凹叶厚朴扦插繁殖的生根机理研究

为了探索凹叶厚朴扦插生根的方法及其生根机理,促进凹叶厚朴优良无性系的快速推广栽培。以半木质化枝条为插条,依据单因素试验结果,设计L9(34)正交试验,优化扦插生根配方;定期采集插条下段,测定其韧皮部内的营养物质的含量及氧化酶的活性变化;定期采集插穗下部制作石蜡切片,观察生根部位及发生过程。凹叶厚朴的最佳扦插生根配方为:以泥炭土:珍珠岩:黄沙(1:1:1)为基质,用KIB A1000mg/L浸泡30min,生根率可达94.4%;生根过程中,用KIBA浸泡的插条与对照相比,其内的营养物质含量及PPO及POD活性的变化规律相同,但试验组各项峰值到达的时间比要对照早10天,对应的生根时间也早10天;PPO及POD活性最高值达到时间与生根时间相符;凹叶厚朴的不定根产生有潜伏型根原基和诱导型根原基两种类型,潜伏型根原基存在于幼茎的皮层外方,诱导型根原基存在于皮层叶隙维管束的外方,不定根的形成主要以诱导型根原基为主。

厚朴与凹叶厚朴的抗逆性

本文根据西安夏季高温干旱、冬季严寒的气候特点,采用田间栽培、抗逆生理特性测定和抗旱形态特征比较等方法,对引种的国家三级保护植物厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)和凹叶厚朴(M.officinalis subsp.biloba(Rehd.et Wils.)Cheng et Law)的抗逆性进行了探讨,并用已适应西安气候多年的辛夷(M.liliflora Desr.)作对照。结果表明:两种植物均能在西安越冬,但只有在供水充足和适当遮荫条件下才能顺利越夏。凹叶厚朴的抗逆性强于厚朴,但它们的抗旱抗热性均较辛夷弱。

酶解法对凹叶厚朴中厚朴酚与和厚朴酚转移率的影响

目的研究酶解法处理凹叶厚朴后对其厚朴酚与和厚朴酚转移的影响转移率的影响。方法采用HPLC对酶解处理后的凹叶厚朴水提液中厚朴酚与和厚朴酚含量进行测定,同时与直接水提法进行对比。结果经过酶解处理过的厚朴,水回流提取厚朴酚与和厚朴酚的转移率分别为88.60%和88.74%,均高于直接用水提取的转移率。结论酶解法有利于提高凹叶厚朴水提液中厚朴酚与和厚朴酚的转移率。

凹叶厚朴细胞悬浮培养的研究

目的研究凹叶厚朴MagnoliaofficinalisRehd.etils.Subsp.biloba(Rehd.etwils.)Law的细胞悬浮培养。方法以凹叶厚朴茎段诱导的愈伤组织为材料,应用L9(34)正交设计研究植物生长调节剂对凹叶厚朴悬浮细胞生长的影响,通过单因素试验,考察初始接种量、蔗糖浓度、pH值对凹叶厚朴悬浮细胞生长的影响。结果植物生长调节剂6-BA是影响凹叶厚朴悬浮细胞生长的主要因素;最佳初始接种量为8ml;最佳蔗糖浓度为30g/L;最佳pH值为6.5时。结论初步建立了适合凹叶厚朴悬浮细胞培养的体系。

遂川县凹叶厚朴有效成份调查

目的调查遂川产原凹叶厚朴有效成份含量。方法根据不同海拔随机抽样。结果8年以上凹叶厚朴的有效成份均可达到2000年版《中国药典》标准。结论遂川产的凹叶厚朴有效成份含量较高。

凹叶厚朴叶的化学成分研究

目的研究凹叶厚朴Magnoliaofficinalisvar．biloba叶的化学成分。方法采用硅胶、凝胶及MCI等柱色谱进行分离纯化，经波谱解析确定化合物结构。结果从凹叶厚朴叶75％7,醇提取物分离得到12个化合物，分别鉴定为鹅掌揪树脂醇A（1）、6，7-二甲氧基香豆素（2）、吲哚-3-甲醛（3）、D-（＋）-去氢催吐萝芙叶醇（4）、黑麦草内酯（5）、厚朴酚（6）、反式对羟基桂皮醛（7）、和厚朴酚（8）、对烯丙基苯酚（9）、正二十九烷酸（10）、蚱蜢酮（11）、紫丁香苷（12）。结论化合物1～5、7、9～1l为首次从凹叶厚朴和木兰属植物中分离得到。

井冈山产凹叶厚朴挥发油中化学成分分析

目的对井冈山产凹叶厚朴Magnolia officinalis var biloba果实、花、干皮、叶4个部位的挥发油成分进行分析,为厚朴不同部位的入药性质提供参考。方法采用水蒸气蒸馏法提取厚朴4个部位的挥发油,运用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对挥发油成分进行分析和鉴定,采用峰面积归一化法确定各成分的质量分数。结果从井冈山产凹叶厚朴的挥发油中共鉴定出75个化学成分,其中果实中鉴定出1-石竹烯、α-蒎烯等42个成分,质量分数占98.7%:花中鉴定出4-羟基-4-甲基-2-戊酮、茨烯等19个成分,质量分数占77.59%:干皮中鉴定出α-按叶油醇、四十四烷等24个成分,质量分数占77.92%;叶中鉴定出1-石竹烯、α-桉叶油醇等32个成分,质量分数占76.48%。1-石竹烯和四十三烷为4个部位共有。结论从凹叶厚朴挥发油成分角度,凹叶厚朴叶可替代厚朴皮入药,果实可以入药,花活性成分量很少,不建议入药。

凹叶厚朴快繁技术体系的建立

目的建立凹叶厚朴Magnolia officinalis subsp.biloba快速繁殖体系。方法以选育的优质凹叶厚朴种胚为初始外植体,采用单因素及正交试验筛选不同基本培养基,不同植物调节剂(6-BA、NAA、IBA、IAA),获取最适种胚启动培养基,丛芽增殖培养基和生根培养基。结果适宜种胚萌发的启动培养基为B5+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,出芽率达87.0%;适合丛芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,增殖系数可达6.2;适合生根的培养基为1/2 MS+NAA 0.5mg/L,30 d生根率可达84%。结论建立了凹叶厚朴快速繁殖体系,为凹叶厚朴优质种苗的工厂化育苗奠定了基础。

基于液相色谱-串联四极杆飞行时间高分辨质谱技术分析凹叶厚朴不同规格药材的差异化学成分

目的分析凹叶厚朴不同规格药材化学成分的差异。方法采用液相色谱-串联四极杆飞行时间高分辨质谱(LC-Triple TOF MS/MS)结合多元统计分析技术对凹叶厚朴干皮(筒朴)、根皮(根朴)与枝皮(枝朴)的化学组成进行比较分析。通过二级串联质谱分析,对其质谱数据进行峰匹配、峰对齐、滤噪处理等进行特征峰提取;用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行数据处理;通过一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息,结合软件数据库搜索及相关文献进行成分鉴定。结果筒朴、根朴与枝朴的化学组成得到明显区分;初步筛选鉴定出不同规格之间22种差异显著的化学成分,其中所分析样品10种共有差异化学成分呈现不同的变化规律。结论为建立基于中药厚朴代谢组化学信息的规格等级数学预测模型及其商品药材质量的综合评价提供参考资料。

凹叶厚朴愈伤组织诱导及其有效成分量变化研究

目的研究凹叶厚朴愈伤组织的诱导，并对其产生的有效成分厚朴酚与和厚朴酚总量进行检测，以期获得牛产药用成分的新途径，补充药材资源的不足。方法以不同母株种子幼苗的不同营养器官为外植体，采用不同种类及不同质量浓度的植物调节剂诱导愈伤组织，并在继代培养基中加入前体化合物三一苯丙氨酸及D，LB-β苯丙氨酸对愈伤组织进行诱导培养；HPLC法检测不同培养途径获得的愈伤组织中厚朴酚与和厚朴酚量的总和。结果筛选出最佳愈伤组织诱导培养基为：Bs＋6-BA2．0mg／L＋2，4-D1．5mg／L；不同母株种子幼苗诱导的愈伤组织总酚量存在显著差异，质量分数变化范围为0．004％～0．228％；不同营养器官作为外植体诱导的愈伤组织总酚量存在差异，以幼茎为外植体诱导的愈伤组织总酚量最高可达0．25％；继代培养基中添加前体化合物D，L，β-苯丙氨酸，能有效提高愈伤组织总酚量8～10倍。结论凹叶厚朴愈伤组织中含有少量的厚朴酚及和厚朴酚，不同的母株种子幼苗及不同幼苗器官诱导的愈伤组织总酚量都有差异，D，L，β-苯丙氨酸能有效促进愈伤组织中总酚的合成。