化应激和炎症反应中起着保护作用,本文现就sMafs在神经系统疾病中的抗氧化、抗炎以及其在神经损伤、认知、发育及其他的作用机制作一综述。

腺病毒转染MafA诱导人脐带间充质干细胞表达胰腺细胞特异性基因

背景:人脐带间充质干细胞经化学药物或共培养等方法诱导后胰岛素分泌量低,转染胰腺发育特异性基因诱导干细胞向成熟β细胞分化是近年来的研究热点。目的:探讨MafA基因转染后人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法:腺病毒携带外源性β细胞发育的关键转录因子Maf A(Ad-MafA-EGFP),转染入第3代人脐带间充质干细胞,诱导后7 d观察细胞的形态学变化,应用PCR检测细胞中胰腺细胞特异性基因(glucagon、Pdx1、Nkx2.2)的表达。结果与结论:(1)经Ad-Maf A-EGFP转染后,倒置相差显微镜下观察人脐带间充质干细胞形态未见明显变化;(2)荧光显微镜下观察Ad-MafA-EGFP已进入细胞内;(3)经Ad-MafA-EGFP诱导后,人脐带间充质干细胞中人源性胰腺前体细胞glucagon、Pdx1、Nkx2.2基因表达增高,为人脐带间充质干细胞进一步分化成熟胰腺β细胞提供实验依据。

MafK通过p65乙酰化对心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的探究MafK对大鼠心肌细胞(H9c2)缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及相关机制。方法将H9c2细胞随机分为对照组、H/R组、抑制对照组和MafK抑制组。对照组(按H9c2细胞的正常培养方式进行处理)、H/R组(H9c2细胞进行缺氧4 h/复氧12 h的处理)、抑制对照组(H9c2细胞转染空白对照siRNA-NC 48 h后进行H/R处理)和MafK抑制组(H9c2细胞转染siRNA-MafK 48 h后进行H/R处理)。CCK-8法检测各组细胞的活性;ELISA法检测各组TNF-α和IL-6的表达水平;Caspase-3活性检测试剂盒检测各组细胞的Caspase-3活性;Western blot检测各组细胞的MafK蛋白、凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2和Cleaved caspase-3)和NF-κB p65乙酰化蛋白的表达水平。结果与对照组相比,MafK在H/R组中的表达水平显著升高(P<0.01)。与抑制对照组相比,敲低MafK可以显著降低MafK在H/R处理下的H9c2细胞中的表达水平(P<0.05)。与对照组相比,H/R组H9c2细胞活性降至(47.07±4.07)%(P<0.05),而TNF-α和IL-6的表达水平则由原来的(12.78±2.11)pg/mL、(45.01±4.07)pg/mL提升至(88.90±7.34)pg/mL(P<0.05)、(148.36±13.36)pg/mL(P<0.05),并且Caspase-3活性A值由0.21±0.01提升至0.52±0.02(P<0.05),促进了H9c2的炎症和凋亡。而敲低MafK使H9c2细胞活性由(48.20±3.09%)提升至(74.90±5.54)%(P<0.05),并将TNF-α和IL-6的表达水平则由原来的(93.55±8.53)pg/mL、(151.52±9.55)pg/mL降低至(64.99±5.47)pg/mL(P<0.05)、(102.24±6.79)pg/mL(P<0.05)。此外,使Caspase-3活性A值由0.53±0.04降至0.34±0.03(P<0.05),表明敲低MafK将逆转由H/R引起的炎症和凋亡的变化。与抑制对照组相比,敲低MafK可以显著抑制Bax和Cleaved Caspase-3的表达而促进Bcl-2的表达。最后,敲低MafK还可以显著抑制NF-κB p65乙酰化蛋白的表达水平。结论抑制Mafk可以有效减轻缺氧/复氧对心肌细胞的损伤,其机制可能与调控p65乙酰化有关。

MafA磷酸化在胰岛素基因表达中的作用

目的探讨肌腱膜纤维肉瘤癌基因同系物A(MafA)磷酸化在胰岛素基因表达中的作用。方法在不同浓度的葡萄糖或糖原合成酶激酶3(GSK3)抑制剂中培养Ins-1细胞24h后,分别采用Western blotting和RT-PCR法检测MafA蛋白和胰岛素基因的表达。结果高糖组完全磷酸化的MafA和insulin 2mRNA表达均降低(P<0.05)。GSK3抑制剂组完全磷酸化的MafA降低(P<0.05),同时insulin 2mRNA表达降低(P<0.01),分别下降了31.45%和46.77%。结论 MafA在葡萄糖调节胰岛素基因表达中发挥重要作用,葡萄糖毒性可能通过抑制转录因子MafA降低insulin 2基因表达。MafA经GSK3磷酸化后促进insulin 2基因转录。