间接荧光抗体法快速诊断海兰褐蛋鸡J亚群禽白血病的研究

某地区海兰褐蛋鸡发生肿瘤性传染病 ,经临床症状和病理学检查 ,在肝、脾、肾、卵巢、输卵管、肺、骨髓、腺胃、肠道等可见胞浆内充满球形嗜酸性颗粒的骨髓瘤细胞 ,呈灶状或弥漫性的分布。该变化是禽骨髓细胞瘤病病理学的特征性变化 ,具有证病意义。经用特异性抗 J亚群白血病病毒囊膜蛋白 gp85的单克隆抗体的免疫组化方法 ,在病料组织切片上检出病毒抗原 ,从而确诊为蛋鸡 J亚群禽白血病。本研究是尝试用间接荧光抗体法来快速诊断该病。采用特异性抗 J亚群禽白血病病毒囊膜蛋白 gp85单克隆抗体对组织触片作间接荧光抗体试验 ,检测 J亚群禽白血病病毒抗原。在骨髓、食管、肌肉、输卵管、肾都出现了范围广而且很明亮的荧光 ;肝、肺、脾的荧光较为明亮 ;心脏的荧光较弱 ,但清晰可见。表明在病料组织中存在特异性病毒抗原。

博尔纳病病毒抗原免疫的杂交瘤细胞系的评价

目的评价博尔纳病病毒(BDV)抗原免疫的杂交瘤细胞系的产生抗体能力与抗体特异性。方法随机抽取2株由BDV抗原免疫的杂交瘤细胞系H1和H2,通过体内和体外方法制备单克隆抗体,通过间接免疫荧光、免疫印迹和间接酶联免疫吸附3种试验方法对制备的抗体进行特异性鉴定及效价测定。结果杂交瘤细胞系H1和H2可以产生一定效价的单克隆抗体,并对BDV的P24和P40抗原具有特异性。结论由杂交瘤细胞系H1和H2产生的单克隆抗体可以用于检测BDV特异性抗原。

单克隆抗体 M26～32 腹水有效免疫球蛋白的亚类及等电点的分析

单克隆抗体杂交瘤细胞株Ｍ２６～３２的高滴度腹水，用ＭｏｎｏＱ阴离子交换树脂层析柱进行纯化，并用培养的恶性疟原虫和食蟹猴疟原虫抗原片对纯化后的各管作免疫荧光测定（ＩＦＡ）。对纯化后单抗的有效万分进行Ｉｇ亚类检测和等电聚焦电泳分析，结果证实Ｍ２６～３２单抗的有效成分为ＩｇＭ，等电点（ＰＩ）为４．７～４．８５。

核酸杂交和McAb－IFA快速检出鉴定白纹伊蚊体内登革热病毒的研究

本文报道用实验感染和自然叮咬吸血感染带毒的雌性白纹伊蚊，用克隆的Ｄｅｎ．Ｖ－ｃＤＮＡ探针作斑点杂交检测蚊体内病毒ＲＮＡ和Ｄｅｎ．ｖ－ＭｃＡｂ－ＩＦＡ检查蚊头压片的病毒抗原。探针检出病毒ＲＮＡ的时间分别为实验感染后第２ｄ，自然叮咬吸血后第１ｄ。ＭｃＡｂ－ＩＦＡ检出病毒抗原的时间分别为实验感染后第３ｄ，自然叮咬后第２天。从登革热监测点中，检出Ｂ组虫媒病毒的存在，提示早期检出蚊虫携带病毒水平，可预测Ｂ组虫媒病毒的潜在流行或暴发流行趋势。这些结果显示ＮＨＡ和ＩＦＡ可直接检出蚊体内Ｄｅｎ．ｖ，但前者优于后者，方法简便，无需要昂贵仪器，适用于现场，流行病学调查和临床标本检测。

H5亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备和鉴定

采用高致病性禽流感病毒(HPAIV)H5N1亚型A/Duck/Zhenjiang/11/00(DZJ/1100)毒株作为免疫原,免疫8周龄BALB/C雌性小鼠,三次加强免疫后取脾细胞与SP2/0细胞融合,用表达的重组核蛋白(NP)包被ELISA的方法检测筛选,阳性细胞克隆经有限稀释法克隆培养,最后获得H5亚型特异性的单克隆抗体,抗体亚类检测结果表明该抗体亚类为IgG1型k链抗体。ELISA以及免疫荧光检测表明该抗体有良好的特异性。

抗兔病毒性出血症病毒单克隆抗体的制备

通过抗兔病毒性出血症病毒(RHDV)杂交瘤细胞株的筛选,其中一株连续克隆3次,在培养瓶中传代1个月,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定,分泌单克隆抗体(McAb)性能稳定。杂交瘤细胞株的小鼠腹水滴度为1:1600～1:3200。利用McAb腹水作一抗,经免疫荧光检测RHDV感染的细胞片,可发现细胞核内有特异性荧光颗粒,滴度为1:200。杂交瘤细胞株染色体的分析,染色体数在98±10,符合杂交瘤细胞株的特征。经琼脂扩散法对McAb亚类的分析测定结果与抗鼠IgG和IgG_3出现沉淀线。

应用单克隆抗体检测水稻细菌性条斑病菌的效果

水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas campestris pv.oryzicola)是我国南方稻区危害水稻的重要病原物之一,为国内植物检疫对象。我国学者谢关林等人曾进行过对该病菌的免疫放射法检测研究,取得较好结果。但由于标记用的同位素价格贵、衰变快,且需要复杂的测定仪器,故推广应用受到了一定限制。笔者等在研制出了针对水稻细菌性条斑病菌单克隆抗体的基础上,进行了间接酶联免疫吸附法(以下简称“间接ELISA法”)和间接免疫萤光法(以下简称“间接IFA法”)检测水稻种子是否携带细菌性条斑病菌原的研究,以期找出一条简易、有效的检测方法,现已取得较好结果。