半夏曲传统制作工艺沿革探讨

该文对半夏曲传统制作工艺的沿革进行了探讨。宋代半夏曲的制作方法包括半夏姜汁制饼与制饼后发酵两种,以半夏姜汁制饼为主流。金元时沿袭宋代工艺,半夏曲的应用具有一定的局限性。明代医家对半夏曲的炮制机理进行了阐发,认为“片则刀峻,曲则力柔。”明代李时珍对半夏饼与半夏曲的混淆问题进行了澄清,韩懋的《韩氏医通》收载了5首半夏曲方,对半夏曲配方的扩充具有划时代的意义。清代医家在继承《韩氏医通》半夏曲方的基础上,总结为韩飞霞制曲十法;当时的半夏曲与神曲的制作工艺相互影响。建国后,半夏曲的地方炮制经验深受清代影响,地方炮制规范逐渐趋同。该文同时对半夏曲炮制工艺中的“半夏”与“曲”孰重孰轻、半夏的前期处理、半夏饼与半夏曲的概念区分、面粉用量与添加时机、神曲粉的加入、白矾在半夏曲中的作用等问题进行了思考。

高效液相荧光色谱法同时测定六神曲中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A

目的建立一种用免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱同时检测六神曲中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A的方法。方法样品采用60%乙腈超声提取,免疫亲和柱净化,采用XBridge^(®)Phenyl苯基色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈和0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,光化学衍生仪衍生,通过切换荧光波长检测。结果黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A标准曲线的线性范围分别为0.006~0.108、0.500~2.500和0.202~1.009 ng,6种毒素的线性关系在0.9994以上,检出限分别为1.2、100.0和40.3 ng/ml,平均加标回收率为73.2%~92.3%,相对偏差为2.1%~5.4%。结论该方法具有专属性强、操作方便等特点,能够有效用于六神曲中3种毒素的同时检测和安全质量控制。

不同发酵工艺对浙产六神曲中5种成分含量变化的影响

目的建立同时测定浙产六神曲中苦杏仁苷、香草酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素的高效液相色谱法,并考察不同发酵条件对浙产六神曲中5个成分含量变化的影响。方法对同一批次六神曲样品,通过设置不同的发酵条件(温度为25℃、30℃、35℃,相对湿度为60%、70%、80%、90%)进行发酵并分别取样。色谱柱为Chrom Core AR C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈为流动相A,0.08%磷酸水溶液为流动相B,进行梯度洗脱;流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长220 nm。分析苦杏仁苷、香草酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素5种成分的变化。结果苦杏仁苷、香草酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素在选定质量浓度范围内线性关系、重复性、稳定性良好,平均加样回收率均达到要求。浙产六神曲最佳发酵工艺参数为温度30℃,相对湿度80%,发酵时间为3 d。结论本研究建立的方法操作简便、结果准确、重复性及稳定性均较好,可用于浙产六神曲的质量控制。浙产六神曲最佳发酵工艺参数为温度30℃,相对湿度80%,发酵时间为3 d。

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定六神曲中4种烷基间苯二酚

建立固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定六神曲中5-十五烷基间苯二酚(AR-15)、5-十七烷基间苯二酚(AR-17)、5-十九烷基间苯二酚(AR-19)和5-二十一烷基间苯二酚(AR-21)4种烷基间苯二酚含量.分析采用Brownless Spp C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),流动相:A相为5 mmol/L乙酸铵溶液,B相为甲酸∶乙腈溶液(体积比为1∶1000),采用梯度洗脱方式,体积流速为0.5 mL/min.柱温为35℃,使用电喷雾离子源,负离子扫描,多反应监测模式.结合主成分分析与正交偏最小二乘法判别分析,寻找影响六神曲炮制前后质量的主要化学成分.结果表明,4种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9926),平均加样回收率在99.36%~101.36%之间,相对标准偏差(RSD)为0.85%~2.10%.通过化学模式识别分析发现造成主要差异的质量差异物是AR-21.方法简便可行,稳定可靠,可用于炮制不同六神曲的质量控制.

中药六神曲发酵研究现状分析

中药六神曲具有健脾和胃、消食调中的功效,广泛应用于治疗脾胃虚弱和儿童食积。然而,传统的六神曲发酵方式存在一定的隐患。本文对六神曲发酵工艺、化学成分、酶活力、微生物群落变化及药理作用等研究进行了综述和分析,旨在为构建科学合理的质控方法提供参考。

麸炒六神曲炮制工艺及质量标准研究

目的优选麸炒六神曲的炮制工艺并制定其质量标准。方法以颜色、气味为评价指标,浸出物为参考,通过炒制温度、炒制时间、麸皮加入量为考察因素,通过单因素试验优选麸炒六神曲炮制方法。通过对山西省内3家企业生产的15批生六神曲进行炮制,对15批麸炒六神曲的性状、显微鉴别、水分、灰分、酸不溶灰分、浸出物进行检测,通过对测定结果进行研究,制定相应的质量标准。结果麸炒六神曲的最佳炮制工艺为麸炒温度为130℃、炒制时间为12 min、麸皮用量为10%,经过上述炮制工艺得到的麸炒六神曲性状表面浅棕色至黄棕色、质坚脆、有麸香气,浸出物为22.26%。建立了麸炒六神曲的质量标准,性状表面棕黄色,质坚脆,有麦麸香气;易断,断面不平整,可见褐色残渣及发酵后的空隙。显微鉴别为麦麸的果皮表皮细胞紧密排列呈不规则片状;淀粉粒呈球形,层纹明显;苦杏仁和赤小豆的石细胞黄色或白色,胞腔黑色;赤小豆的种皮栅状细胞胞腔含淡红棕色物,光辉带明显。水分不得过10.0%;灰分不得过5.0%;酸不溶灰分不得过2.0%;浸出物不得少于17%。结论成功建立了麸炒六神曲的炮制工艺及质量标准,可为麸炒六神曲饮片生产及质量控制提供参考。

“炒六神曲”质量标准研究

目的建立科学合理的“炒六神曲”质量控制标准。方法通过对10批六神曲炒制后的性状、显微鉴别、水分、灰分、浸出物等进行评估,制订“炒六神曲”质量控制标准。结果确定“炒六神曲”的性状,将处方中麦麸的果皮细胞、非腺毛,赤小豆的种皮表皮栅状细胞、苦杏仁的石细胞作为“炒六神曲”的显微特征,规定水分不得超过8.0%,总灰分不得超过5.0%,浸出物不得超过5.0%。结论本质量控制方法可靠,可用于“炒六神曲”质量标准的建立,填补吉林省内“炒六神曲”质量标准空白,为确保科学生产、保证监管有效、合理临床应用奠定基础。

LC-MS法结合化学计量学法探讨发酵时间对六神曲中化学成分的影响

目的采用LC-MS法结合化学计量学分析法探究不同发酵时间六神曲中葫芦巴碱、没食子酸、原儿茶酸、原儿茶醛、隐绿原酸、苦杏仁苷、香草酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、东莨菪内酯、阿魏酸、紫云英苷、槲皮素、槲皮苷、异绿原酸B、木犀草素、芹菜素的含量,并筛选差异性标志物。方法该药物的分析采用Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃。采用主成分分析(PCA)对六神曲进行分类和评价,再借助正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)法筛选出差异性标志物,并通过聚类热图进行区分。结果发酵过程中,葫芦巴碱、原儿茶醛、苦杏仁苷、芦丁、金丝桃苷、东莨菪内酯、紫云英苷质量分数呈下降趋势,没食子酸、原儿茶酸、香草酸、木犀草素、芹菜素质量分数呈上升趋势,隐绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、槲皮素、槲皮苷、异绿原酸B质量分数存在波动;PCA结果显示,不同发酵时间六神曲可聚类为4个发酵阶段;OPLS-DA结果表明,原儿茶酸、苦杏仁苷、金丝桃苷、东莨菪内酯、阿魏酸、异绿原酸B为差异性标志物;以18种已知化学成分、6个差异性标志物含量为指标,分别进行聚类热图分析,聚类结果一致。结论该方法稳定可靠,可用于区分不同发酵时间六神曲。

六神曲化学成分及抗氧化活性研究

目的研究六神曲Massa Medicata Fermentata的化学成分及其抗氧化活性。方法六神曲乙醇提取物采用硅胶、MCI色谱柱、HPLC方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用清除DPPH、ABTS与超氧阴离子自由基能力评价六神曲总酚的抗氧化活性。结果从中分离得到21个化合物。六神曲中总酚含量约为1.68 mg/g,其对DPPH、ABTS与超氧阴离子自由基的IC_(50)分别为37.30、116.39μg/mL、1.17 mg/mL。结论除化合物6、9外,其余均为首次从该植物中分离得到。六神曲总酚具有良好的抗氧化活性。

中草药六神曲中微生物群落结构与发酵条件优化

研究旨在提高中草药六神曲饲料添加剂的应用效果。采用3因素(发酵温度、发酵湿度、料液比)3水平正交试验对发酵条件进行优化,以淀粉酶和蛋白酶活性为指标,结合极差分析法确定最优发酵条件和该条件下微生物群落结构与功能变化。结果表明,六神曲饲料添加剂发酵的最优条件为:温度37℃、湿度80%、料液比1.50 g/mL,该条件淀粉酶活性为31.70 mg/(min·g),蛋白酶活性为302.75μg/(min·g)。发酵过程中细菌类始终是主导菌群,变形菌门(Proteobacteria)为优势菌门,在发酵前期较为丰富;发酵中期和后期,厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度逐渐升高为优势菌门。欧文氏菌属(Erwinia)、克罗诺杆菌属(Cronobacter)始终为各发酵阶段优势菌属。真菌群落结构上,子囊菌门(Ascomycota)为优势菌门,曲霉属(Aspergillus)为优势菌属,均在发酵后期含量最高。新陈代谢功能在发酵前期相对丰度最高,腐生型真菌在全部发酵样品中占比均最高。研究表明,中药六神曲饲料添加剂的规范化生产可推广应用。

响应面法优化六神曲发酵工艺

目的:以淀粉酶活性为响应值,采用响应面法优化六神曲的发酵条件。方法:在赤小豆(氮源)添加量、发酵温度、发酵时间单因素的基础上,采用Box-Behnken响应面设计试验,从而确定最佳发酵参数。采用Design-Expert V8.0.6.1软件进行回归模型分析,最后得出六神曲最佳发酵工艺参数。结果:最佳发酵条件为赤小豆(氮源)添加量2.6 g/100 g麸面、发酵温度32℃、发酵时间3 d。通过比较预测值以及验证试验值发现,预测值酶活40.80mg/(min·g)与验证酶活42.61 mg/(min·g)相对误差小于5%,该模型可以更好的预测六神曲发酵后所含的淀粉酶活性。结论:用响应面分析法所得的参数可为六神曲生产过程中的发酵条件提供科学依据,具有一定的实际意义。

不同产地神曲甲醇提取物对巨噬细胞及小肠上皮细胞活性的影响

目的比较不同产地神曲对小鼠RAW264.7单核-吞噬细胞及大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞活性的影响。方法不同产地神曲样品甲醇提取,氮吹仪下挥干溶剂,加入空白培养基配成1g/ml母液,无菌条件下加DMEM空白培养基使母液稀释成浓度分别为800、400、200、100、0μg/ml,对大鼠小肠上皮细胞株IEC-6细胞及小鼠RAW264.7单核-吞噬细胞进行给药培养,检测二者增殖率、巨噬细胞吞噬能力及其所分泌TNF-α的水平。结果不同神曲样品在低给药浓度(100、200μg/ml)时均有促进IEC-6细胞及RAW264.7细胞增殖的作用,尤其以中国药材公司采集的神曲炒品(Z炒神曲)效果较显著(P<0.05)。对于巨噬细胞吞噬能力及其所分泌的TNF-α水平,各组间虽差异无统计学意义,但仍以Z炒神曲在较低浓度时优于其他组别。结论不同产地神曲对小肠上皮IEC-6细胞及巨噬细胞RAW264.7活性有促进作用,以从中国中药公司采集的Z炒品效果较优。

酵母培养物、枯草芽孢杆菌和木瓜蛋白酶对保育猪生长性能、营养物质表观消化率和粪便微生物数量的影响

为了探究从神曲(MMF)和酸面团中分离到的酿酒酵母的作用,本试验研究了新型的复合酵母培养物(YC)、枯草芽孢杆菌(BSK)、木瓜蛋白酶(PE)对保育猪生长性能、营养物质表观消化率和粪便微生物数量的影响。选择平均体重为(15.70±0.26)kg的断奶仔猪225头,随机分为5组,每组3个重复,每个重复15头猪。对照(CT)组饲喂基础饲粮,YC组饲喂基础饲粮+5 g/kg YC,BSK组饲喂基础饲粮+2×1011CFU/kg BSK,PE组饲喂基础饲粮+0.3 g/kg PE,复合(YP)组饲喂基础饲粮+5 g/kg YC+0.3 g/kg PE。预试期5 d,正试期30 d。结果表明:1)YP组末重、平均日增重显著高于CT组(P<0.05),料重显著低于CT组(P<0.05);YC组末重高于CT、BSK、PE组(P>0.05)。各组间平均日采食量无显著差异(P>0.05)。YC、PE和YP组的腹泻率均显著低于CT和BSK组(P<0.05)。2)YC、BSK、PE、YP组总能和干物质的表观消化率显著高于CT组(P<0.05),YC组粗蛋白质、磷的表观消化率显著低于YP组(P<0.05),YC组酸性洗涤纤维、钙的表观消化率显著低于其他各组(P<0.05)。各组间有机物和粗脂肪的表观消化率无显著差异(P>0.05)。3)YC、YP组粪便乳酸菌数量和乳酸菌/大肠杆菌显著高于其他各组(P<0.05),粪便大肠杆菌数量显著低于其他组(P<0.05)。由此可知,新型YC可以改善仔猪生长性能和肠道生态环境,YC和PE的联用对仔猪生长也有积极作用。

神曲及其炮制品中5-羟甲基糠醛的含量分析

测定神曲及其炮制品中5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量,探讨其色泽与5-HMF含量的相关性,指出控制神曲质量的影响因素。收集了19份市售的生神曲及其炮制品样品,日光下人眼观察色泽;采用色差仪测定色度值和色差值;烘干法测定水分含量;建立了高效液相色谱法(HPLC)并用于测定5-HMF的含量。生神曲和炒神曲的色泽呈黄白、灰白色,焦神曲的色泽为黄褐色。生神曲与炒神曲的色差值基本一致,焦神曲的色差值明显升高。19份样品中的水分含量均在10%以下。5-HMF的含量,生神曲样品中是3.933~163.6μg/g,平均为48.68μg/g;炒神曲中是6.116~128.2μg/g,平均为51.08μg/g;焦神曲中是25.91~162.3μg/g,平均为69.36μg/g。生神曲、炒神曲两类的色泽基本一致,焦神曲的色泽明显加深;相对应的,5-HMF的平均含量在生神曲、炒神曲中基本一致,在焦神曲中明显升高。色泽与5-HMF含量之间具有完全对应的相关性。首次采用色差仪测定了神曲及其炮制品的色泽,并首次在其中检测到了5-HMF,建议在原料、配比、微生物、发酵工艺、炮制工艺、质量标准等多个方面展开全过程的质量控制。

神曲、半夏曲、红曲治疗高脂血症经验——仝小林三味小方撷萃

神曲、半夏曲和红曲是仝小林教授治疗高脂血症的常用配伍。临床辨治高脂血症应抓住脾虚不运,邪实结聚的核心病机,标本兼顾。治疗时当辛开苦降,消膏降浊,调和脾胃寒热。在临床用量方面,神曲常用9~15 g以健脾和胃,消导调中;半夏曲常用 9~15 g以通泄消导,燥湿化痰而协助病理产物排除体外;红曲作为降血脂的靶药,其临床用量范围为3~15 g以健脾燥湿,消膏降浊。现代药理研究表明,以上三味药可促进胃肠动力,调节肠道菌群,降低总胆固醇、三酰甘油、低密度胆固醇。

UPLC法测定六神曲发酵过程中噻嗪双酮苷及噻嗪二酮含量

目的建立UPLC法测定六神曲发酵过程中噻嗪双酮苷及噻嗪二酮的含量测定方法,监测六神曲的发酵过程、控制六神曲的质量。方法采用UPLC法测定不同发酵天数六神曲样品中噻嗪双酮苷及噻嗪二酮的含量。结果六神曲发酵过程中噻嗪双酮苷含量降低,而噻嗪二酮的含量呈先升高后降低的趋势。噻嗪双酮苷和噻嗪二酮分别在1.40~140μg/ml(r=0.999 1)和1.19~119μg/ml(r=0.999 1)内与峰面积成良好线性关系,平均回收率分别为99.5%和101.6%。结论 UPLC法作为测定六神曲发酵过程中噻嗪双酮苷及噻嗪二酮含量的一种手段,方法简便准确、重现性和稳定性较好,适于作为控制六神曲质量的方法,为六神曲的质量评价和控制提供了科学依据。

高效液相色谱-荧光检测法同时测定六神曲(炒)中4种黄曲霉毒素

目的:建立高效液相色谱-荧光检测法同时测定六神曲(炒)中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的含量。方法:样品采用70%甲醇作为提取溶剂,经免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生后,通过荧光检测器测定其中黄曲霉毒素的含量。结果:黄曲霉毒素B_(1)的线性范围为0.0104~0.0520 ng(r=0.9998)、黄曲霉毒素B_(2)的线性范围为0.0038~0.0190 ng(r=0.9991)、黄曲霉毒素G_(1)的线性范围为0.0108~0.0540 ng(r=0.9991)、黄曲霉毒素G_(2)的线性范围为0.0038~0.0190 ng(r=0.9993),线性关系良好,回收率为80.54%~91.37%,RSD≤3.5%。结论:该方法操作简便,灵敏度高、重复性好、结果准确,且10批次六神曲(炒)中均检测出黄曲霉毒素G_(2)的含量,可用于六神曲(炒)中黄曲霉毒素的测定。

六神曲传统制作工艺考证

造酱黄法与造曲法为六神曲制作两大主流方法,在明清时期并行不悖。曲饼以“握得聚,扑得散”为要诀,包裹的材料有苘麻叶、楮叶、纸等,覆盖药饼的材料有麦秸、黄荆、青蒿等,包裹与覆盖的目的不是单纯为了增加温度与湿度;六神曲需干燥久陈,时间以1年为宜。通过实践操作传统造曲法、《本草纲目》造酱黄法、《齐民要术》黄蒸法结合《全国中药炮制规范》《卫生部药品标准·中药成方制剂》中六神曲的制作方法提出,六神曲传统制作工艺尚待研究的内容有比较罨曲法、风曲法与造酱黄法对神曲成分的影响,优选包裹与覆盖曲饼的材料,神曲切制时间等。

小剂量血脂康和普伐他汀长期调脂作用的比较

观察小剂量血脂康，普伐他汀对高血脂病人的长期调脂作用。方法；多中心，１９５例高血脂病人，分血脂康组「每晚睡前口服血脂康２粒」与普伐他汀组治疗６个月，比较治疗前，后血脂水平变化及两组间差异，用方差分析法检验及Ｘ＾２检验。结果；血脂康与普伐他汀治疗６个月时，ＴＣ下降１６％及１７％，ＴＧ下降１３％及１５％，ＬＤＬ下降２３％及２１％；

HPLC测定六神曲中青蒿素、芦丁和槲皮素含量

本研究建立了高效液相色谱法测定六神曲中青蒿素、芦丁和槲皮素成分含量的方法。采用AcchromXAquaC18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm)。测定青蒿素含量时,用柱前衍生方法,以乙腈-水(60∶40)为流动相;流速0.8 mL/min,紫外检测波长为260 nm,柱温35℃。测定芦丁和槲皮素含量时,以甲醇-0.4%磷酸(50∶50)为流动相;紫外检测波长分别为360 nm(芦丁)和280 nm(槲皮素);流速0.8 mL/min;柱温30℃。结果青蒿素、芦丁和槲皮素可以达到较好的分离。在选定质量浓度范围内线性关系良好(青蒿素R2=0.9991,芦丁R2=0.9994,槲皮素R2=0.9995),平均回收率分别为98.6%,101.4%和97.2%,相对标准偏差(RSD)分别为1.65%,0.91%和1.46%(n=5)。该方法简便准确,重复性和稳定性较好,为六神曲的质量评价和控制提供了科学依据。