抑制mel18表达增强桂皮醛诱导的HL60细胞分化

目的:研究下调mel18基因表达对桂皮醛(CA)诱导HL60细胞分化的影响。方法:用低浓度CA和反式维甲酸(ATRA)处理HL60细胞。用shRNAmel18质粒及对照质粒shRNALuc包装慢病毒,用病毒感染HL60细胞。低浓度CA和ATRA作用于病毒感染的HL60细胞,流式细胞术检测细胞周期和细胞表面分化抗原表达,Western blot法检测MEL18蛋白、cyclin D1、p27的表达和Akt的磷酸化水平。结果:低浓度CA和ATRA增加HL60细胞的粒细胞分化抗原CD11b表达,MEL18蛋白表达下降。shmel18病毒感染的HL60细胞(shmel18-HL60细胞)MEL18蛋白表达下降,而对照病毒感染的HL60细胞(sh Luc-HL60细胞)MEL18蛋白表达无明显变化。shmel18-HL60细胞的CD11b表达率明显增高,细胞阻滞于G1期;经低浓度CA处理后,shmel18-HL60细胞的CD11b表达率进一步增高。shmel18-HL60细胞Akt的磷酸化水平及cyclin D1表达明显下降,而p27表达则显著升高。结论:抑制mel18基因表达导致HL60细胞向成熟粒细胞方向分化,mel18基因可能通过PI3K/Akt信号途径调控cyclin D1和p27的表达,影响HL60细胞分化。而CA可能通过抑制mel18基因表达从而通过PI3K/Akt途径促进HL60细胞分化。

桂皮醛诱导K562细胞分化增强Mel18表达

目的探讨桂皮醛对慢性髓细胞白血病细胞株k562的诱导分化作用及其机制。方法以低浓度桂皮醛(30μmol/L、60μmol/L)作用于体外培养的K562细胞,流式细胞术检测桂皮醛作用前后K562细胞分化抗原和Mel18表达,westernblot检测K562细胞c-Myc表达。结果低浓度桂皮醛作用后K562细胞表面单核细胞分化抗原CD11b和CD14表达呈剂量依赖性增加,Mel18荧光明显增强,c-Myc表达明显下降。结论低浓度桂皮醛可诱导K562细胞向单核细胞分化,Mel18表达增加在桂皮醛诱导K562细胞分化中发挥重要作用。

增强Mel 18基因表达抑制U937细胞生长

目的研究Mel18基因在急性白血病细胞株U937的表达情况及其对U937细胞生长的影响。方法RT-PCR方法检测Mel18在U937细胞中的表达。用亚克隆技术构建真核表达质粒pLenti6/V5-Mel18,脂质体转染法将重组质粒pLenti6/V5-Mel18和对照质粒pLenti6/V5-LacZ分别导入U937细胞,以RT-PCR法和流式细胞仪检测U937细胞转染后Mel18的表达情况,CCK-8法检测细胞增殖活性。结果U937细胞中未检测到Mel18的表达。成功构建了Mel18的正义真核表达质粒pLenti6/V5-Mel18,并将其成功导入U937细胞。pLenti6/V5-Mel18质粒转染U937细胞24h后,流式检测Mel18蛋白的阳性表达率为(23.75±2.32)%。相对于亲代细胞,转染pLenti6/V5-Mel18组与转染pLenti6/V5-LacZ组的24h增殖活性分别为(70.86±1.08)%和(95.89±1.26)%,48h增殖活性为(46.93±1.12)%和(95.43±1.63)%,差异均有极显著性意义(P<0.01)。结论U937细胞不表达Mel18基因,上调Mel18的表达能明显抑制U937细胞的生长。

肺腺癌中MEL-18、DESTRIN和血管内皮生长因子表达及相关性

目的检测肺腺癌中MEL-18、细胞骨架蛋白(DESTRIN)和血管内皮生长因子(VEGF)表达,探讨三者表达的关系及临床意义。方法肺腺癌的组织及临床资料99例作为观察组,收集距肿物边缘>5 cm的正常肺组织70例作为对照组。采用免疫组化方法检测两组中MEL-18、DESTRIN和VEGF的表达。结果观察组中MEL-18表达的阳性率明显低于对照组,而DESTRIN和VEGF表达的阳性率均明显高于对照组,观察组中MEL-18、DESTRIN和VEGF表达的阳性率与肿瘤的最大径、淋巴结转移、脉管内癌栓、临床分期、Ki67的表达均密切相关。相关性分析显示观察组中MEL-18和VEGF的表达具有负相关性,而DESTRIN和VEGF的表达具有正相关性。结论肺腺癌中MEL-18低表达、DESTRIN和VEGF高表达,三者具有协同作用,共同促进肿瘤的发生和进展。MEL-18具有抑制血管生成的作用,DESTRIN可能具有促进血管生成的作用,二者的作用可能均通过介导VEGF的作用实现。