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人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2N端片段的原核表达
被引量:
3
1
作者
蔡学敏
左大明
+2 位作者
赵娜
张丽芸
陈政良
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期235-238,共4页
目的在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)N端片段。方法应用PCR技术从含人MASP2 cDNA的质粒pGEM-MASP2中扩增MASP2-N端基因片段,将其克隆至pGEX4T-1原核表达载体,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP2-N...
目的在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)N端片段。方法应用PCR技术从含人MASP2 cDNA的质粒pGEM-MASP2中扩增MASP2-N端基因片段,将其克隆至pGEX4T-1原核表达载体,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP2-N端蛋白,通过GSTrap亲合层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,并以ELISA分析了目的蛋白与MBL-CLR结合的活性。结果从pGEM-MASP2中扩增得到约840 bp的基因片段,构建成重组载体经酶切出现约4900 bp和840 bp片段,测序结果与预期的完全一致。纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr 60000蛋白带,该蛋白可与抗GST抗体反应并能与重组人MBL-CLR蛋白结合。结论获得了表达人MASP2 N端片段的大肠杆菌菌株和重组人MASP2N端片段/GST融合蛋白,为MASP2分子的进一步研究提供了条件。
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关键词
甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶
2
N端片段
原核表达
下载PDF
职称材料
题名
人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2N端片段的原核表达
被引量:
3
1
作者
蔡学敏
左大明
赵娜
张丽芸
陈政良
机构
南方医科大学免疫学教研室
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期235-238,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30371310)
广东省自然科学基金研究团队项目(015003)资助
文摘
目的在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶2(MASP2)N端片段。方法应用PCR技术从含人MASP2 cDNA的质粒pGEM-MASP2中扩增MASP2-N端基因片段,将其克隆至pGEX4T-1原核表达载体,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP2-N端蛋白,通过GSTrap亲合层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,并以ELISA分析了目的蛋白与MBL-CLR结合的活性。结果从pGEM-MASP2中扩增得到约840 bp的基因片段,构建成重组载体经酶切出现约4900 bp和840 bp片段,测序结果与预期的完全一致。纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr 60000蛋白带,该蛋白可与抗GST抗体反应并能与重组人MBL-CLR蛋白结合。结论获得了表达人MASP2 N端片段的大肠杆菌菌株和重组人MASP2N端片段/GST融合蛋白,为MASP2分子的进一步研究提供了条件。
关键词
甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶
2
N端片段
原核表达
Keywords
mannan-binding lectin associated sefine protase-2
N-terminal fragment
Prokaryofie expression
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2N端片段的原核表达
蔡学敏
左大明
赵娜
张丽芸
陈政良
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
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