基于COI条形码序列的珍珠母及其混伪品的DNA分子鉴定

目的:探讨应用COI条形码序列对珍珠母及其混伪品进行物种鉴定的可行性。方法:用MEGA4.0等软件计算珍珠母及其混伪品种内及种间变异,构建珍珠母及其混伪品的NJ树。结果:珍珠母种内COI序列变异小,种间存在较多的变异位点,种间的遗传距离显著大于种内的遗传距离。通过构建的系统聚类树图可以看出,珍珠母不同来源个体均聚在一起,能够与其混伪品区分开。结论:基于COI序列的DNA条形码技术可以很好的鉴定珍珠母的正品来源及其混伪品。

珍珠母不同炮制品对小鼠抗抑郁作用研究

目的研究珍珠母生品、烘烤品、超微粉对小鼠的抗抑郁作用。方法采用小鼠悬尾实验研究珍珠母不同炮制品的抗抑郁作用。结果在小鼠悬尾实验中,珍珠母生品高剂量组,烘烤品低剂量组、中剂量组和高剂量组,超微粉低剂量组、中剂量组和高剂量组均能减少小鼠悬尾的完全不动时间;在AMPT诱导的小鼠悬尾实验中,珍珠母不同炮制品高剂量组均能减少小鼠悬尾完全不动时间。结论珍珠母有一定的抗抑郁作用。

珍珠母镇静催眠作用及其不同炮制品对小鼠脑内5-羟色胺浓度的影响

目的探讨珍珠母的镇静催眠作用及其不同炮制品对小鼠5-羟色胺(5-HT)浓度的影响。方法腹腔注射PCPA,观察其对小鼠的催眠作用;ELISA法测定小鼠脑干匀浆液中5-HT的浓度。结果珍珠母的生品、烘烤品和超微粉品均能减少小鼠自主活动的次数,延长小鼠睡眠的时间,能够增加小鼠脑干内5-HT浓度,其中超微粉作用最强。结论珍珠母具有镇静、催眠作用,其作用机制与增加小鼠脑干内5-HT浓度有关。

中药不同组分对小鼠缺血脑组织蛋白表达谱的影响

目的运用蛋白质组学技术分析中药不同组分对小鼠缺血脑组织蛋白表达谱的影响。方法黄芩苷、栀子苷、胆酸、珍珠母分别干预缺血再灌小鼠3h后,断头取脑,提取蛋白,用蛋白质芯片比较分析以上组分对小鼠缺血脑组织蛋白表达谱影响的差异。结果黄芩苷、栀子苷、胆酸、珍珠母可影响5373Da, 5707Da,15103Da 3个靶点蛋白的表达,中药对蛋白表达具有多靶点性和差异性。结论蛋白质芯片技术是探索中药药理机制的有效手段。

清开灵不同组分对大鼠MCAO模型脑组织中肿瘤坏死因子的影响特征

目的:观察清开灵不同组分对MCAO大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNF-R)含量的影响,探讨其抗脑缺血损伤的机制。方法:采用MCAO模型,应用RIA检测脑组织匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α含量,ELSIA检测脑组织sTNF-R含量。结果:缺血24h,胆酸组、栀子苷组、珍珠母组及合方组的脑组织中TNF-α含量显著降低(与模型组比P<0.05或P<0.01)。缺血12h,珍珠母组、黄芩苷组和胆酸组脑组织中sTNF-R的含量显著高于模型组(P<0.05或P<0.01);而缺血24h,胆酸组与合方组脑组织中sTNF-R的含量显著低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:清开灵四种组分及合方可以抑制TNF-α的合成与分泌,对脑缺血后的级联反应具有阻抑作用;而各不同组分对sTNF-R的作用较为复杂,在缺血12h,珍珠母、黄芩苷和胆酸可刺激sTNF-R的合成与分泌,而到缺血后24h,各给药组脑组织中sTNF-R的含量却表现为下降趋势。

电感耦合等离子体质谱法测定三种贝壳类药材中稀土元素含量

目的 建立测定珍珠母、石决明和牡蛎中15种稀土元素含量的方法.方法 供试品经微波消解后,以铟和铑为内标,用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）测定.结果 各元素在相应范围内线性良好（r＞0.999）,精密度好（RSD＜4%,n＝6）,各元素加样回收率为97.0%～105.0%.结论 ICP-MS法检出限低,简便快捷,准确可靠,是贝壳类药材中稀土元素含量测定的可行方法.

不同产地珍珠母药材HPLC特征图谱的建立

目的建立珍珠母药材HPLC特征图谱,提高其质量控制水平。方法采用HPLC法测定,Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速0.5 mL/min,检测波长254 nm,柱温为30℃;以苯丙氨酸为参照物,运用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》对测定的10批珍珠母药材数据进行处理分析。结果建立了以5个特征峰为指标成分的珍珠母药材HPLC特征图谱,以苯丙氨酸色谱峰为参照,其他4个特征峰的相对保留时间分别为0.703±0.006、0.814±0.005、0.881±0.001、1.403±0.008。结论该方法经过方法学验证,可用于珍珠母药材的质量控制。

珍珠母炮制前后寡肽类化合物的结构鉴定及对比分析

目的:对中药珍珠母炮制前后寡肽类化合物结构进行鉴定及对比分析。方法:采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-DAD-ESI-MS/MS)技术对珍珠母炮制前后的寡肽类化合物进行结构分析。结果:初步解析了珍珠母生品中4个寡肽化合物的结构,分别为Op-1(COOH-Lys-Ala-NH2)、Op-2(COOH-Asn-Val-NH2)、Op-3(COOHAsn-Val-Ala-NH2)和Op-4(COOH-Asn-Val-Ala-Ala-NH2);而炮制品中不含Op-1,含有其他3个寡肽Op-2、Op-3和Op-4。结论:本方法可用于珍珠母药材中寡肽类化学成分的快速分析及结构鉴定,并对珍珠母炮制前后的药效物质变化规律及炮制机理研究提供了科学依据。

清开灵注射液和珍珠母水解液中钙的测定及形态初探

目的 :测定清开灵注射液 (胆酸 ,珍珠母 ,水牛角 ,黄芩等 )及其原料药材珍珠母水解液中游离钙和结合钙含量。方法 :采用原子吸收分光光度法和离子色谱法进行钙含量的测定。结果 :清开灵注射液及珍珠母水解液中都存在游离和结合两种状态的钙 ;分别在pH6 .0 ,pH6 .5 ,pH7.0下制备得到供试样品 ,清开灵注射液中结合钙与游离钙的比值分别为 7.0(RSD为 9.3 % ) ,8.0 (RSD为 8.0 % ) ,1 2 .1 (RSD为 9.2 % ) ,珍珠母水解液中结合钙与游离钙的比值分别为 4 .0 (RSD为 1 2 .0 % ) ,4.0 (RSD为 1 0 .8% ) ,4.1 (RSD为 1 5 .7% )。结论 :钙的存在状态及其含量比值是进一步规范清开灵注射液质量标准 ,研究清开灵治疗脑水肿机理的重要参数。

炮制方法对珍珠母总蛋白质含量及凝胶电泳特征谱带的影响

目的分析不同炮制方法对珍珠母蛋白质含量及其凝胶电泳特征谱带的影响。方法分别应用考马斯亮蓝法测定珍珠母蛋白质含量和应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术获得珍珠母总蛋白质凝胶电泳谱带。结果考马斯亮蓝法测定珍珠母超微粉的蛋白质含量最大,而烘烤品、生品的依次降低;SDS-PAGE凝胶电泳分析表明3种样品均主要含有4条条带,生品、烘烤品和超微粉各条带平行比较时颜色依次加深。结论生品、烘烤品和超微粉的蛋白质分子量分布基本相同,而蛋白质含量依次升高,其中超微粉样品含量最高,说明超微粉碎技术可以作为贝壳类药材新的炮制方法。

珍珠精母、肌苷、人胎盘组织液、鱼腥草对大鼠肝脏脂质过氧化的作用

目的 研究珍珠精母、肌苷、人胎盘组织液、鱼腥草注射液对 Fe2 + - L-半胱氨酸诱导的大鼠肝脏脂质过氧化模型的影响。 方法 采用细胞匀浆丙二醛 ( MDA)比色法 (体外法 )测定大鼠肝脏粗线粒体脂质过氧化作用产物 MDA的含量。 结果 珍珠精母、鱼腥草可使 MDA值降低 ( P≤ 0 .0 1) ,肌苷、人胎盘组织液可使雌性大鼠的 MDA值降低 ,雄性大鼠的 MDA值升高 ( P≤ 0 .0 1)。 结论 珍珠精母、鱼腥草可抑制大鼠肝脏的脂质过氧化代谢 ,肌苷。

石决明、牡蛎、珍珠母三味平肝潜阳药碳酸钙的含量测定及其比较研究

目的:测定石决明、牡蛎、珍珠母三味平肝潜阳药的碳酸钙含量,比较不同产地三者碳酸钙含量,为三者的质量评价提供科学依据。方法:依据2010年版《中国药典》石决明、牡蛎项下含量测定法,采用EDTA滴定法对碳酸钙含量进行测定,并用Kruskal-Wallis检验法对其结果进行分析。结果:碳酸钙含量在0.0210g-0.2021g范围内呈良好线性关系(r2=1.000)。测得石决明碳酸钙的含量在89.85%-94.87%之间,牡蛎碳酸钙的含量在64.61%-96.75%之间,珍珠母碳酸钙的含量在88.71%-94.47%之间。结论:不同产地石决明、牡蛎、珍珠母碳酸钙的含量没有显著性差异,单以碳酸钙的含量作为其评价指标性成分,未能从整体上反映中药的内在质量。

基于网络药理学的“水牛角-珍珠母”药对作用机制研究

目的:基于网络药理学,探讨"水牛角-珍珠母"药对的功效物质基础和配伍机制。方法:依托中药系统药理学分析平台检索水牛角和珍珠母的化学成分、作用靶点及相关疾病等信息,构建"药物-成分-靶标-疾病"网络,进行基因本体(gene ontology,GO)分类富集分析、基于京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)的通路富集分析,研究"水牛角-珍珠母"药对的作用机制。结果:"药物-成分-靶标-疾病"网络包含2个药物,6种活性成分,相应靶标765个,相关疾病595种。关键靶点涉及前列腺素内过氧化物合酶2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ等,关键疾病涉及精神分裂症、阿尔茨海默病和炎症等。GO富集分析包含GO条目1 285个,其中生物过程相关条目973个,主要涉及小分子代谢、细胞代谢等方面;分子功能相关条目196个;细胞组成相关条目116个。KEGG通路富集分析包含KEGG通路16条,主要涉及神经活性受体-配体相互作用、PPAR信号通路和谷氨酸能突触等。结论:本研究结果初步验证了"水牛角-珍珠母"药对的基本药理作用及其机制,并为进一步深入揭示其作用机制奠定了良好基础。

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。

珍珠母中和胃酸酸量的测定

目的 :珍珠母中和胃酸酸量进行测定。方法 :采用酸碱中和法 ,37℃水浴放置 1h。结果 :测得 1g珍珠母能中和浓度为 0 .1mol· L-1盐酸溶液 145.34 m L,每次 2 g,日服 3次 ,几乎中和人体内 1d全部分泌的胃酸。结论 :珍珠母是一种有效的中和胃酸的天然药物 ,用药量也应改为 95版药典的 1/ 5～ 1/ 3。

珍枣胶囊治疗阴虚火旺型老年失眠患者33例临床研究

目的观察珍枣胶囊治疗老年阴虚火旺型失眠患者的临床疗效和安全性。方法将66例老年阴虚火旺型失眠患者随机分为治疗组和对照组各33例。治疗组服用珍枣胶囊,每日1次,每次1.9g;对照组服用舒眠胶囊,每日1次,每次2.0g;两组患者睡前30min口服,疗程4周。通过多导睡眠图监测,观察治疗前后两组患者总睡眠时间、睡眠潜伏期时间、觉醒次数和非快速眼动睡眠各分期时间并记录两组患者中医证候积分。治疗后评价临床疗效和中医证候疗效,并观察不良反应。结果治疗组总有效率为87.88%,对照组为81.82%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);中医证候疗效比较,治疗组总有效率为90.90%,对照组为75.76%,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者中医证候积分均比治疗前明显下降(P<0.05),治疗组治疗后中医证候积分明显低于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者总睡眠时间、睡眠潜伏期时间、觉醒次数和非快速眼动睡眠各分期时间均较治疗前明显改善(P<0.05或P<0.01);治疗组睡眠潜伏期时间、觉醒次数、入睡期时间和中度+深度睡眠期时间改善明显优于对照组(P<0.05)。两组患者均未发现不良反应。结论珍枣胶囊治疗老年阴虚火旺型失眠患者疗效确切,安全可靠,其可以调整患者的睡眠结构、增加总睡眠时间和缩短睡眠潜伏期时间。