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Reading man皮瓣修复术治疗皮肤缺损的疗效观察
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作者 王鸣 严炜 +3 位作者 汤由之 朱喆辰 史京萍 马秀云 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期557-561,共5页
目的:探讨Reading man皮瓣修复术在全身不同部位皮肤缺损及其预防瘢痕增生的临床疗效。方法:回顾性分析2021年1月—2023年10月该科应用Reading man皮瓣修复术治疗全身不同部位皮肤软组织缺损的20例患者临床资料。结果:所有患者皮瓣均成... 目的:探讨Reading man皮瓣修复术在全身不同部位皮肤缺损及其预防瘢痕增生的临床疗效。方法:回顾性分析2021年1月—2023年10月该科应用Reading man皮瓣修复术治疗全身不同部位皮肤软组织缺损的20例患者临床资料。结果:所有患者皮瓣均成活。术后随访时间为3~24个月,所有皮瓣血运良好,色泽红润,质地柔软,外观适宜,局部皮肤张力较低,手术切口瘢痕增生不明显,切口周围软组织无明显形变,周围关节活动度正常。所有患者均恢复良好,疗效满意。结论:Reading man皮瓣特有的设计可以很好地解决全身多部位较大的皮肤软组织缺损,尤其在术中可以最大限度地减少正常皮肤的切除,术后外观、功能及皮肤瘢痕增生均有较满意的表现,且不存在自体皮移植带来的供皮区损伤。 展开更多
关键词 Reading man皮瓣 皮瓣血运 张力 瘢痕增生
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大口黑鲈弹状病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:1
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作者 孔明慧 梁红茹 +5 位作者 李宁求 林强 牛银杰 罗霞 马宝福 付小哲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期379-384,共6页
为建立快速、敏感的大口黑鲈弹状病毒(MSRV)流行株Taq Man荧光定量PCR (qPCR)方法,本研究采用NCBI分析MSRV流行株N基因的保守序列,设计特异性引物和Taq Man探针,以构建的并经PCR和测序鉴定正确的重组质粒标准品p MD18-MSRV-N为模板,通... 为建立快速、敏感的大口黑鲈弹状病毒(MSRV)流行株Taq Man荧光定量PCR (qPCR)方法,本研究采用NCBI分析MSRV流行株N基因的保守序列,设计特异性引物和Taq Man探针,以构建的并经PCR和测序鉴定正确的重组质粒标准品p MD18-MSRV-N为模板,通过优化各反应条件初步建立MSRV的Taq Man q PCR检测方法。结果显示,建立的Taq Man q PCR方法标准曲线的R2为0.9906,质粒标准品在6.79×10^(8)拷贝/μL~6.79×10^(2)拷贝/μL范围内与Ct值均存在较好的线性关系。采用该方法检测MSRV及相关病毒,评估该方法的特异性,结果显示,该方法可以特异性检测MSRV,而草鱼出血病病毒、神经坏死病毒、鲤春病毒血症病毒、大口黑鲈双RNA病毒、鳜蛙虹彩病毒、传染性脾肾坏死病毒、石斑鱼虹彩病毒、大口黑鲈蛙虹彩病毒等8种常见鱼类病毒检测结果均为阴性;采用建立的方法检测不同浓度的质粒标准品(6.79×10^(8)拷贝/μL~6.79×10^(1)拷贝/μL),评估该方法的敏感性,结果显示,该方法的检测限为6.79×10^(2)拷贝/μL,比文献中的常规PCR方法敏感1 000倍;以不同批次或同一批次提取的不同浓度的质粒标准品作为模板,分别利用该方法检测,评估该方法的重复性,结果显示,该方法批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%。采用该方法和文献中的常规PCR同时检测71份临床发病的大口黑鲈、鳜鱼、鲮鱼组织样品,结果显示阳性率为16.9%(12/71),阴性率为83.1%(59/71),且阳性样品均是从发病大口黑鲈的组织样品中检测到,而发病的鳜鱼、鲮鱼组织样品中均未检测到该病毒;常规PCR方法的阳性率为9.9%(7/71),阴性率为90.1%(64/71),二者的总符合率为93.0%。本研究建立的MSRV Taq Man q PCR方法特异性强、敏感性高、重复性和准确性均较好,可用于大口黑鲈临床样品的检测,为MSRV的快速检测提供了可行的技术手段。 展开更多
关键词 大口黑鲈弹状病毒 Taq man荧光定量PCR N基因
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鸡毒支原体 Taq Man实时荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 孙宇 苗立中 +6 位作者 程立坤 赵家磊 赵修报 沈志强 王敬茹 李书光 余燕 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期64-68,共5页
为快速检测鸡毒支原体,根据鸡毒支原体的保守基因设计特异性引物和Taq Man探针,建立鸡毒支原体Taq Man实时荧光定量PCR方法并分析鸡毒支原体培养过程中颜色单位改变法(color change unit,CCU)和荧光定量PCR检测的相关性。结果显示,标准... 为快速检测鸡毒支原体,根据鸡毒支原体的保守基因设计特异性引物和Taq Man探针,建立鸡毒支原体Taq Man实时荧光定量PCR方法并分析鸡毒支原体培养过程中颜色单位改变法(color change unit,CCU)和荧光定量PCR检测的相关性。结果显示,标准曲线y=-3.646x+44.208,相关系数R^(2)=0.998,最低检测限度为1 copy/μL;与其他菌株等均无交叉反应;组内和组间变异系数均小于3%,表明该方法具有良好的稳定性和可重复性。用建立的实时荧光定量PCR检测方法对26份临床样品进行检测,该方法较普通PCR方法检出率更高。建立的荧光定量PCR与CCU显示鸡毒支原体在对数生长期时,两者具有一定的对应关系。表明建立了鸡毒支原体Taq Man探针实时荧光定量PCR检测方法,可实现对鸡毒支原体的快速检测,为鸡毒支原体感染的防控提供技术基础。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 Taq man探针 荧光定量PCR
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羊贝氏柯克斯体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用
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作者 张锐铮 于皓同 +3 位作者 王凯茸 张琪 张淑霞 许信刚 《动物医学进展》 北大核心 2024年第7期6-10,共5页
为建立检测贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)实时荧光定量PCR方法,根据GenBank上收录的C.burnetii RSA439株com1基因序列(CP040059.1)保守区设计特异性引物和探针,并构建重组质粒及优化反应条件,以期建立一种检测贝氏柯克斯体的Taq Man... 为建立检测贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)实时荧光定量PCR方法,根据GenBank上收录的C.burnetii RSA439株com1基因序列(CP040059.1)保守区设计特异性引物和探针,并构建重组质粒及优化反应条件,以期建立一种检测贝氏柯克斯体的Taq Man荧光定量PCR方法。结果显示,该方法所建立标准曲线线性关系良好;敏感性试验结果显示,最低检出限为2.45×10^(2) copies/μL,与PCR最低检出限为2.45×10^(4) copies/μL相比较,灵敏度提高了100倍;对羊支原体、羊流产衣原体、羊布鲁氏菌等均无交叉反应,批内和批间重复性试验结果稳定,变异系数均小于3%,说明特异性、重复性好;利用该方法对收集的126份样品进行检测,结果显示样品阳性率为9.52%,常规PCR检测阳性率为7.14%,符合率为90.47%。该方法可为贝氏柯克斯体临床上快速检测及防控提供技术支持。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯 Taq man荧光定量PCR 检测方法
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circMAN1A2调节miR-212-3p/DDIT4轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响
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作者 曹博威 贾腾飞 +2 位作者 宋钉町 赵昱清 张文斌 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2024年第7期868-874,共7页
目的探究circMAN1A2靶向miR-212-3p/DNA损伤诱导转录子4(NDA damage-inducible transcript 4,DDIT4)轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法qRT-PCR法检测胃癌组织和细胞中circMAN1A2、miR-212-3p表达水平。荧光素酶检测circMAN1A2与... 目的探究circMAN1A2靶向miR-212-3p/DNA损伤诱导转录子4(NDA damage-inducible transcript 4,DDIT4)轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法qRT-PCR法检测胃癌组织和细胞中circMAN1A2、miR-212-3p表达水平。荧光素酶检测circMAN1A2与miR-212-3p、DDIT4和miR-212-3p的靶向关系。在胃癌细胞SGC-7901、HGC-27中转染si-NC、si-circMAN1A2、si-circMAN1A2+anti-NC、si-circMAN1A2+anti-miR-212-3p、miR-NC、miR-212-3p mimics,将未转染的SGC-7901、HGC-27细胞设为对照。平板克隆实验检测细胞增殖;细胞划痕及Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力。Western blotting检测增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达。结果在胃癌组织及细胞中,circMAN1A2高表达,miR-212-3p低表达;下调circMAN1A2可以靶向上调miR-212-3p表达,且下调DDIT4表达,进而抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力。抑制miR-212-3p表达可部分逆转抑制circMAN1A2表达对胃癌细胞恶性增殖的抑制作用。结论在胃癌细胞中抑制circMAN1A2表达可抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,其与调节miR-212-3p/DDIT4信号轴有关。 展开更多
关键词 环状RNA man1A2 微小RNA-212-3p DNA损伤诱导转录子4 胃癌 增殖 侵袭 迁移
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虾十足目虹彩病毒1、肝肠胞虫及传染性早熟病毒多重Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与应用
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作者 徐晔 周毅 +4 位作者 王娜 窦维伟 王静 王凤芝 段宏安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期825-831,共7页
为建立检测十足目虹彩病毒1(DIV1)、肝肠胞虫(EHP)、传染性早熟病毒(IPV)的多重Taq Man荧光定量PCR检测方法,本研究根据DIV1 MCP基因、EHP SSU基因与IPV polyprotein A基因设计特异性引物和Taq Man探针,经各反应条件的优化建立了同时检... 为建立检测十足目虹彩病毒1(DIV1)、肝肠胞虫(EHP)、传染性早熟病毒(IPV)的多重Taq Man荧光定量PCR检测方法,本研究根据DIV1 MCP基因、EHP SSU基因与IPV polyprotein A基因设计特异性引物和Taq Man探针,经各反应条件的优化建立了同时检测DIV1、EHP及IPV的多重Taq Man荧光定量PCR方法。利用该方法检测DIV1、EHP、IPV、白斑综合征病毒、致急性肝胰腺坏死弧菌、传染性皮下及造血器官坏死病毒、虾偷死病毒、传染性肌肉坏死病毒、桃拉病毒、黄头病毒1型等主要虾类病毒,结果显示,该方法仅能扩增出DIV1、EHP和IPV,与其他主要虾类病原均无交叉反应,特异性较强。对10倍倍比稀释后等浓度等体积混合的DIV1、EHP和IPV质粒标准品混合物的检测结果显示,该方法对3种病原的质粒标准品的检测限均为1.67×10^(1)拷贝/μL,各病毒单一荧光定量PCR方法的检测限均为1.67×10~0拷贝/μL,多重Taq Man荧光定量PCR方法的灵敏度虽略低于单一荧光定量PCR方法,但是可以同时检测3种病原,检测效率高。选取3个浓度的pDIV1、pEHP、pIPV(5×10^(5)拷贝/μL、5×10^(4)拷贝/μL、5×10^(3)拷贝/μL)等浓度等体积混合的质粒标准品为模板,进行组内和组间重复性试验,结果显示组内与组间重复性试验的变异系数均小于1%,该方法重复性较好。利用该方法与DIV1、EHP、IPV单一荧光定量PCR方法同时检测105份虾苗和亲虾样品,结果显示,本研究建立的多重Taq Man荧光定量PCR方法对DIV1的检出率为21.9%(23/105),对EHP的检出率为14.3%(15/105),对IPV的检出率为45.7%(48/105),3种病原混合感染率为1.9%(2/105),与DIV1、EHP、IPV各单一荧光定量PCR方法的检测结果均一致,阳性样品的符合率达100%。本研究建立的DIV1、EHP、IPV多重Taq Man荧光定量PCR方法为临床同时检测该3种病原提供了特异、敏感、高效的技术手段。 展开更多
关键词 虾十足目虹彩病毒1 虾肝肠胞虫 虾传染性早熟病毒 多重Taq man荧光定量PCR
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Fast solution to the free return orbit's reachable domain of the manned lunar mission by deep neural network
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作者 YANG Luyi LI Haiyang +1 位作者 ZHANG Jin ZHU Yuehe 《Journal of Systems Engineering and Electronics》 SCIE CSCD 2024年第2期495-508,共14页
It is important to calculate the reachable domain(RD)of the manned lunar mission to evaluate whether a lunar landing site could be reached by the spacecraft. In this paper, the RD of free return orbits is quickly eval... It is important to calculate the reachable domain(RD)of the manned lunar mission to evaluate whether a lunar landing site could be reached by the spacecraft. In this paper, the RD of free return orbits is quickly evaluated and calculated via the classification and regression neural networks. An efficient databasegeneration method is developed for obtaining eight types of free return orbits and then the RD is defined by the orbit’s inclination and right ascension of ascending node(RAAN) at the perilune. A classify neural network and a regression network are trained respectively. The former is built for classifying the type of the RD, and the latter is built for calculating the inclination and RAAN of the RD. The simulation results show that two neural networks are well trained. The classification model has an accuracy of more than 99% and the mean square error of the regression model is less than 0.01°on the test set. Moreover, a serial strategy is proposed to combine the two surrogate models and a recognition tool is built to evaluate whether a lunar site could be reached. The proposed deep learning method shows the superiority in computation efficiency compared with the traditional double two-body model. 展开更多
关键词 manned lunar mission free return orbit reachable domain(RD) deep neural network computation efficiency
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The Violent Redemption Theme in A Good Man is Hard to Find
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作者 XIONG Jun-yu 《Journal of Literature and Art Studies》 2024年第8期684-688,共5页
Flannery O’Connor is one of the representative figures of American Southern writers.Being recognized as the most outstanding writer of the American South after Faulkner,she has great influence in the literary world.H... Flannery O’Connor is one of the representative figures of American Southern writers.Being recognized as the most outstanding writer of the American South after Faulkner,she has great influence in the literary world.Her works are always shrouded in a strange and grotesque atmosphere and full of death as well as religious metaphors.The protagonists are a series of American Southern freaks struggling with the crisis of spiritual belief.The protagonists of her novel A Good Man is Hard to Find are a hypocritical believer in the world of sinners and a lost man suffering in the midst of real sin,thus O’Connor uses the highest form of violence-death to bring ultimate redemption to them.In people’s conception,violence and redemption are often opposite to each other,but O’Connor uses bloody and violent plots to explore the theme of religious salvation,integrating and unifying the two contrary concepts to form her unique and profound violent redemption writing. 展开更多
关键词 O’Connor A Good man is Hard to Find violent redemption
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Assessment of Meteorological Threats to the Coordinated Search and Rescue of Unmanned/Manned Aircraft
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作者 Fei YAN Chuan LI +2 位作者 Xiaoyi FU Kefeng WU Yuying LI 《Meteorological and Environmental Research》 2024年第1期27-29,37,共4页
The architecture and working principle of coordinated search and rescue system of unmanned/manned aircraft,which is composed of manned/unmanned aircraft and manned aircraft,were first introduced,and they can cooperate... The architecture and working principle of coordinated search and rescue system of unmanned/manned aircraft,which is composed of manned/unmanned aircraft and manned aircraft,were first introduced,and they can cooperate with each other to complete a search and rescue task.Secondly,a threat assessment method based on meteorological data was proposed,and potential meteorological threats,such as storms and rainfall,can be predicted by collecting and analyzing meteorological data.Finally,an experiment was carried out to evaluate the performance of the proposed method in different scenarios.The experimental results show that the coordinated search and rescue system of unmanned/manned aircraft can be used to effectively assess meteorological threats and provide accurate search and rescue guidance. 展开更多
关键词 Unmanned/manned aircraft Coordinated search and rescue Assessment of meteorological threats Meteorological data
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Development of a Sports Safety Promotion Framework Based on KABP Theory and 4M Management
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作者 Duoyang Hu Di Mu 《Journal of Contemporary Educational Research》 2024年第7期331-334,共4页
This study explores the significance,current research landscape,and conceptualization of sports safety promotion.Safety in sports is fundamental to youth physical activities,and an excessive focus on or neglect of saf... This study explores the significance,current research landscape,and conceptualization of sports safety promotion.Safety in sports is fundamental to youth physical activities,and an excessive focus on or neglect of safety is unwarranted.Globally,numerous countries have extensively researched sports safety promotion and implemented diverse strategies.Drawing from KABP(Knowledge,Attitude,Behavior,Practice)theory and 4M(Man,Machine,Medium,Management)management,this paper presents a conceptual framework for sports safety promotion.It integrates these theories to devise a comprehensive accident prevention model within a sports safety promotion system.The framework prioritizes enhancing students’safety literacy and underscores the practical application of safety knowledge and skills in simulated sports settings following structured safety education.It aims to enhance students’competency and proficiency in averting sports-related injuries. 展开更多
关键词 Knowledge Attitude Behavior Practice theory man Machine Medium management management Sports safety promotion Youth sports safety
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结核分枝杆菌复合群、副结核分枝杆菌和禽分枝杆菌禽亚种多重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用 被引量:2
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作者 蔡珠明 党光辉 +6 位作者 臧鑫鑫 邵明珠 唐阳阳 鹿萍 崔莹莹 崔子寅 刘思国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期51-59,共9页
结核分枝杆菌复合群(MTBC)、包括结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌(MB)、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等;非结核分枝杆菌(NTM)中禽分枝杆菌(MA)是自然界常见的动物致病菌,包含4个亚种,分别为禽分枝杆菌禽亚种(MAA)、禽分枝杆菌人/猪亚种(M... 结核分枝杆菌复合群(MTBC)、包括结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌(MB)、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等;非结核分枝杆菌(NTM)中禽分枝杆菌(MA)是自然界常见的动物致病菌,包含4个亚种,分别为禽分枝杆菌禽亚种(MAA)、禽分枝杆菌人/猪亚种(MAH)、禽分枝杆菌副结核亚种/副结核分枝杆菌(MAP)和禽分枝杆菌森林土壤亚种(MAS)。为建立MTBC、MAP和MAA的多重荧光定量PCR检测方法,本研究基于MTBC、MAP和MAA的特异性基因devR、F57和IS901分别设计引物及探针,通过优化各反应条件,建立了一种可同时检测3种分枝杆菌的多重Taq Man荧光定量PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对MTB、MB、MAP、MAA和MAS检测为阳性,对其他畜禽病原菌,包括MAH、13种NTM和7种非分枝杆菌检测结果均为阴性,特异性较强。敏感性试验结果显示,该方法对MB、MAP和MAA重组质粒标准品的检测限均为1.0拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验结果显示,批内与批间重复性试验变异系数均小于2.5%,重复性较好。利用该方法检测体外模拟污染(MB、MAP和MAA菌液浓度分别为1.0×10^(3)cfu/mL~1.0×10^(0)cfu/mL)的27份牛抗凝血和12份牛淋巴结组织样品,确定该方法对3种菌的检测限,结果显示该方法对3种菌的检测限均为1.0 cfu/mL~10.0 cfu/mL。将浓度为1.0×10^(6)cfu/mL的MB、MAP和MAA菌液分别单一、两两混合、三种菌混合感染BALB/c小鼠,5 d后,剖杀各组小鼠并取各组织及血液样品,同时采用该方法、常规单一PCR及细菌分离培养方法检测,比较三者的检测结果。结果显示,多重荧光定量PCR方法对不同感染组小鼠的各组织样品检出率为98.1%(212/216),常规单一PCR方法的检出率为81.5%(176/216),细菌分离培养的检出率为52.8%(114/216),多重荧光定量PCR与常规单一PCR的阳性符合率均为100.0%(176/176),与细菌分离培养鉴定结果的阳性符合率均为100.0%(114/114)。本研究首次建立了能够同时检测MTBC、MAP和MAA的Taq Man多重荧光定量PCR方法,其特异性强、敏感性高、重复性及稳定性好,检测性能强,可以用于临床各种样品的检测,为这3种病原的快速检测和流行病学调查提供了技术手段。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌复合群 副结核分枝杆菌 禽分枝杆菌禽亚种 多重Taq man荧光定量PCR
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番茄褐色皱果病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 李献锋 于璇 +7 位作者 冯黎霞 于翠 丁钿 徐强 赵菊鹏 马骏 武目涛 魏霜 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期185-193,共9页
为建立番茄褐色皱果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)Taq Man荧光定量RT-PCR方法,本研究针对ToBRFV RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)基因序列设计了4组特异性引物和Taq Man探针,构建了标准曲线,并... 为建立番茄褐色皱果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)Taq Man荧光定量RT-PCR方法,本研究针对ToBRFV RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)基因序列设计了4组特异性引物和Taq Man探针,构建了标准曲线,并对该方法的特异性、灵敏度和实际样品的检测效率进行评估。结果显示,该方法特异性强,与番茄花叶病毒、番茄斑驳花叶病毒、烟草花叶病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、番茄环斑病毒、番茄黑环病毒、辣椒轻斑驳病毒、烟草环斑病毒和凤果花叶病毒等9种病毒均无交叉反应。建立的标准曲线的R^(2)为0.999,扩增效率为102.096%,检测灵敏度为10 fg/μL,与EPPO PM 7/146(1)推荐的CaTa28、CSP1325方法相当,是常规RT-PCR的100倍;采用该方法成功从60份番茄和辣椒叶片、种子样品中检出10份阳性样品。建立的Taq Man荧光定量RT-PCR方法特异性强、灵敏度高,适用于实际样品中ToBRFV的快速精准检测。 展开更多
关键词 番茄褐色皱果病毒 RNA依赖的RNA聚合酶 Taq man探针 荧光定量RT-PCR 检测
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MAN系列柴油机气缸盖座圈锥面角度检测装置研究
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作者 梁颖杰 黄月 +2 位作者 郑铮毅 王强 张梦东 《金属加工(冷加工)》 2023年第12期48-51,共4页
通过对MAN系列柴油机缸盖座圈结构及尺寸进行分析,针对座圈锥面角度的测量方法,除采用常规的尼泊丁气动量仪检测方式外,介绍一种通过杠杆结构设计的自制锥面角度测量检具,实现对座圈减薄设计缸盖等变形机型在试制及小批量生产阶段的座... 通过对MAN系列柴油机缸盖座圈结构及尺寸进行分析,针对座圈锥面角度的测量方法,除采用常规的尼泊丁气动量仪检测方式外,介绍一种通过杠杆结构设计的自制锥面角度测量检具,实现对座圈减薄设计缸盖等变形机型在试制及小批量生产阶段的座圈锥面角度测量的工艺要求。 展开更多
关键词 man系列柴油机 气门座圈 锥面角度 检测
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单增李斯特菌PTS系统转运蛋白IIB^(man)介导运动性和感染的功能研究
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作者 张佳雪 陈绵绵 +7 位作者 程丽丽 任耿佳 徐像文 鲁珂蓥 庄楠茜 孙静 宋厚辉 程昌勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1179-1187,共9页
为探究单增李斯特菌(LM)磷酸转移酶系统(PTS)转运蛋白IIB^(man)在LM生长、运动性及其生物学功能,本研究以LM EGD-e株基因组为模板,经PCR扩增iiB^(man)基因的上下游基因片段(不包含iiB^(man)基因),插入质粒pKSV7以构建缺失质粒;以LM EGD-... 为探究单增李斯特菌(LM)磷酸转移酶系统(PTS)转运蛋白IIB^(man)在LM生长、运动性及其生物学功能,本研究以LM EGD-e株基因组为模板,经PCR扩增iiB^(man)基因的上下游基因片段(不包含iiB^(man)基因),插入质粒pKSV7以构建缺失质粒;以LM EGD-e基因组为模板,采用PCR扩增iiB^(man)基因与启动子片段,插入质粒pIMK2以构建回补质粒,经PCR和测序鉴定后,将缺失质粒转化LM EGD-e感受态细胞,通过氯霉素抗性及42℃压力下使重组质粒与LM EGD-e株的同源片段发生同源重组单交换获得一代同源重组菌株,然后在无抗性培养基中30℃培养使质粒丢失,获得缺失株ΔiiB^(man)。将回补质粒转化ΔiiB^(man)感受态细胞中,通过卡那霉素抗性筛选获得回补株CΔiiB^(man),缺失株和回补株均经PCR和测序鉴定。37℃培养EGD-e、ΔiiB^(man)、CΔiiB^(man)12 h,期间每隔1 h测定OD_(600nm)并绘制生长曲线,分析各菌株生长特性,结果显示,各菌株体外生长趋势相似。将各菌株菌液接种于TSA半固体培养基,培养至24 h和48 h时检测细菌运动圈大小,结果显示ΔiiB^(man)的运动圈直径分别是EGD-e的1.5及1.6倍(P<0.05、P<0.01),CΔiiB^(man)与EGD-e运动圈直径均基本一致。在各菌株培养上清中加入绵羊血,检测各菌株溶血能力,结果显示,ΔiiB^(man)的溶血能力较EGD-e及CΔiiB^(man)增强。将各菌株以MOI 20感染RAW264.7细胞,在感染后2 h、5 h和8 h收集细胞进行点样计数,结果显示,在感染后2 h和5 h时ΔiiB^(man)的胞内增殖能力较EGD-e及CΔiiB^(man)显著增强(P<0.05)。将各菌株以2×10^(5)cfu/只经腹腔注射感染小鼠48 h后剖杀,取肝脏和脾脏研磨并点样计数,结果显示,ΔiiB^(man)在小鼠脏器载菌量较EGD-e及CΔiiB^(man)极显著增多(P<0.001)。上述结果首次表明IIB^(man)不影响LM的生长,但影响LM的运动性及提高LM的体外溶血活性;IIB^(man)参与LM的胞内增殖和宿主脏器定植。本研究为了解LM PTS系统所介导的细菌体外环境适应及宿主感染的分子机制,以及LM感染的防控奠定了基础。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 磷酸转移酶系统 IIB^(man)转运蛋白 运动性 感染
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The Significance of Constructing TCM Psychosomatic Medicine from the Holistic View of the Unity of Nature and Man
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作者 Wutong Song Hongxin Cao 《Chinese Medicine》 2023年第4期267-275,共9页
With the development of medical technology, the problem of fragmentation of medical research has become increasingly prominent, and a series of iatrogenic diseases, drug-induced diseases and drug toxicity and side eff... With the development of medical technology, the problem of fragmentation of medical research has become increasingly prominent, and a series of iatrogenic diseases, drug-induced diseases and drug toxicity and side effects have resulted in an increase in the number of diseases. In the face of these problems, the medical concept has been re-examined and re-thought. The concept of the holistic view of the unity of nature and man in traditional Chinese medicine has certain enlightenment for dealing with the problems in the current medical development. Based on the holistic view of the unity of nature and man, the overall connection between human’s heart and body and nature is explained, and the further construction of TCM psychosomatic medicine is conducive to guiding the diagnosis and treatment of clinical diseases, and providing new enlightenment for the current medical concept thinking and clinical disease research. 展开更多
关键词 Traditional Chinese Medicine The Unity of Nature and man Holistic View TCM Psychosomatic Medicine
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Takayasu Disease Revealed by Arterial Hypertension in a 47-Year-Old Man
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作者 Bah Mamadou Bassirou Baldé Thierno Hamidou +10 位作者 Wann Thierno Amadou Baldé Elhadj Yaya Baldé Aissatou Tiguidanké Koné Alpha Doumbouya Amadou Diouldé Diallo Hafsatou Barry Ibrahima Sory Samoura Sana Diakité Souleymane Béavogui Mariam Baldé Mamadou Dadhi 《World Journal of Cardiovascular Diseases》 2023年第7期341-348,共8页
Takayasu disease is a chronic vasculitis of the large vessels. It is rare in sub- Saharan Africa and probably under-diagnosed. Arterial hypertension (AH) is a frequent finding. We report the case of a 46-year-old... Takayasu disease is a chronic vasculitis of the large vessels. It is rare in sub- Saharan Africa and probably under-diagnosed. Arterial hypertension (AH) is a frequent finding. We report the case of a 46-year-old man with Takayasu disease revealed by hypertension. The American College of Rheumatology (ACR) criteria were used for diagnosis, with 4 out of 6 criteria. Echodoppler and angioscanner showed signs of left subclavian stenosis and circumferential, regular arterial thickening. He had a biological inflammatory syndrome. He was treated with prednisone and amlodipine. After 6 months of follow-up, he was diagnosed with tuberculosis and put on anti-tuberculosis treatment. 展开更多
关键词 Takayasu Disease HYPERTENSION man
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MAN 6L16/24副机排气冒黑烟故障原因分析与解决方案
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作者 刘广利 《天津航海》 2023年第4期13-16,共4页
针对船舶副机排气冒黑烟的故障问题,文章介绍了船旗国对船舶排放黑烟的法律法规要求,分析了副机故障原因,提出了有效的解决方案,供同行们参考。
关键词 man 6L16/24副机 排气冒黑烟 黑烟危害 法规要求 喷嘴环 解决方案 原因分析
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单摆系统的Mané集与Aubry集
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作者 梁雪 《苏州科技学院学报(自然科学版)》 CAS 2006年第3期5-9,共5页
M ané集与Aubry集在解决Arnold扩散的相关问题的工作中扮演着重要的角色。按Fathi的定义方式得到了单摆系统的M ané集与Aubry集。
关键词 α函数 mané Aubry集 弱KAM解 粘性解
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猫冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 陈秋阳 梁瑞英 +3 位作者 梁琳 汤新明 秦彤 丁家波 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期16-21,共6页
猫冠状病毒(FCoV)在全球猫种群中广泛流行,隐形感染的猫导致病毒在猫群中持续传播。提高样本检测率、早预防、早治疗可减少种群中病毒流行率。为建立可以灵敏、准确检测FCoV的Taq Man荧光定量PCR检测方法,根据GenBank公布的FCoV基因片段... 猫冠状病毒(FCoV)在全球猫种群中广泛流行,隐形感染的猫导致病毒在猫群中持续传播。提高样本检测率、早预防、早治疗可减少种群中病毒流行率。为建立可以灵敏、准确检测FCoV的Taq Man荧光定量PCR检测方法,根据GenBank公布的FCoV基因片段N保守区域设计了1对特异性引物和1条探针,通过优化反应体系,建立了FCoV Taq Man荧光定量PCR检测方法,对75份临床样品进行检测。结果表明,该方法在1.49×10^(11)~1.49×10^(2) copies/μL之间具有良好的线性关系,特异性强,敏感性高,对FCoV质粒标准品最低检测下限为1.49×10^(0) copies/μL,而普通PCR对FCoV质粒标准品最低检测下限为1.49×10^(5) copies/μL;重复性好,组内变异系数和组间变异系数均小于3%;75份临床样品,阳性率为37.33%。研究建立的FCoV检测方法扩增效率高、特异性强、敏感性好、稳定性高,且实用性好,可以用于FCoV的快速检测,可为流行病学调查提供有效的技术手段。 展开更多
关键词 猫冠状病毒 荧光定量PCR Taq man探针
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鸡贫血病毒Taq Man探针荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:17
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作者 宋修庆 高宏雷 +4 位作者 王晓艳 林欢 宇文延青 王永强 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期56-59,共4页
根据鸡贫血病毒(CAV)的基因序列,选取一段高度保守的基因序列作为目的片段设计引物与探针,将该目的片段克隆到pMD18-T载体中,作为阳性标准品。通过优化荧光定量PCR反应条件,建立了CAV的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该检测方法的敏感... 根据鸡贫血病毒(CAV)的基因序列,选取一段高度保守的基因序列作为目的片段设计引物与探针,将该目的片段克隆到pMD18-T载体中,作为阳性标准品。通过优化荧光定量PCR反应条件,建立了CAV的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该检测方法的敏感性达到10个病毒拷贝/μL,与其他禽病病毒无交叉反应,批间与批内重复试验相关系数都小于5%。实验数据证明该检测方法敏感性高,特异性好,重复性佳。 展开更多
关键词 鸡贫血病毒 TAQ man探针 荧光定量PCR
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