阻断小鼠Mcl-1表达信号通路对BCG感染的影响

目的探讨下调Mcl-1表达信号通路对BCG感染的小鼠模型的影响。方法首先制备好BCG菌悬液感染BALB/c小鼠,再分别用调控Mcl-1表达的不同信号通路阻断剂腹腔注射感染小鼠模型,并同时设立对应的对照组,于处理后的1d、3d、5d、7d处死小鼠并收集腹腔巨噬细胞。应用TUNEL检测不同阻断剂在不同时间点处理后小鼠巨噬细胞凋亡率,细胞免疫化学分析不同阻断剂处理下Mcl-1的表达,HE染色和脏器指数分析不同阻断剂处理对小鼠脏器病变的影响。结果与对照组比,信号通路阻断剂处理后,BCG感染组巨噬细胞凋亡率均有不同程度的增高,其中PD98059处理组巨噬细胞凋亡率最高(F=40.621,P<0.001)。而且阻断剂PD98059处理后,巨噬细胞内BCG的菌落数量明显减少(t=3.392,P<0.001),小鼠肝、肺、脾、肾的病变程度明显减轻(F=59.24,F=811.134,F=34.091,F=9.543,P<0.05),脏器病理损伤也有所改善。结论应用阻断剂PD98059阻断Mcl-1表达信号通路可有效控制结核病的潜伏感染和持续感染。

Mcl-1表达信号通路阻断剂在H37Ra感染的小鼠模型中的作用

目的观察阻断髓样细胞白血病-1(Mcl-1)表达的信号通路对H37Ra感染小鼠的影响,从而探讨Mcl-1干预在此过程中的作用。方法制备好结核分枝杆菌H37Ra的菌悬液后,将其感染BALB/c小鼠,再用Mcl-1信号通路阻断剂AG490、PD98059、LY294002分别腹腔注射结核感染的小鼠模型,并同时设立相应的对照组。应用倒置显微镜观察巨噬细胞形态、TUNEL技术检测阻断剂应用后巨噬细胞的凋亡率、细胞免疫化学分析Mcl-1的表达、HE染色观察小鼠脏器的病理损伤变化。结果阻断剂处理后的H37Ra感染组凋亡率与空白对照组相比,均出现不同程度的升高,其中PD98059处理组凋亡率最高(P <0.05)。阻断剂PD98059处理后,H37Ra在巨噬细胞内的菌落数量明显减少,小鼠肝、肺、脾、肾的病理损害程度明显减轻(P <0.05)。结论阻断Mcl-1表达的信号通路可以显著促进结核感染的小鼠巨噬细胞的凋亡,减少结核杆菌在宿主巨噬细胞内的存活,减轻结核感染对小鼠脏器的病理损伤。而MAPK信号通路是此过程中调控Mcl-1表达的主要通路,且PD98059为其特异性抑制剂。

下调Mcl-1表达对H37Rv感染小鼠模型调控作用研究

目的用不同阻断剂下调调控抗凋亡蛋白Mcl-1表达信号通路,探讨下调Mcl-1表达对结核杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞凋亡和炎症反应的影响。方法制备结核分枝杆菌国际标准强H37Rv菌株菌悬液,感染BALB/c小鼠,再分别腹腔注射Mcl-1信号通路阻断剂AG490、PD98059、LY294002,同时设立对应的对照组。应用ELISA筛选不同阻断剂处理小鼠的最佳剂量,采用TUNEL试剂盒检测阻断剂应用后小鼠腹腔巨噬细胞凋亡率,透射电镜观察阻断剂应用后宿主巨噬细胞的形态学变化,HE染色分析应用阻断剂后小鼠肝、肺、脾、肾脏器的病理损伤情况。结果阻断剂处理H37Rv感染组小鼠巨噬细胞凋亡率与空白对照组均有不同程度的增高,其中PD98059处理组显著高于其他处理组(P<0.05);阻断剂PD98059处理组小鼠巨噬细胞感染H37Rv数量明显减少,且出现核固缩和凋亡。H37Rv感染小鼠肝、肺、脾、肾脏器出现严重病理损伤,而阻断剂应用后的病理损害程度明显减轻(P<0.05)。结论应用阻断剂下调Mcl-1的表达可促进结核杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞的凋亡,减少巨噬细胞内潜伏H37Rv数量,减轻结核感染对小鼠脏器的病理损伤。作用效果以MAPK信号通路阻断剂PD98059强于JAK/STAT和PI3K信号通路阻断剂AG490和PD98059。