愈痫灵方对KA致痫大鼠海马及颞叶皮质多药耐药基因MDR1b表达的影响

目的探讨愈痫灵方对耐药性癫痫模型大鼠海马及颞叶皮质多药耐药基因MDR1b表达的影响。方法 1造模:在脑立体定位仪引导下,海马区微量进样器注入红藻氨酸(KA)1.0μL(浓度为1.0μg/μL)点燃造模,选取发作行为级别在Racines标准Ⅳ级以上者,以丙戊酸钠及卡马西平灌胃干预14 d,再次亚惊厥剂量0.5μL KA复燃,选择再次发作级别在Ⅳ级以上或持续状态大鼠,且脑电图检测有癫痫样波发放者筛选为造模成功的耐药难治性癫痫模型鼠。2分组与处理:造模成功鼠随机分为愈痫灵干预组、拉莫三嗪对照组、模型组,另设假手术对照组、空白对照组共计5组,每组12只。分别给予愈痫灵汤剂、拉莫三嗪及同等体积的蒸馏水(2 m L/d)灌胃30 d。3标本处置与检测:采用荧光实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,分别检测海马区与颞叶皮层MDR1b的表达。结果与假手术对照组、空白对照组间比较,造模成功组海马区MDR1b的表达水平明显升高(P<0.01),颞叶皮质区差异无统计学意义(P>0.05);所有造模组的海马区MDR1b表达高于颞叶皮质,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,愈痫灵、拉莫三嗪干预后能显著降低KA致痫鼠海马区MDR1b的表达水平(P<0.05);愈痫灵方组与拉莫三嗪组间比较,海马与颞叶皮质之间差异均无统计学意义(P>0.05);各组间颞叶皮质区MDR1b表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KA造模耐药性癫痫大鼠模型海马区多药耐药基因MDR1b的表达较皮质区明显升高。愈痫灵方降低海马区MDR1b的表达,可能是其抗耐药性癫痫作用机制之一。

靶向mdr1b/mdr1a基因siRNA逆转T24/ADM多药耐药性研究

目的:研究mdr1b/a基因siRNA(small interfering RNA)逆转膀胱癌的多药耐药性。方法:设计mdr1b/a基因的siRNA,转染膀胱癌T24/ADM细胞,用RT-PCR分析mRNA的表达,Rh123分析P-gp活性,流式细胞仪检测细胞内阿霉素积累量。结果:siRNA能明显地逆转T24/ADM细胞的多药耐药,使mdr1b/a基因的mRNA表达水平下调,细胞内阿霉素积累量显著增加(P<0.05)。结论:mdr1b/a基因siRNA能够逆转膀胱癌的多药耐药性。

穴位埋药线对难治性癫痫大鼠大脑海马及皮质多药耐药基因MDR1b的影响

目的探讨穴位埋药线对难治性癫痫大鼠大脑海马及皮质中多药耐药基因MDR1b的影响。方法选用雄性SD大鼠120只,随机分为空白对照组、模型组、拉莫三嗪组、普通线组、药线组。普通线组与药线组均取大椎、肝俞(双)、血海(双)、丰隆(双)穴,先埋一侧穴位,间隔15 d后埋对侧穴位;拉莫三嗪组按照人用拉莫三嗪剂量为5 mg/(kg·d)换算灌胃大鼠,每日2次;模型组给予灌胃同等体积(2 mL/d)的蒸馏水,均干预30 d。采用荧光实时定量聚合敏链反应(RT-PCR)的方法检测多药耐药基因MDR1b在海马与颞叶皮层的表达。结果与模型组相比,药线、普通线、拉莫三嗪干预后能降低致痫大鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平(P<0.05);与空白对照组比较,模型组中致痫鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平明显升高(P<0.01);与普通线组比较,药线组明显降低致痫大鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平(P<0.05);模型组的海马区与颞叶皮质区多药耐药基因表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论埋药线逆转与降低致痫大鼠海马区及皮质区多药耐药基因的表达水平,可能是其抗癫痫生物学作用机制之一。

柴贝止痫汤及α细辛醚对难治性癫痫大鼠脑内P-gp表达及卡马西平含量的影响

目的:观察柴贝止痫汤及其入血成分α细辛醚对难治性癫痫(IE)大鼠脑内P-糖蛋白(P-gp)表达及卡马西平(CBZ)含量的影响。方法:采用侧脑室注射海人酸法建立IE大鼠模型。分为模型组、西药组、中西药组、α细辛醚+CBZ组,设假手术组,给药时间60d。以Western Blot、RT-PCR、LC-MS对比脑内海马P-gp和Mdr1b mRNA表达及脑内CBZ、10,11环氧化卡马西平(CBZE)含量。结果:模型组及西药组大鼠海马中P-gp和Mdr1b mRNA含量显著高于假手术组(P<0.05);中西药组及α细辛醚+西药组大鼠海马中P-gp和Mdr1b mRNA含量显著低于模型组、西药组(P<0.01,P<0.05)。中西药组和α细辛醚+西药组脑内CBZE含量显著高于西药组(P<0.01)。结论:柴贝止痫汤及α细辛醚可能降低IE大鼠海马Mdr1b mRNA/P-gp表达,促进CBZ和CBZE入脑,对CBZE作用突出。

大黄素对肝内胆汁淤积大鼠P-gp表达的影响

目的:探讨大黄素对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)致急性肝内胆汁淤积的保护作用及其机制。方法:采用ANIT灌胃制备大鼠急性肝内胆汁淤积病理模型,将32只大鼠随机分为正常组、正常+大黄素组、模型组和模型+大黄素组,观察各组实验动物肝功能各项生化指标和肝组织病理学改变,并采用实时荧光定量RT-PCR检测肝细胞膜转运蛋白基因多药耐药蛋白1a(mdr1a)、多药耐药蛋白1b(mdr1b)和多药耐药蛋白2(mdr2)mRNA水平的表达,Western blot方法检测肝脏P-糖蛋白(P-gp)的变化。结果:模型+大黄素组与模型组比较,TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP,TBA浓度明显降低(P<0.01或P<0.05);肝细胞变性和坏死、中性粒细胞浸润均减轻;在mRNA水平mdr1a,mdr1b,mdr2的表达均上调(P<0.01或P<0.05),P-gp表达同时也增高(P<0.05)。结论:大黄素对胆汁淤积型肝炎有保护作用,上调肝脏中与胆汁酸代谢相关的转运蛋白P-gp的表达以减少胆汁酸及其他有毒化合物在肝脏中的蓄积可能为其退黄、恢复肝脏功能的作用机制之一。