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Alendronate affects osteoprotegerin/receptor of activator of nuclear factor κB-ligand expression in human marrow stroma cells in vitro 被引量:1
1
作者 Jian-zhong Wang,Kun-zheng Wang,Zhi-bin Shi,Yu-qiang Ji,Ming-yu Zhang Department of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital,Medical School of Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710004,China 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 SCIE CAS 2009年第4期230-233,共4页
Objective To evaluate the effect of alendronate on osteoprotegerin(OPG)and receptor of activator of nuclear factor κB-ligand(RANKL)expression in human marrow stroma cells(hMSCs)in vitro.Methods hMSCs were isolated fr... Objective To evaluate the effect of alendronate on osteoprotegerin(OPG)and receptor of activator of nuclear factor κB-ligand(RANKL)expression in human marrow stroma cells(hMSCs)in vitro.Methods hMSCs were isolated from human marrow,cultured in vitro,and randomly divided into two groups:alendronate group,hMSCs culture fluid containing 1×10-7mol/L alendronate;control group,no special treatment but culturing hMSCs in DMEM.Two weeks after treatment,the expressions of OPG and RANKL were evaluated by RT-PCR and Western blot.Results hMSCs became uniform spindle-shaped fibroblasts.As cells proliferated,they formed colonies and showed whirlpool arrangement.After one week’s treatment,hMSCs in alendronate group had reduced processes and gradually showed disc shape,which did not happen in control group but kept fibroblast shape and just increased in density.In RT-PCR,the ratio of OPG/RANKL in alendronate group and control group was 8.77±1.16 and 4.58±1.27,respectively.In Western blot,the ratio of OPG/RANKL in alendronate group and control group was 2.58±0.47 and 1.52±0.32,respectively.The ratio of OPG/RANKL was higher in alendronate group than in control group(P<0.01).Conclusion Alendronate enhances OPG expression and inhibits RANKL expression of hMSCs in vitro. 展开更多
关键词 ALENDRONATE marrow stroma cell OSTEOPROTEGERIN receptor of activator of NF-κB-ligand
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High expression of human clotting factor IX cDNA in the bone marrow stroma cells of hemophilia B patient
2
作者 卢大儒 邱信芳 +1 位作者 郑冰 薛京伦 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1995年第16期1374-1377,共4页
Hemophilia B, a serious bleeding disorder, is an inherited X chromosome-linked diseasecaused by the deficiency or inactiveness of human clotting factor IX (FIX). The conven-tional clinical treatment of plasma infusion... Hemophilia B, a serious bleeding disorder, is an inherited X chromosome-linked diseasecaused by the deficiency or inactiveness of human clotting factor IX (FIX). The conven-tional clinical treatment of plasma infusion is expensive and associated with a high risk 展开更多
关键词 HUMAN CLOTTING factor RETROVIRAL vector BONE marrow stroma cellS gene transfer.
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食蟹猴骨髓基质干细胞体外诱导分化的实验研究 被引量:13
3
作者 李钢 柯以铨 +3 位作者 姜晓丹 徐如祥 王伟 邹雨汐 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期956-958,W004,共4页
为观察食蟹猴骨髓基质干细胞 (BMSC)体外培养及诱导分化情况 ,分离食蟹猴的BMSC ,以神经干细胞培养液和分化诱导因子进行体外培养和诱导分化。结果发现 ,分离得到的食蟹猴BMSC能在体外培养中增殖、分化 ,这些具有克隆能力的BMSC能表达... 为观察食蟹猴骨髓基质干细胞 (BMSC)体外培养及诱导分化情况 ,分离食蟹猴的BMSC ,以神经干细胞培养液和分化诱导因子进行体外培养和诱导分化。结果发现 ,分离得到的食蟹猴BMSC能在体外培养中增殖、分化 ,这些具有克隆能力的BMSC能表达神经干细胞特异性抗原Nestin,并能进一步诱导分化出胶质细胞样细胞和神经元样细胞 ,免疫细胞化学检测可见有GFAP和NSE抗原表达。提示灵长类BMSC是多分化潜能细胞 ,具有较强的自我更新和多分化能力 ,在适当的诱导分化条件下可形成具有神经系细胞 (神经元和神经胶质细胞)特征的细胞 ; 展开更多
关键词 诱导分化 实验研究 骨髓基质细胞 细胞培养 体外培养 免疫细胞化学法
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用组织工程方法修复山羊胫骨骨缺损的实验研究 被引量:10
4
作者 王珂 裴国献 +2 位作者 陈滨 金丹 魏宽海 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期485-487,共3页
制备组织工程用山羊胫骨骨缺损模型 ,研究用组织工程的方法修复山羊胫骨骨缺损的可行性。2 7只中国青山羊制备单侧胫骨中段 2 0mm的骨膜与骨缺损 ,7孔钢板内固定 ,随机分 3组 :空白组不进行植入处理 ;对照组 (CHAP组 )单纯植入羟基磷灰... 制备组织工程用山羊胫骨骨缺损模型 ,研究用组织工程的方法修复山羊胫骨骨缺损的可行性。2 7只中国青山羊制备单侧胫骨中段 2 0mm的骨膜与骨缺损 ,7孔钢板内固定 ,随机分 3组 :空白组不进行植入处理 ;对照组 (CHAP组 )单纯植入羟基磷灰石 (CHAP) ;实验组 (CHAP/BMSc组 )植入CHAP与骨髓基质细胞 (BMSc)的复合物。术后 4、8、12周放射学检查X线片光密度指数比值、组织学方法评价各组骨缺损修复情况 ,12周CHAP/BMSc组与CHAP组做压应变与三点弯曲实验 ,评价骨缺损修复后的生物力学性质。结果显示 ,术后4、8、12周X线片光密度指数比值空白组无明显变化 ,CHAP组低于CHAP/BMSc组 (P <0 0 5 ) ;组织学切片显示CHAP/BMSc组成骨较CHAP组早、多 ;12周三点弯曲实验载荷、弯曲应力CHAP/BMSc组高于C组 (P <0 0 5 )。提示山羊胫骨 2 0mm骨与骨膜缺损不能自行修复 ,可满足骨组织工程大动物实验需要 ;CHAP与BMSc复合修复骨缺损在成骨时间、成骨量与质量上均优于单纯CHAP。 展开更多
关键词 组织工程 山羊 胫骨骨缺损 实验研究 生物医学工程 珊瑚羟基磷灰石 骨髓基质细胞
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复方活血汤对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响 被引量:21
5
作者 刘文励 黄伟 +2 位作者 何美冬 孙汉英 肖侃艳 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期354-355,共2页
目的:研究常用活血化瘀中药对急性放射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响。方法:小鼠接受8GY60Coγ射线照射后立即腹腔注射100%复方活血汤液0.2ml,每天2次,连续6天,第7天取股骨骨髓制备有核细胞(bonem... 目的:研究常用活血化瘀中药对急性放射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响。方法:小鼠接受8GY60Coγ射线照射后立即腹腔注射100%复方活血汤液0.2ml,每天2次,连续6天,第7天取股骨骨髓制备有核细胞(bonemarrowcell,BMC)悬液,按长期骨髓细胞培养技术,第12天计数成纤维细胞集落形成单位(fibroblastcolonyformingunit,CFU-F),第28天观察培养的基质细胞层对正常小鼠BMC的粘附能力。结果:正常小鼠骨髓培养的基质细胞层粘附正常小鼠BMC的能力为67.8±17.2%,复方活血汤组为55.8±10.5%,差异无显著意义(P>0.05);对照组为47.7±13.6%,显著低于正常组(P<0.02)。结论:常用活血化瘀中药能增强急性放射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能。 展开更多
关键词 放射损伤 基质细胞 骨髓 复方活血汤
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梯度降解软骨支架材料应力刺激下与骨髓基质干细胞复合三维培养的实验研究 被引量:12
6
作者 曲彦隆 杨卫良 +1 位作者 孟祥文 王毅 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期772-774,共3页
[目的]探讨梯度降解软骨支架材料(GDABM)的细胞生物相容性及诱导后的骨髓基质干细胞(MSCs)在三维支架上培养的生物学行为.[方法]将MSCs与复合转化生长因子-β(TGF-β)的胶原共同混合后培养于三维软骨支架材料上,离心管内培养,10次... [目的]探讨梯度降解软骨支架材料(GDABM)的细胞生物相容性及诱导后的骨髓基质干细胞(MSCs)在三维支架上培养的生物学行为.[方法]将MSCs与复合转化生长因子-β(TGF-β)的胶原共同混合后培养于三维软骨支架材料上,离心管内培养,10次/d,以600 r/min离心10 min.8 h、24 h、72 h、4 d、7 d进行倒置显微镜形态学观察、扫描电镜观察.1~8 d采用MTT法检测细胞增殖活性,描绘生长曲线.通过3H-Proline掺入实验了解材料对MSCs胶原合成的影响.[结果]8 h后MSCs在支架材料上呈球型黏附生长,4 d后MSCs在支架材料上呈菱形或多角型复层生长,包裹于大量细胞外基质内.GDABM组细胞第3 d进入对数增长期,倍增时间为4.75 d,而单纯软骨细胞培养对照组倍增时间为5.25 d.GDABM组与单纯软骨细胞培养对照组比较胶原合成略低,3H-Proline掺入值有显著性差异(P<0.05),说明经诱导MSCs的细胞胶原分泌功能仍低于软骨细胞.[结论]经TGF-β诱导和低转速离心应力刺激后的MSCs向软骨细胞功能分化,复合细胞因子梯度降解软骨支架材料具有良好的生物相容性,可作为MSCs的有效载体应用于组织工程化软骨的构建. 展开更多
关键词 基质干细胞 生物材料 生物相容性 组织工程
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外周血干细胞移植前后骨髓微环境细胞粘附分子的临床研究 被引量:6
7
作者 陈幸华 王苹 +2 位作者 刘林 张曦 彭贤贵 《重庆医学》 CAS CSCD 2003年第10期1283-1285,共3页
目的 初步探讨外周血干细胞移植预处理对骨髓造血微环境影响的分子机制。方法 采用流式细胞仪检测了 4 2例患者接受外周血干细胞移植预处理前及移植后 30、90、1 80d骨髓微环境基质细胞表达血管细胞粘附分子 (VCAM 1 )、纤维连接素 (... 目的 初步探讨外周血干细胞移植预处理对骨髓造血微环境影响的分子机制。方法 采用流式细胞仪检测了 4 2例患者接受外周血干细胞移植预处理前及移植后 30、90、1 80d骨髓微环境基质细胞表达血管细胞粘附分子 (VCAM 1 )、纤维连接素 (Fn)、层粘素 (Ln)和Ⅳ型胶原 (ColⅣ )等细胞粘附分子水平的变化。结果 移植前接受单纯化疗方案预处理的患者 (简称单化组 )骨髓基质细胞表达VCAM 1、Fn、Lm和ColⅣ的水平以移植后 90d最低 ;移植前接受化疗 +全身放疗方案预处理的患者 (简称化放组 )骨髓基质细胞表达VCAM 1、Fn、Lm和ColⅣ的水平以移植后 30d最低 ;至移植后 1 80d ,单化组和化放组患者骨髓基质细胞表达VCAM 1、Fn、Lm和ColⅣ等指标仍未恢复到移植预处理前的水平 ,且放化组骨髓基质细胞表达上述细胞粘附分子水平的恢复过程较单化组缓慢。结论 造血干细胞移植前接受大剂量化 /放疗预处理后骨髓基质细胞表达细胞粘附分子的功能障碍可能与移植后某些患者造血功能恢复过程缓慢有关。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 外周血 骨髓基质细胞 细胞粘附分子
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人血管内皮生长因子165基因真核表达载体的构建及表达 被引量:5
8
作者 高全文 董绍忠 +2 位作者 陈希哲 陈琰 杨连甲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期32-34,共3页
目的:构建人血管内皮生长因子165(hVEGF165)的真核表达载体,并在大鼠骨髓基质细胞中进行表达。方法:利用基因克隆技术,将原核克隆载体pSP73中的目的基因VEGF165用 BamH I和Xho I双酶切后,再克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组质粒pc... 目的:构建人血管内皮生长因子165(hVEGF165)的真核表达载体,并在大鼠骨髓基质细胞中进行表达。方法:利用基因克隆技术,将原核克隆载体pSP73中的目的基因VEGF165用 BamH I和Xho I双酶切后,再克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组质粒pcDNA3.1-VEGF165。对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定。通过脂质体介导,用重组质粒转染SD大鼠骨髓基质细胞,然后以G418筛选阳性克隆,用免疫细胞化学鉴定。结果:经酶切鉴定及基因测序证实,重组体中已插入目的基因片段VEGF165。免疫细胞化学证实,重组质粒转染的骨髓基质细胞中有VEGF165基因的表达。结论:成功地构建真核表达载体pcDNA3.1-VEGF165,并在骨髓基质细胞中得到表达,为将表达VEGF基因的骨髓基质细胞作为骨组织工程的种子细胞的可能性提供了实验依据。 展开更多
关键词 基因表达 人血管内皮生长因子165 基因 真核表达载体 构建
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体外培养的大鼠骨髓基质细胞的生物学特性 被引量:8
9
作者 袁志萍 刘宏伟 刘斌 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期93-95,共3页
目的 :研究体外培养的大鼠骨髓基质细胞的生物学特性及其成骨细胞表型特征。方法 :分离大鼠四肢长骨骨髓基质细胞 ,常规和矿化培养液培养 ,测定细胞生长曲线 ,碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、重组人骨形成蛋白 -2 (rhBMP -2 )及矿化培... 目的 :研究体外培养的大鼠骨髓基质细胞的生物学特性及其成骨细胞表型特征。方法 :分离大鼠四肢长骨骨髓基质细胞 ,常规和矿化培养液培养 ,测定细胞生长曲线 ,碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、重组人骨形成蛋白 -2 (rhBMP -2 )及矿化培养液对骨髓基质细胞碱性磷酸酶 (ALP)活性的影响 ,观察矿化结节的形成。结果 :大鼠骨髓基质细胞群体倍增时间 (DT )为 66.1h ;在矿化液培养条件下细胞DT为 5 0 .3h。bFGF和rhBMP -2均不同程度增加骨髓基质细胞碱性磷酸酶的活性。矿化液有较明显的增加骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性的作用 ,用茜素红染色法显示较多的深红色矿化结节 ;常规培养条件下大鼠骨髓基质细胞生长虽呈现密集单层 ,没有矿化结节形成。结论 :大鼠骨髓基质细胞在体外可以稳定传代培养 ,在矿化培养液诱导培养条件下可以向成骨细胞分化 ,bFGF和rhBMP -2有助于骨髓基质细胞表现成骨细胞表型特征 ,提示骨髓基质细胞在骨移植研究领域有重要的应用价值。 展开更多
关键词 大鼠 骨髓 基质细胞 体外培养 生物学特性
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bFGF基因修饰的骨髓基质细胞复合多孔矿化Bio-Oss胶原修复下颌骨缺损的实验研究 被引量:5
10
作者 李春明 杨春艳 +2 位作者 王鑫 刘宝林 焦晓辉 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期470-474,共5页
目的:观察经bFGF基因转染的兔骨髓基质细胞复合多孔矿化Bio-Oss骨胶原修复下颌骨缺损的效果。方法:标准成年新西兰白兔12只随机分3组,单纯Bio-Oss骨胶原组,BMSCs+凝胶+Bio-Oss骨胶原组,bFGF基因转染BMSCs+胶原+Bio-Oss骨胶原组于术后8... 目的:观察经bFGF基因转染的兔骨髓基质细胞复合多孔矿化Bio-Oss骨胶原修复下颌骨缺损的效果。方法:标准成年新西兰白兔12只随机分3组,单纯Bio-Oss骨胶原组,BMSCs+凝胶+Bio-Oss骨胶原组,bFGF基因转染BMSCs+胶原+Bio-Oss骨胶原组于术后8周取材,行肉眼、组织学观察骨缺损的修复情况。结果:单纯Bio-Oss骨胶原材料组:缺损区大量的未吸收的支架材料周围可见有类骨样组织;BMSCs+凝胶+Bio-Oss骨胶原材料组:缺损区大量的未吸收的支架材料周围可见有大量间充质细胞聚集、分化,有较幼稚的编织骨形成;bFGF基因转染BMSCs+凝胶+Bio-Oss骨胶原材料组:支架材料周围,大量新骨形成,新骨表面可见活跃的成骨细胞,部分区域有成熟骨组织形成,并有新生的毛细血管形成。结论:Bio-Oss骨胶原有较强的诱导成骨能力;Bio-Oss骨胶原为载体的自体骨髓基质细胞移植能有效修复骨缺损,是骨组织工程良好的支架材料;兔骨髓基质细胞体外表达人bFGF基因,并且经基因修饰的组织工程骨修复骨缺损效果最佳。 展开更多
关键词 BFGF基因 骨髓基质细胞 Bio—Oss骨胶原 移植 下颌骨
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骨髓基质细胞复合多孔矿化Bio-Oss骨胶原移植修复下颌骨缺损的实验研究 被引量:5
11
作者 李春明 杨春艳 +2 位作者 刘宝林 王太和 于开涛 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期352-355,共4页
目的:探讨以多孔矿化Bio-Oss骨胶原为载体的自体骨髓基质细胞移植修复下颌骨缺损的效果.方法:标准成年新西兰白兔16 只随机分2 组,一组抽取骨髓基质细胞进行培养,矿化诱导后,细胞悬液与凝胶混匀滴入Bio-Oss胶原骨块中, 静置于37℃,50 m... 目的:探讨以多孔矿化Bio-Oss骨胶原为载体的自体骨髓基质细胞移植修复下颌骨缺损的效果.方法:标准成年新西兰白兔16 只随机分2 组,一组抽取骨髓基质细胞进行培养,矿化诱导后,细胞悬液与凝胶混匀滴入Bio-Oss胶原骨块中, 静置于37℃,50 ml/L的CO2培养箱中温育4~6 h,加入DMEM成骨条件培养液培养.然后修复下颌骨极限骨缺损.另组单纯Bio-Oss胶原块,修复下颌骨极限骨缺损.分别于术后8 周和12 周取材,分别行大体、X射线、组织学观察骨缺损的修复情况.结果:术后12 周,(1)BMSC+凝胶+Bio-Oss胶原组,基本上由新生骨组织所修复.(2)单纯Bio-Oss胶原组大部分由纤维组织填充,周围骨形成明显,中央少量骨痂形成.结论:(1)Bio-Oss骨胶原有较强的诱导成骨能力;(2)Bio-Oss骨胶原为载体的自体骨髓基质细胞移植能有效修复骨缺损,是骨组织工程良好的支架材料. 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 移植 BIO-OSS骨胶原 下颌骨
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髓核细胞与骨髓基质细胞移植对受损椎间盘退变的影响 被引量:3
12
作者 赵献峰 刘浩 +3 位作者 丰干均 梁涛 陈宪 黄林 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期472-477,共6页
目的探讨移植兔骨髓基质细胞(MSC)和髓核细胞(NPC)对受损椎间盘退变的影响及影像学特点。方法采用原代细胞培养法获取并扩增NPC及MSC。2岁龄新西兰白兔随机分为3组:盐水注射组3只,MSC移植组6只,NPC移植组6只,L3/4、L4/5、L5/6椎间盘进... 目的探讨移植兔骨髓基质细胞(MSC)和髓核细胞(NPC)对受损椎间盘退变的影响及影像学特点。方法采用原代细胞培养法获取并扩增NPC及MSC。2岁龄新西兰白兔随机分为3组:盐水注射组3只,MSC移植组6只,NPC移植组6只,L3/4、L4/5、L5/6椎间盘进行髓核穿刺抽吸后,分组注入盐水、MSC和NPC。未处理的L2/3、L6/7、L7/S1椎间盘作为对照组采集数据。术前及术后4、6、8周,相同条件下摄取腰椎侧位X光片,运用I mage-pro plus6.0测量椎间盘高度指数(DHI)计算%DHI;Merge eFil m Workstation测量MRI T2像椎间盘信号强度并进行标准化(ST2WI),计算%ST2WI。结果两细胞移植组较之盐水组均能够有效的抑制损伤椎间盘进行性的高度丢失、骨性终板破坏、骨赘形成、细胞外基质丧失等。NPC组第6周%DHI为(74.31±2.59)%,第8周为(79.29±2.53)%,两者间差异有统计学意义(P<0.05),提示8周时NPC组椎间盘高度恢复;且第8周时NPC组与MSC组的%DHI之差异无统计学意义。%ST2WI数据显示第8周时NPC组T2信号强度高于MSC组〔(70.63±7.60)%vs(54.32±7.92)%,P<0.05〕,提示NPC组细胞外基质的合成可能超过MSC组。结论NP及MSC两种细胞移植能够有效避免椎间盘损伤后发生的进行性的退变过程。8周后NPC组较MSC组显示出更强的基质合成能力,椎间盘高度及含水量出现恢复的迹象。提示外源性NPC能够良好的适应受体椎间盘环境,并发挥相应的细胞外基质分泌功能。 展开更多
关键词 椎间盘 细胞移植 影像学 髓核细胞 骨髓基质细胞
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成年大鼠骨髓基质干细胞诱导分化为神经元样细胞不同方法比较的研究 被引量:7
13
作者 叶民 陈生弟 +2 位作者 陆国强 梁梁 刘卫国 《中国神经科学杂志》 CSCD 2004年第4期275-280,共6页
目的  研究成年大鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)诱导分化为神经元样细胞不同的方法 ,寻找它向神经细胞分化的最佳条件。 方法  取纯度较高的BMSCs,通过不同的神经营养因子诱导法和抗氧化剂诱导法 ,进行抗巢蛋白 (nestin)、神经元特异烯醇... 目的  研究成年大鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)诱导分化为神经元样细胞不同的方法 ,寻找它向神经细胞分化的最佳条件。 方法  取纯度较高的BMSCs,通过不同的神经营养因子诱导法和抗氧化剂诱导法 ,进行抗巢蛋白 (nestin)、神经元特异烯醇化酶 (NSE)、神经胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、酪氨酸羟化酶 (TH)免疫细胞化学染色 ,观察相应的阳性细胞数。结果 诱导第 3天A组 (EGF :表皮生长因子 ,bFGF :碱性成纤维细胞生长因子 ,RA :全反式维甲酸 ) ,B组 (GDNF :胶质细胞系源性神经营养因子 ,BDNF :脑源性神经营养因子 ) ,C组 (EGF ,bFGF ,GDNF ,BDNF和RA)的Nestin阳性细胞数较多 ,其中以C组最多 ,而D组 (抗氧化剂 )Nestin阳性细胞数少于前三组。A ,B ,C组的NSE ,GFAP染色阳性细胞数较D组少 ,但D组有部分细胞发生死亡。诱导第 7天A ,B ,C组的NSE ,GFAP阳性细胞数较第 3天时明显增多 ,C组最多 ,B组其次 ,Nestin阳性细胞数比例较第 3天时明显减少。而D组的NSE ,GFAP阳性细胞数少于其第 3天时 ;C组诱导成神经细胞比例较高 ,阴性对照组和空白对照组极少或无阳性细胞。此外 ,神经营养因子诱导法生成神经样细胞的比例都多于胶质样细胞。 结论  抗氧化剂诱导法分化诱导快 ,而神经营养因子诱导法分化诱导效率高 。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 诱导分化 神经元 神经营养因子 抗氧化剂
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Sox9基因真核表达载体的构建及其诱导大鼠骨髓基质细胞定向分化为骨骺干细胞 被引量:3
14
作者 胡伟华 陈安民 +3 位作者 郭风劲 李锋 黄晖 张伟凯 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期931-934,共4页
[目的]从永生化骨骺干细胞中克隆Sox9基因并构建真核表达载体,并探讨Sox9诱导骨髓基质细胞向骨骺干细胞分化的可能性。[方法]以RT-PCR方法获得Sox9全长,插入pGEM-TEasy克隆载体中,测序正确后与pEG-FP-IRES2表达载体酶切后连接,复合质粒... [目的]从永生化骨骺干细胞中克隆Sox9基因并构建真核表达载体,并探讨Sox9诱导骨髓基质细胞向骨骺干细胞分化的可能性。[方法]以RT-PCR方法获得Sox9全长,插入pGEM-TEasy克隆载体中,测序正确后与pEG-FP-IRES2表达载体酶切后连接,复合质粒以脂质体法转染骨髓基质细胞,观察转染效率,Sox9和FGFR-3的表达。流式细胞术鉴定细胞表型,MTT法检测细胞增殖活性。[结果]成功的完成了Sox9的扩增和表达载体的构建,重组载体转染骨髓基质细胞后能检测到Sox9、FGFR-3的表达,增殖活性与骨骺干细胞无异。[结论]成功构建了Sox9真核表达载体,其能诱导骨髓基质细胞分化为骨骺干细胞并具有其特性。 展开更多
关键词 骨骺干细胞 SOX9 骨髓基质细胞 转染
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VEGF_(121)转染对诱导后血管内皮细胞增殖的影响 被引量:3
15
作者 范仲凯 谷艳婷 +5 位作者 曹阳 张明超 于德水 陈毅 王岩峰 李长有 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期628-631,共4页
目的探讨VEGF基因转染对VEGF诱导后血管内皮细胞生物学功能的影响,为组织工程血管构建提供血管内皮细胞的可能性。方法应用VEGF体外诱导兔骨髓间充质干细胞定向诱导分化成血管内皮细胞后,再通过脂质体介导的方法将pCDI/VEGF121转染分化... 目的探讨VEGF基因转染对VEGF诱导后血管内皮细胞生物学功能的影响,为组织工程血管构建提供血管内皮细胞的可能性。方法应用VEGF体外诱导兔骨髓间充质干细胞定向诱导分化成血管内皮细胞后,再通过脂质体介导的方法将pCDI/VEGF121转染分化后的血管内皮细胞,通过MTT及流式细胞仪检测转染前后细胞的增殖与凋亡能力。结果诱导培养2周后兔骨髓基质细胞转化为血管内皮细胞,VEGF基因转染血管内皮细胞后表达VEGF蛋白,转染后细胞增殖能力增加,凋亡能力下降。结论转染VEGF是促进VEGF诱导血管内皮细胞增殖的有效途径,可望为组织工程血管构建提供血管内皮细胞衬层,为人工血管内皮化开辟一种新的途径。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 骨髓基质细胞 基因转染 血管内皮细胞 增殖
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多细胞因子诱导成年鼠骨髓基质细胞向神经细胞分化的实验研究 被引量:3
16
作者 王海燕 徐如祥 +4 位作者 罗深秋 姜晓丹 蔡颖谦 邹雨汐 杜谋选 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 2004年第2期77-81,共5页
目的观察大鼠骨髓基质细胞(rBMSCs)的生长特点及诱导条件下分化成神经细胞的能力,并对其机制进行初步探讨。方法以密度梯度离心分离骨髓基质细胞,在神经干细胞培养液中培养,采用四唑盐(MTT)法观察在培养液中添加碱性成纤维细胞生长因子(... 目的观察大鼠骨髓基质细胞(rBMSCs)的生长特点及诱导条件下分化成神经细胞的能力,并对其机制进行初步探讨。方法以密度梯度离心分离骨髓基质细胞,在神经干细胞培养液中培养,采用四唑盐(MTT)法观察在培养液中添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)对BMSCs增殖的影响;观察添加脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)和维甲酸(RA)对rBMSCs的诱导分化情况;采用免疫组织化学法(ABC)检测诱导后的细胞表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经元核蛋白(NeuN)和胶质原性纤维酸性蛋白抗体(GFAP)等特异性标志物的情况;以流式细胞分选确定神经元的比例。结果bFGF和EGF能在体外促进rBMSCs增殖,BDNF、NGF和RA能诱导rBMSCs来源的神经干细胞(NSCs)表达NSE、GFAP等特异性标志物。结论EGF、bFGF、BDNF、NGF、RA及适宜的培养液可使rBMSCs定向转化为NSCs,获得足够的目的细胞,进而分化为神经元样和神经胶质样细胞。 展开更多
关键词 细胞因子 骨髓基质细胞 神经细胞 细胞分化 大鼠 细胞培养 免疫组织化学 流式细胞仪
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天然珊瑚和同种异体脱钙骨基质作为骨组织工程支架的细胞相容性研究 被引量:3
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作者 马东洋 薛振恂 +2 位作者 刘兰忠 陈富林 杨维东 《西北国防医学杂志》 CAS 2004年第1期16-18,共3页
目的 :评价天然滨珊瑚 (NC)和同种异体脱钙骨 (DBM)的细胞相容性 ,探讨其作为骨髓基质细胞的支架载体构建骨组织工程的可行性。方法 :应用体外复合骨髓基质细胞培养法 ,通过倒置显微镜和MTT比色法 ,并对测量结果进行统计学分析 ,研究生... 目的 :评价天然滨珊瑚 (NC)和同种异体脱钙骨 (DBM)的细胞相容性 ,探讨其作为骨髓基质细胞的支架载体构建骨组织工程的可行性。方法 :应用体外复合骨髓基质细胞培养法 ,通过倒置显微镜和MTT比色法 ,并对测量结果进行统计学分析 ,研究生物材料对骨髓基质细胞的形态、增殖的影响。结果 :两种材料对骨髓基质细胞形态均未见不良影响 ;NC在各培养时间对骨髓细胞增殖没有明显影响 (P >0 .0 5) ,DBM对骨髓细胞增殖均起促进作用 (P <0 .0 1)。结论 :两种材料均具有良好的细胞相容性 。 展开更多
关键词 珊瑚 脱钙骨基质 细胞相容性 骨髓基质细胞 骨组织工程
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转化生长因子-β1基因治疗对种植体周骨质疏松的影响 被引量:4
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作者 曹颖光 王戎 +3 位作者 宋珂 熊宗强 杜建明 王华均 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期335-338,共4页
目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因治疗对种植体周围骨质疏松和骨缺损的影响。方法构建pCDNA3.1(+)-TGF-β1真核表达载体,转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并与聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)体外黏附。制备骨质疏松大鼠股骨植入钛种植体... 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因治疗对种植体周围骨质疏松和骨缺损的影响。方法构建pCDNA3.1(+)-TGF-β1真核表达载体,转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并与聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)体外黏附。制备骨质疏松大鼠股骨植入钛种植体模型,将24只Wister大鼠随机分为实验组、对照组和空白对照组,实验组为在种植体周骨缺损处植入TGF-β1基因修饰BMSCs复合PLGA;对照组为BMSCs复合PLGA。术后第4和8周取标本行免疫组化和组织学分析,观察种植体周骨组织中TGF-β1的表达和组织学变化。结果术后第4周,实验组骨缺损区的TGF-β1表达较对照组和空白对照组明显;第8周实验组骨缺损区被新生骨充填,骨质较对照组和空白对照组明显改善。结论TGF-β1基因修饰BMSCs体内回植后,可在种植体周围骨组织内表达TGF-β1,并可以影响种植体周骨缺损的修复和骨质疏松状况。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 骨髓间充质干细胞 基因治疗 种植牙
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大鼠骨髓基质细胞的体外培养和鉴定 被引量:5
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作者 刘坤 罗军 +1 位作者 娄繁 马艳 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2009年第11期875-879,共5页
目的探讨SD大鼠骨髓基质细胞(MSCs)的体外培养方法,为细胞治疗研究提供大量MSCs。方法取幼年SD大鼠股骨及胫骨骨髓,全骨髓法培养至第4代,观察各代生长情况;同时制备第3代细胞爬片行细胞鉴定。结果第1~3代细胞接种后4h即有细胞贴壁,部... 目的探讨SD大鼠骨髓基质细胞(MSCs)的体外培养方法,为细胞治疗研究提供大量MSCs。方法取幼年SD大鼠股骨及胫骨骨髓,全骨髓法培养至第4代,观察各代生长情况;同时制备第3代细胞爬片行细胞鉴定。结果第1~3代细胞接种后4h即有细胞贴壁,部分细胞呈梭形改变,24h时可见细胞呈长梭形或多边形;成群生长的细胞呈漩涡状或平行排列,3~4d时即可达85%~90%融合;收获细胞平均密度为(3.4~3.6)×104个/cm2,台盼蓝染色拒染率为95%~97%,1~3代细胞总产量分别为4.08×106个、2.44×107个及2.85×108个。第4代细胞生长较前减慢,需5~6d达85%~90%融合;收获细胞平均密度3.0×104个/cm2,拒染率为95%,细胞总产量为1.42×109个,较原代细胞扩增近2000倍。第3代细胞免疫组化鉴定结果:CD105+细胞占61.9%,CD44+占45.4%,CD29+占16.8%,CD45+占8.2%,CD31+占13.7%,CD34+占8.3%,CD11b+占1.5%。结论全骨髓培养适合于MSCs体外的大量扩增,可满足细胞治疗研究的需要。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 成人干细胞 细胞培养 免疫组织化学
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地甘口服液对环磷酰胺损伤小鼠骨髓CFU-F的影响 被引量:2
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作者 梁毅 鲁新华 +1 位作者 陈如泉 喻东姣 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 1999年第12期567-568,共2页
观察了地甘口服液对环磷酰胺损伤小鼠骨髓基质细胞形成的影响。将小鼠经尾静脉注射环磷酰胺(每次 10 0 mg/ kg· d-1,连续 3天 ) ,后予地甘口服液 号 (浓度 10 0 % ) 、 号 (浓度 2 0 0 % ) ,灌服 ,每日 2次 ,连续 7天。第 8天处... 观察了地甘口服液对环磷酰胺损伤小鼠骨髓基质细胞形成的影响。将小鼠经尾静脉注射环磷酰胺(每次 10 0 mg/ kg· d-1,连续 3天 ) ,后予地甘口服液 号 (浓度 10 0 % ) 、 号 (浓度 2 0 0 % ) ,灌服 ,每日 2次 ,连续 7天。第 8天处死小鼠 ,取股骨 ,制备骨髓细胞悬液 ,并计数之后 ,建立小鼠骨髓长期培养体系 ,第 1 4天计数成纤维细胞集落形成单位 ( CFU- F) 。结果表明 ,正常小鼠 CFU-F为2 0 .6 5± 2 .96 ,模型鼠为 1 1 .3 8± 4 .93 ,两者有显著性差异 ( P<0 .0 1) ;地甘口服液 号和 号 CFU-F分别为 1 8.0 5± 1 .4 1和 1 8.79± 1 .88,均与正常组无差异 ( P>0 .0 5 ) 。故得出地甘口服液有益气养血之功效 ,可促进环磷酰胺损伤小鼠 CFU-F的形成。 展开更多
关键词 环磷酰胺 骨髓基质细胞 地甘口服液 CFU-F 小鼠
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