MN血型的高分辨率熔解曲线基因分型——附1例罕见Mc血型的鉴定

目的建立MN血型高分辨率熔解曲线（HRM）基因分型方法,进行MN血型基因分型,并探讨罕见Mc血型的鉴定方法。方法收集2013年1月—6月澳大利亚红十字血液服务中心献血者全血标本150例,提取基因组DNA,并利用HRM基因分型方法对MN血型进行基因分型;对HRM分型结果中出现的变异曲线标本,采用直接测序法对GYPA基因外显子2进行测序分析,确证其基因型;同时,利用单克隆抗-M及抗-N通过血清学方法检测待检标本的表型。结果150例标本中有149例标本的HRM基因分型结果与表型一致;只有1例标本的熔解曲线形态与3个对照标本均不同,提示在扩增片段存在变异位点,血清学结果显示该标本表型为M＋N-;但是,该标本的GYPA基因外显子2测序结果显示其在M抗原的1个特异性SNP位点中存在杂合突变：c.7172GT〉AG,p.Gly5Glu,根据该结果判断其基因型为MMc。结论HRM基因分型方法能对MN抗原进行准确分型。Mc是介于M与N抗原之间的1种抗原,能与大多数抗-M及少数抗-N反应,因此,仅利用1种抗-M和抗-N试剂容易导致Mc抗原的漏检,基因分型方法更容易发现Mc血型。