p53与HPV16、18型感染在肺鳞癌中的相关研究

目的 探讨HPV与p5 3基因突变在肺鳞癌发病中的相互作用。方法 肺癌组织标本的p5 3基因序列 5～ 8外显子突变分析应用单链构象多态性分析多聚酶链反应EB染色法 (PCR SSCP EB) ,HPV1 6、1 8型DNA相关序列的检测应用PCR法。结果 40例肺鳞癌组织标本p5 3基因突变率为 67.5 % ,其中外显子 5～ 8突变率分别为 1 7.5 %、1 2 .5 %、1 7.5 %、2 0 %。肺鳞癌组织中HPV1 6、1 8DNA相关序列的检出率为 42 .5 %。p5 3基因突变与HPVDNA序列的检出之间呈显著负相关。 结论 p5 3基因突变与HPV感染在肺鳞癌的发病过程中可能存在相互促进作用。

核糖核酸酶抑制因子在肺癌中的表达

目的通过核糖核酸酶抑制因子(ribonucleaseinhibitor,RI)基因在人肺癌及同体癌旁正常肺组织中的表达的检测,进一步探讨RI与恶性肿瘤细胞生长的关系。方法应用Westernblotting方法检测人肺癌组织中RI的蛋白表达量;应用RT-PCR的方法检测人肺癌组织中RI的mRNA的表达量。采用χ2检验(chi-squaretest)分析获得的数据,用SPSS10.0统计软件进行处理。结果人肺癌组织中RI的蛋白及mRNA的表达均明显低于同体癌旁正常肺组织。结论核糖核酸酶抑制因子(RI)在肺癌中的表达下调,肺癌的生长可能与RI表达的下调有关。

CYP1A2＊1F基因多态性与肺癌术后化疗疗效及预后的关系

【目的】探讨细胞色素P4501A2（CYP1A2）＊1F基因多态性与肺癌术后化疗疗效及预后的关系。【方法】对100例肺癌患者进行CYP1A2基因多态性检查，分析CYP1A2＊1F与肺癌术后化疗效果及预后的相关性。【结果】①100例患者，部分缓解24例，稳定44例，临床获益率为68．00％，患者CYP1A2＊1F基因型以A／A型（49．00％）为主，其次为A／C型（38．00％）；②临床荻益患者中A／A基因型所占比例略高于未获益患者，但差异无显著性（P〉0．05）；③携带CYP1A2＊IFA／A基因型患者总生存时间略高于A／C型、C／C型，但各组之间相比较差异无显著性（P〉0．05）。【结论】CYP1A2＊IF突变基因型与肺癌术后化疗效果及预后无明显相关性。

小鼠肺腺癌细胞系四株克隆化亚系的转移潜能研究

本文对小鼠肺腺癌细胞系（ＬＡ－７９５）进行单细胞克隆化培养，分离；经筛选获得具有裸小鼠体内移植自发肺转移力相异的４株克隆化亚系，说明母系确实存在转移潜能的异质性。体外实验比较此四株亚系的结果显示：癌细胞的转移潜能不仅与其细胞增殖、分裂及胞浆骨架分布的不均、紊乱程度有关（Ｐ＜０．０１），而且与其胞浆骨架聚集于胞核一侧及内源性非特异性酯酶的活性表达有关（Ｐ＜０．０１）：同时，高转移潜能亚系比低转移潜能亚系出现较低的移动性和粘连性（Ｐ＜０．０１）。提示：癌细胞的胞浆骨架分布不均、紊乱、聚集于胞核一侧及内源性非特异性酯酶的高表达，可能是高转移性癌细胞的重要生物学表型；癌细胞的体内转移力不一定与其体外移动性、粘连性呈正相关。

非小细胞肺癌上皮型钙黏蛋白mRNA的表达与分化转移和病理特征的关系

目的 研究肺癌中上皮型钙黏蛋白 (E cadherin)mRNA表达水平与肺癌病理学分级和临床分期之间的关系。方法 选择 5 4例肺癌标本、4 6例 (癌旁 )正常肺组织和 5例肺部良性结节性病变组织 ,用RT PCR方法检测标本中E cadherinmRNA的表达水平 ,根据手术、病理和影像学结果判断有无转移并确定分期 ,对E cadherinmRNA表达水平与临床变量之间的关系进行分析。结果 E cadherinmRNA在肺癌和 (癌旁 )正常肺组织中表达阳性率分别为 4 6 .3% (2 5 / 5 4 )和 4 5 .7% (2 1/ 4 6 ) ;低分化、晚期、肺门纵隔淋巴结转移的非小细胞肺癌 ,其E cadherinmRNA的表达量显著降低 (P <0 .0 5 )。结论 E cadherin与肺癌的分化、转移及病理分期有关 。

NQO1 C609T基因多态性与肺癌易感性关系的Meta分析

目的：综合评价依赖还原型辅酶Ⅰ/Ⅱ醌氧化还原酶1（ N QO1）基因C609 T多态性与肺癌易感性的关系。方法检索中国知网、万方、维普、Medline、Pubmed等数据库，收集有关 NQO1基因多态性与肺癌易感性关系的文献，并剔除不符合要求的文献，然后用 Stata12软件进行分析，计算合计的比值比（OR）及95％可信区间（CI），并评估发表偏倚。结果共有16项病例对照研究纳入分析，与野生纯合基因型（CC）相比，杂合基因型（CT）[OR（95％ CI）＝1．09（0．96～1．24）]以及突变纯合基因型（TT）[OR（95％ CI）＝1．14（0．94～1．39）]均与肺癌的发病风险无统计学意义。分层分析结果显示，在以人群为基础的病例对照研究中携带CT 基因型是肺癌的危险因素，其OR及95％ CI为1．037（1．000～1．075），CT基因型同时也是黄种人患肺癌的危险因素，其 OR值及95％C I为1．039（1．001～1．078）。结论 N QO1 C609 T基因多态性与黄种人肺癌患病风险有关。

CYP1A2 163A／C基因多态性与肺癌遗传易感性的Meta研究

【目的】探讨CYP1A2＊1F基因多态性与肺癌易感性之间的关系。【方法】收集CYP1A2 163A／C基因多态性与肺癌易感性文献6篇，累计肺癌病例1033例，对照1626例，应用Meta分析探讨CYP1A2＊1F基因多态性与肺癌易感性之间的关系。【结果】CYP1A2＊1F基因多态性中CCVSAA的OR值为1．04，95％可信区间为0．54～2．02；ACVSAA的OR值为0．85，95％可信区间为，0．61～1．20；CC＋ACVSAA的OR值为0．88，95％可信区间为0．60～1．27；CC vs AA＋AC的OR值为0．83；95％可信区间为0．54～1．28。【结论】CYP1A2＊1F基因多态性不增加肺癌的患病风险。

不同EGFR基因状态肺癌患者p53、COX-2表达及其临床意义

【目的】探讨P53蛋白、环氧化酶-2(COX-2)在不同表皮生长因子受体(EGFR)基因状态肺癌患者中的表达特征,并分析其临床意义。【方法】回顾性分析本院2017年4月至2018年4月收治的96例肺癌患者的临床资料,所有患者均经穿刺活检病理学确诊。经Taqman-ARMS法测定EGFR基因是否发生突变,并据此分成突变组、野生型组。经免疫组化法测定p53、COX-2蛋白在肺癌组织中的表达情况,比较突变组、野生型组的p53、COX-2表达情况。随访12个月,分析患者随访期间的生存、死亡情况。比较不同基因状态患者p53、COX-2表达与生存、死亡的关系,采用Logistic回归模型分析肺癌患者预后不良的危险因素。【结果】经检测提示EGFR突变42(43.75%)例,野生型54(56.25%)例。突变组的p53、COX-2阳性表达率分别为33.33%、40.48%,显著低于野生型组的57.41%、61.11%(P<0.05)。在随访期间,有29(30.21%)例死亡,67(69.79%)例生存。p53阳性患者生存率为53.33%,显著低于p53阴性患者的84.31%,其病死率也显著高于p53阴性患者(46.67%vs15.69%,P<0.05)。COX-2阳性患者生存率为56.00%,显著低于COX-2阴性患者84.78%,其病死率也显著高于COX-2阴性患者(44.00%vs5.22%,P<0.05)。Logistic回归性分析提示分化程度(中/低分化)、肿瘤分期(Ⅲ~Ⅳ)、淋巴结转移、肿瘤直径≥3cm、p53阳性、COX-2阳性是肺癌患者预后不良的危险因素(P<0.05)。【结论】EGFR基因突变的肺癌患者p53、COX-2阳性率较低,且p53、COX-2阳性患者的死亡风险更高,二者均是肺癌预后不良的危险因素。

LncRNA AC007009.1与非小细胞肺癌临床分期相关性研究

【目的】研究lncRNA AC007009.1与非小细胞肺癌(NSCLC)临床分期的相关性。【方法】选取本院2015年10月至2019年4月收治的150例NSCLC患者为研究对象。收集患者手术后标本癌组织,对其lncRNA AC007009.1进行检测,以lncRNA AC007009.1水平中位数(5.24±2.05)取临界值(5.23),将其分为lncRNA AC007009.1高表达组(n=93)与lncRNA AC007009.1低表达组(n=57),对两组患者临床病理学特征(年龄、性别、临床分期、是否存在远处转移、吸烟史、酗酒史、肿瘤大小)进行分析,并将有差异的信息纳入Logistic回归性分析,分析lncRNA AC007009.1高表达的危险因素,明确NACLC病理特征与lncRNA AC007009.1的关系。【结果】高表达组年龄>60岁、远处无转移、临床分期Ul或W期、吸烟的患者显著多于低表达组患者,差异有统计学意义(P<0.05);两组性别、酗酒史、肿瘤大小对比差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归性分析结果表明,年龄>60岁、远处无转移、临床分期I或W期、有吸烟史是lncRNA AC007009.1高表达的的危险因素。【结论】LncRNA AC007009.1与NSCLC的年龄、临床分期、远处转移、吸烟史密切相关,可作为NSCLC早期评估的重要指标,具有较高的临床应用价值。

菊花总黄酮对转染RSV的A549细胞RANTES及MCP-1表达的影响

【目的】探讨菊花总黄酮对呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，RSV）转染A549细胞诱导激活正常T细胞表达和分泌因子（regulated upon activation，normal T cell expressed and secreted，RANTES）及单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein1，MCP-1）释放作用影响。【方法】实验分为正常对照组，病毒对照组，菊花总黄酮组和巴韦林组。在人喉癌上皮细胞（Hep-2细胞）和气道上皮细胞（A549）分别加入菊花总黄酮和巴韦林的含药维持液，测定上述两种药物的最大无毒浓度；RSV转染Hep-2细胞，观察药物对RSV的病毒抑制作用；RSV转染A549细胞，ELISA法测细胞趋化因子RANTES及MCP-1含量。【结果】菊花总黄酮组50％有效率优于巴韦林组，差异有统计学意义（P〈0．05）；菊花总黄酮组RANTES、MCP-1明显降低，但高于正常细胞组，优于巴韦林组，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】菊花总黄酮能够抑制RSV活性，明显降低A549细胞释放RANTES、MCP-1，缓解患儿的呼吸道症状。

miR-125b-1基因与人肺癌临床病理特征及其预后的关系

目的研究miR-125b-1基因突变与人肺癌临床病理特征和预后的关系，探讨miR-125b-1基因在人肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用聚合酶链反应．单链构象多态性分析（PCR—SSCP）检测肺癌原发灶癌组织miR-125b-1基因突变情况。结果miR-125b-1在癌旁正常肺组织中未发现异常，在肺癌组织中存在基因突变，突变率33．1％（40／121例），miR-125b-1基因突变与癌的淋巴结转移及临床分期呈正相关（r=0．29，0．24，P〈0．01），与其他临床病理特征无关。miR-125b-1基因突变组肺癌患者的术后长期生存率显著低于高表达组（P〈0．05）。结论肺癌组织中存在着miR-125b-1基因突变，miR-125b-1基因突变在肺癌的发生发展中可能起着重要作用。

TNF与卡铂联合应用对A_(549)肺癌细胞系细胞毒作用的研究

采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验及台盼蓝活细胞拒染法观察了肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）与卡铂联合应用对Ａ５４９肺癌细胞的细胞毒作用，实验分为空白对照组，ＴＮＦ组（５００Ｕ／ｍｌ），卡铂组（４０μｇ／ｍｌ）ＴＮＦ（５００Ｕ／ｍｌ）加卡铂（４０μｇ／ｍｌ）组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验结果表明，联合用药增强了药物对Ａ５４９细胞ＤＮＡ合成的 制作用，抑制率为６９．３％，而ＴＮＦ组与卡铂组的抑制率则分别为２５．１％和５６．

重组CKB真核表达载体的构建及其稳定转染NCI—H520细胞系的建立

目的构建pEGFP—N1－CKB真核表达载体并将其稳定转染到肺鳞癌细胞NCI—H520中，建立稳定转染的NCI—H520细胞系，为后续研究奠定基础。方法以人CKBcDNA文库为模板，用PCR扩增人CKBcDNA的编码区，并将扩增的cDNA片段与载体连接后亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。重组子经酶切分析及测序鉴定后，用脂质体转染技术将其导入到人肺鳞癌细胞系NCI—H520，经G418筛选并建立稳定的转染细胞株，应用Westernblot检测转染前后该细胞株CKB基因的表达。结果pEGFP—N1－CKB经酶切鉴定及DNA测序证实序列完全正确，真核表达载体构建成功；经Westernblot检测，重组质粒转染株中CKB基因的表达水平明显高于对照组，证实CKB基因已稳定转染到NCI-H520细胞中并得到表达。结论成功构建了pEGFP—N1－CKB真核表达质粒，建立了稳定表达CKB的NCI-H520细胞系，为进一步研究CKB的生物学功能奠定了基础。

应用免疫组织化学染色S-P法检测肺癌组织中P^(53)抑癌基因产物的表达

运用免疫组织化学技术——S-P 法,检测了78例肺癌组织中的 P^(53)抑癌基因产物——P^(53)蛋白的表达。结果发现肺癌组织的 P^(53)蛋白表达率为53.8%(42/78)。从而进一步证实了 P^(53)抑癌基因突变与肺癌的关系。

应用比较基因组杂交检测肺癌染色体异常

目的探讨染色体异常在肺癌发生和发展中的可能作用。方法采用比较基因组杂交（CGH）技术分析了17例原发性肺癌新鲜组织的染色体异常。结果17例肺癌组织均检出染色体畸变（扩增和／或缺失），而且每个病例涉及多条染色体畸变。非小细胞肺癌（NSCLC）的染色体扩增和缺失平均发生率（7处／例和4．8处／例）与小细胞肺癌（SCLC）（8．4处／例和9．6处／例）差异无统计学意义，但NSCLC与SCLC的染色体扩增和缺失的发生部位及其频率有所不同，NSCLC染色体3q24—28和11q13的扩增的频率（58．3％和58．3％）显著高于SCLC（0％和0％）（P〈0．05）。结论NSCLC和SCLC在发生和发展过程中都涉及多部位染色体（多基因）异常，NSCLC与SCLC染色体扩增和缺失的发生部位及其频率有所不同可能是导致两者不同生物学特性的基础。

亚硒酸钠对体外培养的A_(549)肺癌细胞侵袭特性的影响

采用A_(549)肺癌细胞与新生鼠心脏组织块接触培养的方法,观察了亚硒酸钠对A(549)肺癌细胞体外侵袭行为的影响。结果表明,浓度为1μg/ml的亚硒酸钠显著抑制了癌细胞对心组织块的侵袭。

Lewis肺癌浸润淋巴细胞的进一步纯化及体外抗癌特点的研究

为探索进一步纯化肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）的方法及其体外抗瘤作用特点，为临床应用ＴＩＬ治疗肺癌提供依据，用不连续密度梯度离心法从接种于Ｃ５７ＢＬ／６小鼠体内的Ｌｅｗｉｓ肺癌（ＬＬＣ）瘤体中分离提取ＴＩＬ，过夜贴壁，剔除贴壁细胞后，可明显提高ＴＩＬ的纯度。纯化的ＴＩＬ在含１０００Ｕ／ｍｌＩＬ２的完全培养基中继续培养。免疫荧光表型分析发现，ＴＩＬ中ＣＤ＋４、ＣＤ＋８初为０９１±０１２，培养后为０８３±００７，体外ＴＩＬ对ＮＫ敏感的Ｌ９２９细胞有一定的杀伤作用，效靶比为２００∶１和１００∶１时的杀伤率高于５０∶１（Ｐ＜００５），表明ＬＬＣ浸润淋巴细胞体外的杀伤活性具有一定的非特异性。

肺癌患者血清Mn-SOD和CEA的对比观察

同时检测了68例肺癌、28例肺良性疾病、35例健康成人血清锰超氧物歧化酶(Mn-SOD)活力和癌胚抗原(CEA)含量,Mn-SOD 的阳性率为77.94%,诊断正确率为79.17%,均高于CEA;Mn-SOD 对各型肺癌均有较高的检出率;Mn-SOD 活力及阳性率与肺癌病期相关,晚期患者高于早期病人,12例肺癌患者 Mn-SOD 活力变化与手术切除疗效相关。结果提示;Mn-SOD 在肺癌的诊断、鉴别诊断,临床分期及疗效监测方面优于 CEA;Mn-SOD 与 CEA 联合检测优于单项检测。

NONHSA1254644在肺腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨长链非编码RNA NONHSA1254644在肺腺癌中的表达及临床意义。方法选取99例肺腺癌患者的癌组织和配对的癌旁组织并收集患者的临床资料,qRT-PCR检测其表达水平,随后分析其表达量与临床参数的关系,并采用CCK8实验探讨其对肺腺癌细胞系A549增殖的影响。结果 NONHSA1254644在肺腺癌中表达下调,其表达量与患者的分化呈正相关,过表达NONHSA1254644能抑制A549细胞的增殖。结论 NONHSA1254644参与肺腺癌的发生和发展过程。

碳铂对A_(549)肺癌细胞作用的光、电镜观察

用光镜和透射电镜观察了不同浓度碳铂对 A_(549)肺癌细胞的作用。发现碳铂对细胞外形、细上核及核仁有明显的作用,能使细胞由不规则形向圆形转变;细胞质密度增加,许多细胞中出现空泡,核内染色质在碳铂浓度低时无明显改变,浓度高时变得粗糙致密。核仁从大而不规则的网状型变成小而致密的球型。提示:碳铂对 A_(549)肺癌细胞有明显的抑制和攻击作用,其可能通过核仁的抑制而阻止癌细胞DNA 复制及细胞生长,并对细胞内某些代谢话动有抑制。