晶状体损伤对视神经损伤后RGCs的保护作用及其机制

背景大鼠Miiller细胞提取液能够促进离体培养的视网膜神经节细胞（RGCs）存活及轴突的再生，伴晶状体损伤的视神经外伤眼RGCs存活率提高，但Milller细胞和晶状体损伤在促进RGCs存活方面的关系鲜见报道。目的探讨伴晶状体损伤的视神经外伤眼Mtiller细胞对RGCs存活的促进作用及其机制。方法清洁级成年Wistar大鼠48只按随机数字表法随机分为伪手术组、视神经损伤组、晶状体联合视神经损伤组。伪手术组大鼠手术中暴露但不损伤视神经，视神经损伤组大鼠行视神经横断伤，晶状体联合视神经损伤组行视神经横断伤联合晶状体针刺伤，并导致晶状体混浊。术后7d及14d各组分别取8只大鼠处死后制备视网膜标本。采用苏木精一伊红染色观察各组大鼠视网膜和RGCs的形态学改变，采用免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜内核层胶质纤维酸性蛋白（GFAP）标记的Muller细胞，光学显微镜下计数各组大鼠RGCs数量及GFAP阳性标记的Muller细胞数量。结果术后7d及14d，伪手术组大鼠RGCs的数量分别为（52．98±1．90）个／高倍视野和（51．81±3．09）个／高倍视野，差异无统计学意义（t=0．910，P=0．378）；术后14d视神经损伤组大鼠RGCs数量为（22．67±1．94）个／高倍视野，明显少于术后7d的（36．61±1．69）个／高倍视野，差异有统计学意义（t=15．312，P=0．000）；术后14d晶状体联合视神经损伤组RGCs数量为（35．69±1．80）个／高倍视野，明显少于术后7d的（50．76±2．77）个／高倍视野，差异有统计学意义（t=12．920，P=0．000）。术后7d及14d，晶状体联合视神经损伤组存活的RGCs数量均多于视神经损伤组，差异均有统计学意义（7d：t=102．840，P=0．000；14d：t=164．020，P=0．000）；术后14d晶状体联合视神经损伤组存活的RGCs：牧量少于伪手术组，差异有统计学意义（t=187．04，P=0．034）。术后7d及14d，伪手术组大鼠视网膜内核层均未见GFAP阳性标记的Muller细胞；视神经损伤组大鼠内核层GFAP阳性标记Muller细胞数量分别为（29．38＋2．04）个／高倍视野和（19．07±2．14）个／高倍视野，差异有统计学意义（t=-9．868，P=0．000）。晶状体联合视神经损伤组大鼠内核层GFAP阳性标记的Muller细胞数量分别为（48．96±2．80）个／高倍视野和（46．73±1．50）个／高倍视野，差异无统计学意义（t=1．987，P=0．067）。术后7d及14d，晶状体联合视神经损伤组大鼠内核层GFAP阳性Muller细胞数量均较视神经损伤组增多，差异均有统计学意义（7d：t=-15．997，P=0．000；14d：t=-29．938，P=0．000）。结论在视神经损伤合并晶状体刺伤时，晶状体损伤可诱导Muller细胞活化，进而促进视神经损伤后RGCs的存活。