川西亚种猕猴Mamu-A^＊01等位基因的筛查

目的对川西亚种猕猴Mamu-A^＊01等位基因的存在情况进行初步筛查。方法随机筛选2007年出生的猕猴101只，股静脉采取抗凝血200μl，提取基因组。根据Mamu．A^＊01等位基因的特异性序列设计引物，利用序列特异性引物PCR（PCR—SSP）筛查101只猕猴Mamu—A^＊01等位基因的存在情况。结果从101只猕猴中筛选到6只携带Mamu—A^＊01等位基因的猕猴，但扩增所得到的序列与印度猕猴对应序列的同源性只有96％。结论在川西亚种猕猴群内存在Mamu—A^＊01类似等位基因，但与印度猕猴有一定的差异，其作用和功能需要进一步的研究。

中国恒河猴Mamu-A^＊01基因筛查及其对抗原肽p11C的特异性CTL反应

目的筛查中国恒河猴Mamu-A*01基因,比较中国恒河猴和印度恒河猴的Mamu-A*01基因序列和功能是否相同。方法PCR方法检测128只中国恒河猴,用特异性引物扩增Mamu-A*01基因,将PCR扩增后的产物克隆测序后与印度恒河猴的Mamu-A*01基因进行同源比对;酶联免疫斑点检测(ELISPOT)方法分别检测5只Mamu-A*01基因阳性和5只阴性恒河猴针对SIV、SHIV抗原肽p11C的特异性CTL反应。结果共筛查出5只Mamu-A*01基因阳性恒河猴(3.91%),经测序分析后与印度恒河猴的同源性可达99.1%。这5只均为SIV/SHIV感染恒河猴,其中四只SIV感染的猴的ELISPOT结果显示针对p11C的高频CTL反应,斑点数在500-1400/106PBMCs之间,而另1只SHIV感染的恒河猴及5只阴性猴没有斑点出现。结论中国恒河猴含有Mamu-A*01基因,基因频率有区域性差异,中国恒河猴的Mamu-A*01可提呈特异性抗原肽p11C。

恒河猴Mamu-A^＊01基因与SIV／SHIV感染相关的研究进展

SIV/SHIV感染的恒河猴是研究艾滋病及艾滋病药物筛选、疫苗评价较理想的动物模型。MHC在细胞免疫中起着关键作用,研究表明,MHC-I类分子的多态性与SIV/SHIV感染者的疾病进展有着明显的关联作用,Mamu-A*01是恒河猴中的一种MHC-I类分子,它可以呈递特定的病毒蛋白片段到细胞的表面,从而激发CTL反应。国外发现Mamu-A*01阳性的猴艾滋病恒河猴会出现疾病进展缓慢,存活时间长等特征。本文就恒河猴Mamu-A*01基因与SIV/SHIV感染相关的研究进展做一综述,以期进一步加深对MHC在疫苗研究中的作用的了解,并促进更行之有效地对HIV/AIDS疫苗进行评价。

乙型肝炎表面抗原阳性孕妇及其新生儿人类TH01基因遗传多态性

目的了解乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性孕妇及其新生儿群体人类(HUM)TH01的遗传多态性,获得这类群体相应多态位点的遗传学数据。方法非抗凝血样采自123对无血缘关系的HBsAg阳性孕妇及其新生儿群体,蛋白酶K法提取模板DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增模板DNA后,聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳,银染显色分析。结果HBsAg阳性孕妇群体HUMTH01基因座观察到6个等位基因,等位基因频率为TH01*6=0.1138、TH01*7=0.2439、TH01*8=0.0732、TH01*9=0.4472、TH01*9.3=0.0691及TH01*10=0.0610;HBsAg阳性孕妇新生儿观察到6个等位基因,等位基因频率为TH01*6=0.0732、TH01*7=0.2398、TH01*8=0.0894、TH01*9=0.4797、TH01*9.3=0.0813及TH01*10=0.0366。结论HBsAg阳性孕妇及其新生儿群体HUMTH01的等位基因多态性分布均符合哈温(Hardy-Weinberg)平衡定律,且两群体的遗传多态性分布差异无显著性,与中国汉族TH01等位基因分布差异无显著性。

基因座TH01等位基因峰高极不均衡1例分析

1材料和方法1.1简要案情本实验室在日常检案工作中,通过一起强奸致孕案件的检验发现受害人血痕样本STR基因座TH01等位基因检出峰高极不均衡的现象,其分型易误判为纯合子。经受害人同意采集其毛发,口腔拭子进行检验,两者检验结果却显示基因座TH01等位基因峰高均衡。另外,每间隔半年重新采集受害人上述各样本进行复核,后续2次采样检测结果均与第1次相同。

HLA-B*58:01與別嘌醇皮膚不良反應關聯性研究

目的了解鏡湖醫院病人檢測HLA-B*58:01等位基因情況,以及與别嘌醇誘導的皮膚不良反應的相關性。方法採用回顧性分析方法,調查2021年11月~2022年6月開立HLA-B*58:01基因檢驗項目患者的藥物過敏史及用藥史等情況,應用統計軟件進行數據處理和分析。結果期間接受檢驗病人131例,21例(16%)檢驗結果為陽性。曾服用别嘌醇的病人中HLA-B*58:01基因陽性組發生皮膚不良反應3例(50%),HLA-B*58:01陰性組只有2例(3.6%),差異具有統計學意義(P<0.05)。結論檢測HLA-B*58:01等位基因攜帶率16%,HLA-B*58:01等位基因與别嘌醇所致皮膚不良反應具有顯著相關性,建議在開始使用别嘌醇之前應先進行檢測。並且使用較低初始劑量,用藥期間對腎功能進行評估,以盡量減低嚴重皮膚不良反應發生的風險。

cisAB基因型与表型分析2例

目的对父子(先证者1,先证者2)2例ABO疑难血型标本鉴定血清型和基因型。方法用血清学方法检测标本ABO血清型,用ABO基因亚型检测试剂盒检测基因型,测序法对ABO基因的第6、7外显子测定序列。结果血清学结果显示,先证者1红细胞上具有高凝集强度的A2抗原、H抗原和弱凝集强度的B抗原,血浆中含有弱凝集强度的抗-B,初步判定为A2Bx型;先证者2红细胞上具有高凝集强度的B抗原和弱凝集强度的A2抗原、H抗原,血浆中含有弱凝集强度的抗-A,初步判定为A2B型。基因亚型分型结果显示,先证者1为AO2型,先证者2为AB型。直接测序结果显示,先证者1第6外显子为261delG和A297G,第7外显子为C467T,T646A,G681A,C771T,G803C,G829A;先证者2第6外显子为A297G,第7外显子为C467T,C526G,C657T,G703A,C796A,C803C,G930A。克隆测序法显示2名先证者均具有CisAB01等位基因,先证者1同时具有O2等位基因,先证者2同时具有B101等位基因。结论由于与cisAB杂合的等位基因不同,造成均具有cisAB01等位基因的2名先证者在血清学上的显著差异。

新等位基因HLA-B＊13：01：06的核苷酸序列分析

目的对1例HLA新等位基因进行确认并分析其核苷酸序列。方法采用Qiagen试剂盒提取样本DNA，PCR-测序分型技术获得HLA-A、HLAB、HLA-C、HLA-DRBl的核苷酸序列及HLA高分辨率分型结果，并分析HLA-B位点与HLA-B＊13：01：01等位基因序列的异同。结果HLA-B位点中发现1个与HLA-B＊13：01：01核苷酸序列高度相似的新等位基因，与HLA-B＊13：01：01相比，该等位基因第2外显子的219位碱基出现G→A点突变，49位密码子由GCG→GCA，两者编码的氨基酸相同。结论该基因序列为新的HLA等位基因，并被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-B＊13：01：06。

TH01基因座等位基因丢失1例

1案例资料 2010年，本市发生1起入室盗窃案，现场提取血痕2份、烟蒂1枚。采用Chelex法提取检材DNA，使用Identifiler试剂盒10μL体系在AB9700型扩增仪上进行扩增；扩增产物经AB3130型遗传分析仪检测，GeneMappedDV3．2软件进行分析。结果血痕、烟蒂为同一个体所留，其中TH01基因座为纯合子（7）。之后在“全国公安机关DNA数据库应用系统”比中违法犯罪人员张某（除采用PowerPlex16HS试剂盒检验外，其它检验方法同前，12个STR基因座分型相同，容差半对），但TH01基因座分型显示为杂合子（7／10）。

经免疫学检查确诊的氨苯砜综合征一例

患者,男,28岁。因发热4周全身皮肤潮红、脱屑3周于2004年8月入院。患者入院9周前因寻常型银屑病给予雷公藤、氨苯砜、罗红霉素、复方甘草酸铵等药物治疗。4周前出现发热。3周前躯干四肢皮肤红斑、淋巴结肿大、肝功异常。外院给予糖皮质激素、抗菌素治疗,皮疹逐渐加重。入院时查体:T 37.7℃,颈、腋、腹股沟数个淋巴结肿大,全身皮肤弥漫性潮红、脱屑。实验室检查示:丙氨酸氨基转移酶(ALT)384 U/L、门冬氨酸氨基转移酶(AST)152 U/L、血白蛋白(ALB)31.2 g/L、总胆红素140.2μmol/L、直接胆红素107.7μmol/L。诊断为红皮病型药疹、药物性肝炎。停用氨苯砜等可疑药物后,给予糖皮质激素、营养支持以及对症治疗47天后痊愈出院。出院13年后随访,检测患者HLA-B*13:01基因阳性,采用氨苯砜体外刺激外周血单一核细胞IL-5酶联免疫斑点实验阳性。最终确诊为氨苯砜综合征。

15个STR位点在潮汕地区人群的群体遗传学分析

〔目的〕分析潮汕地区汉族人群15个STR位点遗传多态性。〔方法〕利用五色荧光标记多重PCR和全自动毛细管电泳技术对STR位点进行基因分型。〔结果〕统计分析346例无关个体15个位点的基因频率,所有位点均符合Hardy-Weinberg平衡。经计算,FGA、D2S1338和D18S5 1属于高度多态性位点,D8S1179、D2 1S11、D19S4 33、D13S317、vWA、D5S818和D16S5 39属于中高度多态性位点,而D37S82 0、CSF1PO、D3S135 8、TH0 1和TPOX多态性方面相对稍差。15个位点个体识别能力累积值>0 .999999999,三联体非父排除概率的累积值>0 .99999、二联体非父排除概率>0 .999,平均杂合度为0 .777,累积偶合率为1.2 6×10 -17。〔结论〕获得的潮汕地区汉族人群15个STR位点的等位基因频率,为将这些位点成功应用于本地区的亲子鉴定和个体识别提供依据。

一例cisAB血型的鉴定及家系分析

目的对一例血清学检测疑为cisAB型的样本进行基因分型和家系调查,以发现ABO亚型的分子基础及遗传规律。方法采用血型血清学方法对所有标本进行ABO血型鉴定,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增ABO基因第6和7外显子并对扩增产物进行测序分析。结果该样本的基因型为ABO^*cisAB.01/O.01.02,该家系调查中发现其它4位成员的血清学结果正反定型结果不符,但血型学特征各有差异;测序结果发现均携带有ABO^*cisAB.01基因。结论ABO^*cisAB.01基因能导致A/B抗原的弱表达,并能稳定遗传。血型血清学正反定型不符的标本,可采用分子生物学方法进行检测,辅助鉴定ABO血型。

母胎细胞转运与乙型肝炎病毒宫内感染关系的研究

目的探讨母胎细胞转运与乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的关系。方法用STRPCR、AsPCR及heminPCR技术扩增HBsAg阳性孕妇及其新生儿外周血中胎儿DNA及母亲DNA,通过检测TH01、GSTM1、ACE等位基因确定母胎细胞转运与胎母细胞转运。采用巢式病例对照研究方法分析母胎细胞转运与HBV宫内感染的关系。结果以GSTM1、ACE基因多态性判定母亲源性或胎儿源性等位基因,42对信息病例中有26例新生儿发生了母胎细胞转运(61.90%,26/42);40对信息病例中有32例发生了胎母细胞转运(80.00%,32/40);10对母胎发生了双向转运。统计分析显示母胎细胞转运与HBV宫内感染有关联,胎母细胞转运与HBV宫内感染无关联,母胎细胞转运与胎母细胞转运无关。母胎细胞转运、孕妇PBMCHBVDNA阳性是HBV宫内感染的危险因素,二者未显示交互作用;母胎细胞转运、孕妇PBMCHBVDNA阳性与新生儿PBMCHBV感染有关,两因素间亦未显示交互作用。结论母胎之间存在细胞转运,母胎细胞转运是HBV宫内感染的危险因素,这可能是对HBV宫内感染途径的补充。