苹果愈伤组织基因编辑技术的建立

基因编辑技术能够打破传统的基因突变方式,通过碱基的缺失、插入和替换等对目标基因进行定点改造,提高基因突变的效率和准确性。基因编辑技术在拟南芥、水稻和番茄等植物中应用广泛,如调控植物株型、提高抗性,但在苹果中应用还不成熟,需要进一步完善。以苹果‘Orin’愈伤组织为试验材料,基于成簇规律间隔短回文重复序列(clustered regulatory interspaced short palindromic repeat,CRISPR)基因编辑技术在愈伤组织中突变MdVPE1基因。通过测序及本生烟瞬时转化进行靶序列验证,结果表明MdVPE1基因已编辑成功。通过对野生型及MdVPE1基因编辑前后的愈伤组织接种轮纹病病原菌,发现MdVPE1基因编辑后能够提高苹果愈伤组织的抗病性。CRISPR/Cas9基因编辑技术在苹果愈伤组织中的成功应用,为在苹果中利用CRISPR/Cas9基因编辑技术研究基因功能奠定了重要基础。