甲状旁腺激素相关蛋白对发育中的Meckel’s软骨作用的研究

目的观察SD大鼠下颌骨发育过程中甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)在Meckel’s软骨上时空的变化,初步探讨PTHrP在Meckel’s软骨发育中的意义.方法用免疫组化染色法及原位杂交染色法检测E13-19dSD胎鼠的下颌骨发育过程中,PTHrP及PTHrPmRNA在Meckel’s软骨上的表达.结果 E13-15d在Meckel’s软骨前段PTHrP蛋白强阳性表达,在细胞核、胞浆均表达,在肥大软骨细胞核上表达更明显,而且PTHrPmRNA强阳性表达的位置与PTHrP蛋白一致.E17-19d Meckel’s软骨前段骨化,E17d在临近成骨处的Meckel’s软骨软骨细胞PTHrP蛋白弱阳性表达,且位于肥大软骨细胞核内,PTHrPmRNA阴性表达.E19dPTHrP临近成骨处蛋白染色阴性表达,PTHrPmRNA阴性表达;在前段远离骨化处PTHrPmRNA,PTHrP蛋白强阳性表达,细胞核上表达明显.结论 PTHrP在Meckel’s软骨前段软骨细胞中的表达存在时空特异变化,提示PTHrP蛋白可能由SD大鼠Meckel's软骨软骨细胞合成,并作为一种自分泌因子调节Meckel’s软骨细胞的增殖和分化.

细胞凋亡在Meckel’s软骨消失中的作用研究

目的观察细胞凋亡在SD大鼠Meckel's软骨上的变化,初步探讨细胞凋亡在Meckel’s软骨和下颌骨发育中的意义.方法用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞在E13～19 dSD胎鼠的下颌骨发育过程中Meckel’s软骨中的变化.结果 E13～19 d在Meckel’s软骨嘴突软骨细胞有零星凋亡细胞出现,软骨膜上可观察到少量凋亡细胞.E17～19 d Meckel’s软骨前段骨化,近骨化处Meckel's软骨软骨细胞TUNEL染色"++".Meckel’s软骨前段远离骨化处和Meckel’s软骨中段Meckel’s软骨软骨细胞TUNEL染色"+".E17～19 d Meckel’s软骨前段和Meckel’s软骨中段Meckel’s软骨膜崩解,软骨膜细胞TUNEL染色"++",可见多个凋亡细胞聚集成团现象.骨化的Meckel’s软骨内也观察到凋亡细胞的出现,TUNEL染色"+".结论 Meckel’s软骨软骨膜细胞的消亡可能是以凋亡的形式消失,只有一部分Meckel's软骨软骨细胞通过凋亡的形式消失.

组蛋白去甲基化酶KDM2B在小鼠磨牙及颌骨发育中的时空表达

目的观察组蛋白去甲基化酶KDM2B在小鼠下颌第一磨牙及下颌骨发育过程中的时空表达模式,初步探讨其在牙齿及颌骨发育中的作用及功能。方法采用免疫组织化学方法观察KDM2B在ICR小鼠下颌磨牙及颌骨发育中的时空表达模式,并对其表达水平进行半定量分析。结果 E13天,KDM2B在成釉器中表达明显;E15～E19天,KDM2B在成釉器、牙乳头、牙囊普遍表达; P2天,KDM2B在成牙本质细胞中明显表达,在成釉细胞和牙乳头细胞内亦有表达; P14天,KDM2B在成熟的成釉细胞和近根尖区的成牙本质细胞中表达明显。在E13～E16天的过程中时,KDM2B在Meckel软骨内的表达由弱到强,在E16～E19天Meckel软骨内的表达趋于稳定,在周围的间充质细胞及新形成的骨基质内均有明显表达。结论 KDM2B可能参与早期成釉器细胞的增殖、晚期成釉细胞、成牙本质细胞的分化及釉质和牙本质基质的分泌,同时还可能与Meckel软骨细胞的退化、成骨细胞的分化以及骨基质的形成有关。

GLI1蛋白在小鼠胚胎颌面部发育中的表达

目的通过研究GLI1蛋白在小鼠胚胎颌面发育阶段的表达,探讨GLI1蛋白在颌面部发育中的功能。方法利用免疫组化技术研究GLI1蛋白在小鼠胚胎11-14.5dpc(days postcoitum)阶段颌面部的表达情况。结果发现GLI1蛋白在颌面形成阶段11-14.5 dpc时在颌面部不同来源组织中表达不同,且主要在间质表达,在Meckel's软骨中特异性表达。结论 GLI1在颌面不同来源组织中功能不同,主要参与间质来源组织功能调控。