成年大鼠盆神经节神经元的体外培养与鉴定

目的:探索成年大鼠盆神经节(MPG)神经元的体外培养、鉴定的实用方法。方法:分别利用植块培养法、分离细胞培养法对成年大鼠MPG神经元进行体外培养,应用免疫组化以神经微丝单克隆抗体(NF-200)对MPG神经元进行鉴定。结果:通过上述两种方法均能成功培养出生长状态良好的MPG神经元,细胞呈NF-200反应阳性。结论:本实验成功建立了成年大鼠MPG神经元的体外培养方法,可作为神经科学研究的重要手段。

盆神经节在前列腺炎导致排尿功能障碍中的作用及其机制

目的探讨盆神经节在前列腺炎导致排尿功能障碍中的作用及其机制。方法将22只雄性SD大鼠随机数字法分为两组:前列腺炎模型组(n=10)、对照组(n=12)。通过前列腺内注射1%无菌角叉菜胶溶液建立大鼠的前列腺炎模型,检测前列腺炎模型组和对照组的尿动力学指标的变化。利多卡因阻滞盆神经节后检测前列腺炎模型大鼠的尿动力学参数。采用膀胱壁内注射荧光金(FG)前列腺内注射快蓝(FB)行逆行神经追踪双标技术检测盆神经节内是否存在同时支配膀胱和前列腺的神经元。组间比较采用单因素方差分析。结果盆神经节切片内科观察到FG-FB双标神经元,证实盆神经节内存在同时支配膀胱和前列腺的神经元。大鼠的尿动力学结果显示,前列腺炎组阻滞前膀胱容量(1.01±0.03)ml大于正常组膀胱容量(1.00±0.02)ml及前列腺炎组阻滞后膀胱容量(1.00±0.02)ml,差异无统计学意义(F=0.318,P>0.05),前列腺炎组阻滞后大鼠排尿频率(12.6±0.13)次/小时低于前列腺炎组阻滞前大鼠排尿频率(24.55±2.14)次/小时,差异有统计学意义(F=502.622,P<0.05)。前列腺炎组阻滞后大鼠不稳定收缩次数(1.5±0.5)次/小时少于前列腺炎组阻滞前大鼠不稳定收缩次数(22.3±2.6)次/小时,差异有统计学意义(F=160.175,P<0.05)。结论前列腺内注射无菌角叉菜胶溶液可成功建立前列腺炎大鼠模型。盆神经节内存在同时支配膀胱和前列腺的神经元,盆神经节在前列腺炎导致的排尿功能障碍中起重要的调节作用。

过氧化氢诱导的大鼠盆腔神经节体外损伤模型的构建

目的探索成年大鼠盆腔神经节(MPG)体外损伤模型的构建方法,为盆腔神经损伤相关疾病的基础研究提供有效模型。方法选取8周成年SD大鼠,处死后获取MPG离体组织,以RPMI-1640培养基进行体外培养,1周后分别加入0、100、200、300、400、500μmol/L不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2)),诱导MPG氧化应激损伤。免疫组织化学法检测神经标志物表达、ELISA法检测神经营养因子水平,并进行外周神经丝生长长度的比较,确定合适的损伤诱导浓度。结果大鼠MPG离体培养3 d后,可见组织贴合,有神经丝样组织生长;神经丝蛋白标志物NF-H染色阳性,证实为神经组织。加入H_(2)O_(2)后,随着浓度增加,MPG组织形态出现不同程度破碎裂解,神经标志物S100β表达下调,神经丝生长长度受到抑制;同时,培养基脑源性神经营养因子及神经生长因子表达量逐渐下降。结论使用RPMI-1640培养基培养,并以200μmol/L H_(2)O_(2)诱导后,可以构建稳定的成年SD大鼠MPG体外损伤模型。