基于网络药理学与分子对接技术探讨脉管复康片治疗动脉粥样硬化的作用机制

目的:利用网络药理学方法及分子对接技术探析脉管复康片治疗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的机制。方法:通过传统中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)筛选脉管复康片(丹参、鸡血藤、没药、乳香、郁金)活性成分和靶基因。使用人类基因数据库(the human gene database,GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man,OMIM)、药物靶标数据库(therapeutic target database,TTD)、遗传药理学与药物基因组学数据库(pharmacogenetics and pharmacogenomics knowledge base,PharmGKB)、DrugBank疾病数据库获得AS相关基因。使用Cytoscape 3.8.2构建“成分-靶点”网络。使用STRING数据库下载蛋白-蛋白互作网络(protein-protein interactions,PPI)数据,导入Cytoscape,使用CytoNCA插件获取核心靶基因。使用R软件进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析。对活性成分及核心基因做分子对接。结果:从脉管复康片中共筛选出157个活性成分,对应AS靶基因238个,PPI核心靶基因共20个。GO功能富集显示生物学功能主要涉及脂多糖反应、细菌来源分子反应、金属离子反应、氧化应激反应等;KEGG通路富集显示主要涉及流体剪切应力和AS、AGE-RAGE信号通路、PI3K-Akt信号通路等;分子对接结果提示槲皮素、木犀草素、柚皮素、丹参酮ⅡA、刺芒柄花素、甘草查尔酮A与4个核心蛋白JUN、MAPK1、TP53、STAT3结合稳定。结论:脉管复康片可通过槲皮素、木犀草素等活性成分作用于多种信号通路及多个基因靶点治疗AS。

脉管复康片联合糖痹外洗方对糖尿病血管病变的疗效及其机制

目的:建立糖尿病大鼠下肢缺血模型,研究脉管复康片联合糖痹外洗方对糖尿病大鼠血管内皮损伤的疗效及其作用机制。方法:选取50只大鼠中的8只为正常对照组,余下大鼠采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素法建立大鼠糖尿病模型,结扎大鼠左后肢股动脉,建立下肢缺血模型。取造模成功的32只大鼠,随机分为模型组和高、中、低剂量给药组,每组8只。给药21 d后处死大鼠,取其血样及左后肢腓肠肌组织,检测血清中血栓素A2(TXA2)、内皮素(ET)-1、一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)、C反应蛋白(CRP)含量;HE染色观察缺血后肢肌细胞形态;CD31免疫组织化学染色检测术侧腓肠肌微血管形成数量。结果:经给药治疗后,大鼠腓肠肌组织HE染色未见明显萎缩坏死,血管内皮功能趋于正常。与模型组相比,脉管复康片高、中、低剂量组大鼠血清中TXA2水平均显著降低(P<0.01);eNOS水平均显著升高(P<0.001);ET-1水平均有下降,高剂量组最显著(P<0.001);高剂量组NO水平显著上升(P<0.001);高、中剂量组VEGF水平明显上升(P<0.01);免疫组化结果显示,相比于模型组大鼠,脉管复康片高剂量组腓肠肌微血管形成数量显著增加(P<0.01)。结论:脉管复康片联合糖痹外洗方主要通过调节TXA2、ET-1、NO水平,维持血管内皮功能,并增加VEGF的表达,促进微血管新生,最终改善糖尿病后肢缺血。

脉管复康片治疗下肢动脉硬化性闭塞症临床疗效的Meta分析

[目的]系统评价脉管复康片治疗下肢动脉硬化性闭塞症的临床疗效。[方法]计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of Science、Scopus、中国知网(CNKI)、万方(Wanfang data)、维普(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)数据库,搜集脉管复康片治疗下肢动脉硬化性闭塞症的随机对照试验(RCT),检索时限均从建库至2023年1月31日。由2名评价员独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.4软件进行Meta分析。[结果]共纳入11个RCT,包括809例患者。Meta分析结果显示:脉管复康片治疗组的总有效率[RR=1.16,95%CI(1.02,1.32),P=0.0300]高于对照组,间歇性跛行发生率[RR=0.36,95%CI(0.23,0.58),P<0.0001]、静息痛发生率[RR=0.28,95%CI(0.12,0.66),P=0.0040]、截肢率[RR=0.32,95%CI(0.13,0.78),P=0.0100]低于对照组。与对照组相比,脉管复康片能够提高血管踝肱指数[SMD=0.13,95%CI(0.11,0.15),P<0.0001],降低高切黏度[SMD=-0.89,95%CI(-1.46,-0.31),P=0.0030]水平,但未发现低切黏度的差异具有统计学意义[SMD=-1.34,95%CI(-3.43,0.74),P=0.2100]。[结论]当前证据表明,脉管复康片能够改善下肢动脉硬化性闭塞症患者的间歇性跛行、静息痛与截肢发生情况,提高血管踝肱指数,降低高切黏度水平。受纳入研究质量的限制,上述结论尚需开展更多高质量研究予以验证。

脉管复康片抗凝、镇痛及抗炎作用研究

目的:观察脉管复康片抗凝血、镇痛、抗炎作用。方法:分别采用抗凝血实验、醋酸扭体实验、二甲苯致小鼠耳肿胀实验,观察脉管复康片的活血,镇痛以及抗炎作用。结果:2g/kg脉管复康片的凝血时间明显延长,差异显著(P<0.05);2g/kg脉管复康片的15min扭体次数明显减少,差异非常显著(P<0.01);1g/kg与0.5g/kg脉管复康片的15min扭体次数明显减少,差异显著(P<0.05);2g/kg脉管复康片小鼠耳肿胀度明显降低,差异显著(P<0.05)。结论:脉管复康片具有抗凝血、镇痛、抗炎作用。

脉管复康片联合氯吡格雷治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的效果研究

目的研究脉管复康片联合氯吡格雷治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的临床效果。方法100例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者,按照随机数字表法分为氯吡格雷组和两药联合组,各50例。氯吡格雷组患者使用氯吡格雷进行治疗,两药联合组采用脉管复康片联合氯吡格雷治疗。比较两组患者治疗前后心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)]、血清学指标[内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)水平、脑钠肽(BNP)、血管内皮生长因子(VEGF)]水平及心血管不良事件发生情况、治疗效果、不良反应发生情况。结果治疗后,两组患者LVEF大于治疗前,LVESD、LVEDD小于治疗前,且两药联合组患者LVEF大于氯吡格雷组,LVESD、LVEDD小于氯吡格雷组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者ET-1、BNP水平均低于治疗前,NO、VEGF水平高于治疗前,且两药联合组患者ET-1、BNP水平低于氯吡格雷组,NO、VEGF水平高于氯吡格雷组,差异有统计学意义(P<0.05)。两药联合组患者心力衰竭、心源性猝死、心绞痛发生率分别为12.00%、10.00%、4.00%,均低于氯吡格雷组的30.00%、26.00%、16.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。两药联合组患者治疗总有效率90.00%高于氯吡格雷组的72.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论脉管复康片联合氯吡格雷治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病效果显著,可有效改善患者心功能,降低心血管不良事件发生率。

脉管复康片对血栓闭塞性脉管炎大鼠的疗效及对Th1/Th2免疫平衡的调节

目的:观察脉管复康片对血栓闭塞性脉管炎(TAO)大鼠的疗效及对Th1/Th2免疫平衡的调节作用。方法:SPF级雄性Wistar大鼠24只,随机分为假手术组、TAO模型组、脉管复康片组,脉管复康片组给予脉管复康片0.75g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,假手术组与TAO模型组给予等量纯水,观察各组大鼠体质量及脾脏指数,对各组大鼠患肢形态变化进行评级;使用激光多普勒灌注成像仪扫描下肢血流量变化;ELISA检测血清中干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)表达情况;流式细胞术检测脾脏和腹股沟淋巴结组织中Th1、Th2表达;HE染色观察股动脉和股静脉组织损伤;Western Blot检测股动脉中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、TNF-α蛋白表达水平。结果:第14天,与TAO模型组比较,脉管复康片组大鼠体质量显著增加(P<0.01),脾脏指数显著下降(P<0.01),患肢形态变化评级显著降低(P<0.05),患肢血流量显著提高(P<0.01),血清中IFN-γ、TNF-α、IL-4表达水平显著下降(P<0.01),脾脏和腹股沟淋巴结组织中Th1、Th2均显著下降(P<0.01,P<0.05);股动脉组织中VCAM-1、ICAM-1、TNF-α蛋白表达水平显著下降(P<0.01);HE染色显示脉管复康片组大鼠股动脉炎症细胞浸润面积、纤维增生、血栓形成以及股静脉中炎症细胞浸润面积均显著减少(P<0.01)。结论:脉管复康片可改善TAO大鼠股动脉中内皮细胞活化引起的血管炎性损伤、纤维增生以及血栓形成,可能与其调节Th1/Th2免疫平衡有关。

脉管复康片对糖尿病下肢动脉闭塞症患者内皮细胞功能影响的临床研究

目的 观察糖尿病下肢动脉闭塞症（DAO）患者血管内皮细胞功能的变化及脉管复康片干预的作用机制.方法 66例DAO患者按随机表法分为治疗组与对照组,每组33例,分别服用脉管复康片4片/次,3次/d;或通塞脉片4片/次,3次/d,疗程均为8周.观察两组患者治疗后临床症状、体征、光电血流描记、踝/肱比指数以及血液流变学、内皮细胞因子等指标.结果 治疗组在改善临床症状方面优于对照组（P＜0.05）;治疗后两组血黏度、纤维蛋白原均有降低,治疗组比对照组更为显著（P＜0.01）;治疗后在血浆一氧化氮、内皮素-1水平变化方面,治疗组效果优于对照组,有显著性差异（P＜0.01）.结论 脉管复康片可改善DAO患者临床症状,主要是通过调节血管内皮细胞功能,降低血黏度发挥作用。

脉管复康片联合西洛他唑治疗下肢动脉硬化闭塞症的临床研究

目的观察脉管复康片联合西洛他唑片治疗下肢动脉硬化闭塞症的临床疗效。方法选取2019年4月—2020年12月河南中医药大学人民医院(郑州人民医院)收治68例下肢动脉硬化闭塞症患者,根据随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各34例。对照组口服西洛他唑片,1片/次,2次/d。治疗组在对照组治疗的基础上口服脉管复康片,4片/次,3次/d。两组患者治疗8周。观察两组的临床疗效,比较两组的动脉硬化指标、血流动力学指标、血管内皮功能指标。结果治疗后,治疗组的总有效率为88.24%,高于对照组的67.65%(P<0.05)。治疗后,两组踝肱指数(ABI)升高,血管内径扩大,峰值流速降低,血流量增加(P<0.05),且治疗后,治疗组峰值流速低于对照组,ABI、血流量、血管内径高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、细胞沉降率降低(P<0.05),且治疗后,治疗组全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、细胞沉降率低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组内皮素-1(ET-1)、血栓素B2降低,6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、一氧化氮(NO)升高(P<0.05),且治疗后,治疗组ET-1、血栓素B2低于对照组,6-ketoPGF1α、NO高于对照组(P<0.05)。结论脉管复康片联合西洛他唑片治疗下肢动脉硬化闭塞症具有较好疗效,可提高ABI,减轻下肢缺血症状,促进局部血液循环,改善血管内皮功能,有一定的应用价值。