海洋链霉菌MA12的次级代谢产物及抗真菌活性研究

对一株海洋放线菌Streptomyces sp.MA12进行次级代谢产物的研究和体外抗真菌活性测试,采用MCI中压柱色谱、硅胶柱色谱、SephadexLH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱(HPLC)等方法对发酵产物进行分离和纯化,综合运用质谱(MS)和核磁共振(NMR)等波谱学方法进行结构解析和鉴定。从放线菌Streptomyces sp.MA12发酵产物中分离鉴定出3种化合物,分别是trienomycin A(化合物1)、trienomycin B(化合物2)和ansatrienin B(化合物3)。抗菌活性测试发现,化合物3对3株白色念珠菌(标准敏感白色念珠菌SC5314,临床分离耐氟康唑白色念珠菌901,实验室基因编辑耐氟康唑白色念珠菌816)有明显抑制作用,MIC值分别为4、8、4μg·mL^(-1)。从该海洋放线菌中发现了安莎三烯类化合物,并首次报道了其对氟康唑耐药真菌的抑制活性,研究结果丰富了海洋微生物的次级代谢产物种类,可为新型抗真菌药物的研发提供科学参考。

海洋放线菌S-216菌株鉴定及其抗真菌抗生素合成条件研究

海洋放线菌Ｓ－２１６系从厦门杏林湾海泥中分离获得，根据该菌株在高氏合成一号培养基上的生长特征，列入链霉菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）黄色类群；其形态、培养特征、生理生化特性与微白黄链霉菌（Ｓ．ａｌｂｉｄｏｆｌａｖｕｓ）相似，但又有明显区别；该菌全细胞水解液中含ｌ－二氨基庚二酸、甘氮酸、丙氨酸、无门冬氨酸．菌体含有特征性半乳糖、葡萄糖和核糖，ＤＮＡ中的Ｇ＋Ｃ克分子含量为７５．２ｍｏｌ．该菌株能产生专一性较强的抗真菌抗生素，对白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ）、新型隐球酵母（Ｃｒｙｐ－ｔｏｃｏｃｃｕｓｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、烟曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ）等十多种真菌都具有不同程度的抑制作用，但对细菌无效；能产生几丁质酶．故认为是微白黄链霉菌一新变种，定名为微白黄链霉菌海洋变种（Ｓ．ａｌｂｉｂｏｆｌａｖｕｓＶａｒ．ｍａｒｉｎａ，）在发酵培养基Ａ．接种量１０％，发酵时间９６ｈ，为合成抗生素最佳条件．

海洋放线菌I_(10)菌株发酵产物抗菌活性及其初步分类鉴定

Ⅰ10菌株是从渤海海水中分离得到的1株放线菌。为了测定Ⅰ10菌珠发酵产物的抗菌活性,以13种病原真菌、3种病原细菌为供试菌,采用抑制菌丝生长速率法和双层平板法,对Ⅰ10菌株发酵液进行了室内杀菌活性测定和盆栽试验,并对其分类地位进行了初步鉴定。结果表明,Ⅰ10菌株发酵液对13种供试病原真菌的菌丝生长抑制率在80％以上的占到76．92％,对3种供试病原细菌的抑菌圈直径达到18 mm以上;Ⅰ10菌株发酵液原液对小麦白粉病的保护和治疗效果分别为99．57％和75．53％。稳定性研究发现,Ⅰ10菌株连续转接10代,其培养特征和产生活性物质性能均表现稳定,第10代菌株发酵液的杀菌活性与出发菌株无明显差异。根据其形态特征、培养特征、生理生化特征,初步鉴定该菌珠为不吸水链霉菌(S．ahygroscopicus)的一个变种。

拓展微生物药源活性新菌株资源的新方法探索

在药源微生物活性产物研究中,分离得到的绝大多数菌株往往因无活性而被大量闲置或被选择销毁,造成前期投入的极大浪费和菌株资源开发利用效率严重低下。因此,如何将大量无活性菌株有效转化成活性菌株从而拓展药源微生物资源已成为重要研究课题。本课题组近几年一直在探索开展海洋来源无活性野生菌株的活性化转化与新产活性产物研究,并在无活性放线菌和真菌相关研究中取得了较好进展。本文简要归纳介绍包括尚未详细报道的新近进展在内的部分研究结果。

海洋弗氏链霉菌HNM0089抗真菌活性成分研究

为了从海洋微生物中寻找农药先导化合物,本研究通过16S rRNA基因序列分析对具有抗真菌活性的海洋放线菌HNM0089的种属进行鉴定,并对其抗真菌的活性成分进行研究。结果表明:海洋放线菌HNM0089被鉴定为弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)。利用高分辨质谱、一维和二维核磁波谱技术,将其主要活性成分鉴定为星形孢菌素(Staurosporine)。该化合物对芒果炭疽病菌、水稻稻瘟病菌、香蕉枯萎病菌、薯蓣炭疽病菌和橡胶炭疽病菌均有抑制活性,具有开发成农用抗菌素的潜力。