目的:研究哺乳动物雷帕霉索靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号在幼鼠癎性发作后的表达变化。方法:海人藻酸(KA)诱导幼鼠癎性发作,根据疝性发作后不同的时间点(1h、3h、16h、24h、3d、5d、1w、2w、6w)进行取材...目的:研究哺乳动物雷帕霉索靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号在幼鼠癎性发作后的表达变化。方法:海人藻酸(KA)诱导幼鼠癎性发作,根据疝性发作后不同的时间点(1h、3h、16h、24h、3d、5d、1w、2w、6w)进行取材,从大脑中分离KA注射侧海马组织,提取全蛋白进行westernblot检测观察癎性发作后mTOR信号通路活化的标志物核糖体蛋白56(p-S6)蛋白的表达变化。免疫组织化学检测海马区P-S6免疫阳性细胞的表达。结果:KA海马内注射1h、3h、16h、24h,3d,5d,1w,2w,6w大鼠海马组织进行westernblot检测,发现在急性期P-S6的表达量呈现持续升高的表达变化。KA致癎1w后,海马区p-S6阳性细胞表达相对于手术对照组明显增高(76±12VS25±5)。在大鼠大脑皮层神经元亦可见到致癎后大量表达的p-S6阳性神经元(88±13 VS 15±3)。结论:mTOR信号活化标志物p-S6蛋白在KA诱导幼鼠癎性发作后表达明显增加,抑制mTOR信号的异常活化或许成为预防癫癎形成的新靶点。展开更多
目的研究慢性铅暴露对小鼠脑海马组织雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达的影响,探讨roTOR在慢性铅暴露所致小鼠海马神经元学习记忆功能障碍中的作用。方法5.6周龄小鼠交配后,铅暴露组仔鼠通过胎盘、乳汁和...目的研究慢性铅暴露对小鼠脑海马组织雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达的影响,探讨roTOR在慢性铅暴露所致小鼠海马神经元学习记忆功能障碍中的作用。方法5.6周龄小鼠交配后,铅暴露组仔鼠通过胎盘、乳汁和饮水饲醋酸铅2.4,4.8和9.6mmol·L^-1,连续42d。对照组鼠饮用自来水。第42天检测血及脑铅浓度,weslem印迹法检测脑海马总量roTOR(t—mTOR)及磷酸化roTOR(p—mTOR)的表达。结果各慢性染铅组小鼠血铅和脑铅含量均明显高于对照组(P〈0.01),升高的程度与饮用水的铅浓度呈正相关。慢性染铅组小鼠大脑海马组织P—mTOR表达水平呈下降趋势,各染铅组p—mTOR表达与对照组比较,差异有统计学意义,并具有浓度效应关系(P〈0.05)。p-mTOR表达与血、脑铅浓度呈负相关(r=-0.82,P〈0.01),铅对小鼠大脑皮层神经元t—mTOR的磷酸化没有影响。结论p-mTOR蛋白的表达量随着铅暴露的浓度升高而降低,与铅致小鼠学习记忆功能减退有关。展开更多
文摘目的:研究哺乳动物雷帕霉索靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号在幼鼠癎性发作后的表达变化。方法:海人藻酸(KA)诱导幼鼠癎性发作,根据疝性发作后不同的时间点(1h、3h、16h、24h、3d、5d、1w、2w、6w)进行取材,从大脑中分离KA注射侧海马组织,提取全蛋白进行westernblot检测观察癎性发作后mTOR信号通路活化的标志物核糖体蛋白56(p-S6)蛋白的表达变化。免疫组织化学检测海马区P-S6免疫阳性细胞的表达。结果:KA海马内注射1h、3h、16h、24h,3d,5d,1w,2w,6w大鼠海马组织进行westernblot检测,发现在急性期P-S6的表达量呈现持续升高的表达变化。KA致癎1w后,海马区p-S6阳性细胞表达相对于手术对照组明显增高(76±12VS25±5)。在大鼠大脑皮层神经元亦可见到致癎后大量表达的p-S6阳性神经元(88±13 VS 15±3)。结论:mTOR信号活化标志物p-S6蛋白在KA诱导幼鼠癎性发作后表达明显增加,抑制mTOR信号的异常活化或许成为预防癫癎形成的新靶点。
文摘目的研究慢性铅暴露对小鼠脑海马组织雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达的影响,探讨roTOR在慢性铅暴露所致小鼠海马神经元学习记忆功能障碍中的作用。方法5.6周龄小鼠交配后,铅暴露组仔鼠通过胎盘、乳汁和饮水饲醋酸铅2.4,4.8和9.6mmol·L^-1,连续42d。对照组鼠饮用自来水。第42天检测血及脑铅浓度,weslem印迹法检测脑海马总量roTOR(t—mTOR)及磷酸化roTOR(p—mTOR)的表达。结果各慢性染铅组小鼠血铅和脑铅含量均明显高于对照组(P〈0.01),升高的程度与饮用水的铅浓度呈正相关。慢性染铅组小鼠大脑海马组织P—mTOR表达水平呈下降趋势,各染铅组p—mTOR表达与对照组比较,差异有统计学意义,并具有浓度效应关系(P〈0.05)。p-mTOR表达与血、脑铅浓度呈负相关(r=-0.82,P〈0.01),铅对小鼠大脑皮层神经元t—mTOR的磷酸化没有影响。结论p-mTOR蛋白的表达量随着铅暴露的浓度升高而降低,与铅致小鼠学习记忆功能减退有关。