卡瑞利珠单抗联合伊立替康治疗胃癌效果及对血清BARD1、STAT1影响

目的探讨卡瑞利珠单抗联合伊立替康治疗胃癌的效果及对血清乳腺癌1号基因相关环指蛋白(BARD1)和转录活化蛋白1(STAT1)的影响。方法选取2016年4月—2021年11月收治的胃癌120例,按照治疗方法不同将其分为观察组和对照组2组各60例。观察组给予卡瑞利珠单抗联合伊立替康治疗,对照组给予卡瑞利珠单抗治疗。比较2组治疗后临床效果,治疗后1年生存和复发情况,治疗前后血清肿瘤标志物、免疫功能指标、血清BARD1和STAT1,以及治疗期间毒副作用情况。结果治疗后,观察组总有效率(85.0%,51/60)高于对照组(70.0%,42/60)(P<0.05)。治疗后1年,观察组生存期长于对照组,复发率低于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗后,CD4+、CD4+/CD8+和STAT12组高于治疗前,且观察组高于对照组;血清糖类抗原199、癌胚抗原、CD8+、BARD12组低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗期间,2组毒副作用总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论卡瑞利珠单抗联合伊立替康治疗胃癌患者临床效果较好,可降低血清肿瘤标志物水平,改善免疫功能,还可下调BARD1,上调STAT1,且安全性较好。

肺癌组织环指蛋白181、转移相关基因1、血管内皮生长因子C表达及与患者临床病理特征和预后相关性分析

目的:研究肺癌组织环指蛋白181(RNF181)、转移相关基因1(MTA1)及血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达意义。方法:选择收治的100例肺癌患者,获取肺癌组织和正常肺组织,通过免疫组化法检测RNF181、MTA1及VEGF-C表达情况并进行比较。分析上述三项蛋白表达和患者病理特征的关系。此外,将所有受试者按照生存状况的差异分为死亡组及存活组,比较两组RNF181、MTA1及VEGF-C表达情况。结果:肺癌组织RNF181阳性率为24.00%,低于癌旁正常组织的75.00%,而MTA1、VEGF-C阳性率分别为73.00%、69.00%,高于癌旁正常组织的25.00%、33.00%(均P<0.05)。低分化、Ⅲ-Ⅳ期与淋巴结转移患者的RNF181表达均低于中高分化、Ⅰ-Ⅱ期与无淋巴结转移;而MTA1及VEGF-C表达均高于中高分化、Ⅰ-Ⅱ期与无淋巴结转移(均P<0.05)。死亡组RNF181表达低于存活组,而MTA1及VEGF-C表达高于存活组(均P<0.05)。结论:肺癌组织RNF181异常低表达,而MTA1及VEGF-C异常高表达,三项蛋白表达和分化程度、TNM分期、淋巴结转移以及预后均密切相关。

人Makorin环指蛋白1基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

目的构建人Makorin环指蛋白1(MKRN1)基因shRNA真核表达质粒,并检测其对HEK293细胞MKRN1基因表达的影响。方法设计并合成特异性针对人MKRN1基因的小干扰片段,定向克隆至带有卡那霉素抗性基因和绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pGenesil-1中,对重组质粒进行酶切鉴定及DNA序列分析,并用脂质体将其转染到HEK293细胞中,观察其对细胞MKRN1基因mRNA转录和蛋白表达水平的影响。结果经酶切鉴定和序列分析证明,3个人MKRN1基因shRNA真核表达质粒及其阴性对照质粒构建正确,转染HEK293细胞后,3个shRNA真核表达质粒在mRNA水平对细胞MKRN1基因的抑制率分别为52.4%、26.2%和42.9%,在蛋白水平对细胞MKRN1基因的抑制率分别为69.1%、27.9%和50.0%。结论已成功构建了人MKRN1基因的shRNA真核表达质粒,为进一步研究MKRN1基因的功能及其与人端粒酶逆转录酶的关系奠定了基础。

RNA干扰UHRF1基因表达对食管癌细胞生物学行为的影响

目的:通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1)基因表达,探讨沉默UHRF1基因对食管癌TE-1细胞生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学法检测食管癌组织及正常食管组织中UHRF1蛋白的表达水平,以证实UHRF1在食管癌组织中过表达;以慢病毒感染的方法将UHRF1基因的shRNA转入食管癌TE-1细胞株,采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染UHRF1-shRNA重组表达载体后TE-1细胞中UHRF1mRNA和蛋白的表达水平;并分别以MTT法、FCM法和体外侵袭实验检测UHRF1基因沉默对TE-1细胞增殖、周期、凋亡和侵袭能力的影响。结果:UHRF1在正常食管组织中不表达或低表达,在食管癌组织中过表达(P<0.01);UHRF1-shRNA转染后,TE-1细胞中UHRF1mRNA和蛋白表达水平显著降低;UHRF1基因沉默可使TE-1细胞增殖及体外侵袭能力明显下降,G0/G1期细胞增多,凋亡增加(P<0.05)。结论:沉默UHRF1基因可降低食管癌细胞的增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡,提示UHRF1在食管癌发生和发展过程中发挥重要作用。