红肉苹果(Malus pumila var.niedzwetzkyana)MpMYB30基因的克隆及表达载体的构建

MYB转录因子是植物转录因子中最大的家族之一,在转录调节中起着多方面的重要作用。实验利用RACE技术从野生红肉苹果(Malus pumila var.niedzwetzkyana Schneid.)中获得了MpMYB30的全长序列,利用生物信息学的方法对其蛋白进行了分析和预测并将其连接到pCAMBIA-S1300+植物表达载体中。结果表明,该基因全长为1661bp,推导的氨基酸序列经系统发育分析与葡萄MYB30及蓖麻MYB基因相似性最高,命名为MpMYB30,其N端含有2个约55个氨基酸组成的MYB特征结构域。该基因推导的MpMYB30蛋白的分子式为C1790H2794N538O584S12,相对分子质量为41579.8ku,等电点为6.30,不存在信号肽和跨膜区域,蛋白质结构以α螺旋为主。利用XbalⅠ和SacⅠ对重组质粒进行酶切,并将其连接到pCAMBIA-S1300+载体上,通过抗性筛选和PCR酶切检测,证实了MpMYB30基因已经构建到植物表达载体pCAMBIA-S1300+上。

红肉苹果的组织培养快繁技术

[目的]建立红肉苹果的高效植株再生体系。[方法]以红肉苹果的茎尖和带腋芽的茎段为外植体,通过组织培养试验筛选出最佳的灭菌时间、基础培养基、增殖培养基和生根培养基。[结果]随着消毒时间的延长,外植体的污染率明显下降,但外植体受到的伤害显著增加。用0.1%HgCl2灭菌5min的外植体生长正常,污染率仅为3.3%。在增殖培养基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L和MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L中,每个外植体平均增殖不定芽4.1、6.8和3.3个。在生根培养基1/2MS+0.1mg/LIBA+0.1mg/LNAA、1/2MS+0.2mg/LIBA+0.2mg/LNAA和1/2MS+0.5mg/LIBA+0.5mg/LNAA上幼苗的生根率分别为56.7%、96.7%和83.3%。[结论]该研究为红肉苹果的快速离体扩繁和工厂化育苗以及园林应用奠定了良好的基础。

红肉苹果MpMYBPA1的克隆及表达分析

利用RACE和电子克隆技术相结合的方法从野生红肉苹果(Malus pumila var.niedzwetzkyana Schneid)中克隆了1个MYB类转录因子的全长序列,利用生物信息学方法对其进行分析,同时进行了亚细胞定位分析以及表达特性的研究。结果表明:该基因全长为1 020 bp,编码340个氨基酸;其核苷酸序列与葡萄MYBPA1同源性最高,命名为MpMYBPA1,其N端含2个约有55个氨基酸组成的MYB特征结构域。亚细胞定位分析结果表明MpMYBPA1蛋白定位在细胞核中。荧光定量PCR结果表明:MpMYBPA1基因在根、茎、叶、果皮中均有表达,果皮中表达量最大。在20℃处理4 d后该基因的表达量得到了上调,而在30℃高温条件下,该基因的表达上调不明显,说明低温有利于该基因的表达,并且该基因受ABA调控。推测MpMYBPA1基因可能参与苹果的着色过程。

红肉苹果在北方园林中的应用

随着城乡园林绿化建设的快速发展,园林树木的选择和应用越来越受到重视,不断有新品种被推出。红肉苹果有着诸多优良的观赏特性,作为园林绿化新兴树种,逐渐被关注。而红肉苹果在城市园林绿化中的科学合理的应用,发挥最大观赏性,是北方园林景观设计中应该重点考虑的问题。通过对该树种形态特征和生态习性等方面调查,结合城市不同绿地植物配置特点进行了初步探索,为以后在北方园林绿化中较好的运用和发挥生态景观作用提供参考。