Elucidation of the hepatoprotective effect and mechanism of Melastoma dodecandrum Lour. based on network pharmacology and experimental validation

Objective:To systematically explore the effect and mechanism of melastomatis dodecandri herba(Melastoma dodecandrum Lour.)in the treatment of hepatitis based on network pharmacology.Method:We evaluated the hepatoprotective effects of M.dodecandrum in concanavalin A(Con A)-induced hepatitis in mice by assessing survival rate,histological analysis,serum transaminases,and related cytokines.Then the mechanism of action was predicted by a network pharmacology-based strategy.Based on the results,we measured the hepatic expression of related genes at mRNA level and proteins related to the phosphoinositide 3-kinase(PI3K)/protein kinase B(Akt)and nuclear factorkappa B(NF-кB)pathways.Results:Our study results clearly demonstrated that M.dodecandrum pretreatment significantly alleviated liver injury.This was demonstrated by an increase in survival rate,decreased severity of liver damage,and reduced serum transaminase levels compared with those in the Con A group.Moreover,M.dodecandrum significantly reduced the serum levels of tumor necrosis factor-a,interleukin-6,and interferon-g and increased the liver levels of superoxide dismutase,which indicated that M.dodecandrum exhibits anti-inflammatory and antioxidant activities.On the basis of network pharmacology,50 nodes were selected as major hubs based on their topological importance.Pathway enrichment analyses indicated that the putative targets of M.dodecandrum mostly participate in various pathways associated with the anti-inflammation response,which implies the underlying mechanism by which M.dodecandrum acts on hepatitis.Real-time fluorescent quantitative PCR analysis showed that M.dodecandrum downregulates the mRNA expression of interleukin-6,Toll-like receptor 7,interleukin-1 receptor-associated kinase-4,NF-кB and tumor necrosis factor-a in liver tissues.Western blotting showed that M.dodecandrum pretreatment protected against inflammation through activating the PI3K-Akt pathway by upregulating phosphorylated Akt(p-Akt)expression and suppressing NF-кB activation by inhibiting the phosphorylation of IKK,IkBa,and p65.Conclusion:The present work demonstrated the hepatoprotective effects of M.dodecandrum by regulating the PI3K/Akt and NF-кB pathways in Con A-induced mice,which provide insights into the treatment of hepatitis using M.dodecandrum.

畲药地稔组方对急性缺血性脑卒中预后及炎症因子的影响

目的探讨畲药地稔组方治疗急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)的疗效,及对卒中后炎症因子、神经功能恢复及90 d生活独立能力的影响。方法选取2020年1月至2022年1月符合纳入标准的AIS患者193例,随机分为2组,对照组采用常规治疗;观察组在常规治疗基础上加用畲药地稔组方。两组患者治疗后第14天检测TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度、NIHSS评分及90 dmRS评分,评估畲药地稔组方治疗的有效性;比较两组患者早期神经功能恶化、症状性颅内出血及90 d死亡率,明确畲药地稔组方的安全性。结果两组患者治疗14 d后,观察组TNF-α、IL-1β、IL-6水平低于对照组,观察组NIHSS评分低于对照组[(6.07±3.38)分VS.(7.19±3.53)分],观察组患者90 d获得生活独立能力的比例(mRs评分≤2分)明显高于对照组(52.6%VS.36.7%,P<0.05)。安全性方面,两组患者在早期神经功能恶化(9.5%VS.11.2%)、症状性颅内出血(5.3%VS.6.1%)及90 d死亡率(1.0%VS.2.0%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论畲药地稔组方在AIS后72 h内给药,有助于降低炎症因子的释放,提高AIS患者90 d生活独立能力和促进神经功能恢复,从而改善卒中预后,降低致残率。

地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响

【目的】探讨地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠脂代谢的影响。【方法】将60只SPF级雄性大鼠随机分成空白组、模型组、奥利司他组以及地菍总黄酮高、中、低剂量组,每组10只。空白组大鼠饲喂基础饲粮,其余各组饲喂高脂饲粮,奥利他司组给予60 mg/kg奥利他司,地菍总黄酮高、中、低剂量组分别给予750、500、330 mg/kg地菍总黄酮,每天以0.1 mL/10 g灌胃体积给予相应的药物,连续给药42 d,空白组、模型组给予等体积蒸馏水。记录各组大鼠的一般状况,给药结束后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及脂联素(ADP)、瘦素(LEP)水平,并统计胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);检测肝脏组织中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量;油红O染色观察肝脏病理变化;用实时荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测各组大鼠肝脏中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂联素受体2(AdipoR2)、p38的mRNA和蛋白表达量。【结果】与空白组相比,模型组大鼠血清ALT、AST活性及LEP、FINS、FBG、HOMA-IR水平极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),ADP、ISI水平极显著下降(P<0.01),肝脏中脂肪沉积较多,成功构建NAFLD大鼠模型。与模型组相比,奥利司他组、地菍总黄酮高剂量组大鼠血清ALT、AST活性以及LEP、FINS、FBG、HOMA-IR水平显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01),ADP、ISI水平极显著升高(P<0.01);奥利司他组及地菍总黄酮高、中、低剂量组肝脏TC和TG含量均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05),肝脏中脂肪沉积较少,且PPARγ、AdipoR2、p38的mRNA和蛋白水平均极显著升高(P<0.01)。【结论】地菍总黄酮可明显改善高脂饮食诱导大鼠的NAFLD,其作用机制可能与其参与调节糖脂代谢、改善胰岛素抵抗、调控PPARγ/AdipoR2/p38/信号通路相关。

超声波辅助法提取地稔果实总色素的工艺优化

以地稔果实为原料,采用超声波辅助法提取地稔果实总色素。以总色素含量为指标,在单因素试验的基础上通过正交试验优化地稔果实总色素的提取工艺,并分析栽麻镇、高镇、三都镇3个贵州省内不同乡镇的地稔果实总色素含量。结果表明:最优提取工艺为料液比1∶100(g/mL)、超声功率50 W、超声时间50 min、超声温度60℃,在此条件下栽麻镇、高镇及三都镇的地稔果实总色素含量平均值分别为0.34%、0.13%、0.48%。

中药地菍黄酮类成分的分离与鉴定

目的 对地 (MelastomadodecandrumLour)全草的化学成分进行分离鉴定。方法 溶剂萃取及各种色谱技术分离纯化 ,经UV ,IR ,1H NMR ,13C NMR ,MS以及化学方法鉴定了它们的结构。结果 分离得到 7个化合物 ,分别是木犀草素(Ⅰ )、木犀草素 7 O β 葡萄糖苷 (Ⅱ )、木犀草素 7 O β 半乳糖苷 (Ⅲ )、槲皮素 (Ⅳ )、槲皮素 3 O β 葡萄糖苷 (Ⅴ )、槲皮素 3 O β 半乳糖苷 (Ⅵ )、广寄生苷 (Ⅶ )。

地菍正丁醇萃取物对链脲佐菌素致糖尿病模型小鼠的影响

目的研究地菍正丁醇萃取物对链脲佐菌素致糖尿病(DM)小鼠血糖、血脂及抗氧化水平的影响。方法腹腔一次性注射链脲佐菌素150 mg·kg-1制备DM模型小鼠,地菍正丁醇萃取物高、中、低剂量组分别给予地菍正丁醇萃取物60,40,20 g·kg-1,阳性对照组给予格列苯脲0.4g·kg-1,每天灌胃1次,正常对照组和模型对照组则以等体积纯化水灌胃,连续10 d,观察小鼠空腹血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,计算肝脏、肾脏脏器指数。结果与模型对照组比较,地菍正丁醇萃取物给药组小鼠血糖、TC、TG显著降低(P<0.01或P<0.05),血清SOD活性明显升高(P<0.01或P<0.05),MDA含量明显降低(P<0.01),肾脏指数也明显降低(P<0.01)。结论地菍正丁醇萃取物能明显降低DM小鼠空腹血糖,改善血脂代谢紊乱,并具有抗氧化作用。

地菍果实红色素的分离及组成初步鉴定

本文对福建产地果实红色素利用纸层析法、紫外 可见光谱法等技术进行分析 ,结果表明 :地果实红色素的两个主要成分初步推测为芍药定 3 葡萄糖苷 (Pn 3 glu)和芍药定 3 芸香苷 (Pn 3 rut)。

地稔人工栽培的氮磷钾养分吸收特性初探

地稔为野生多用途植物,摸清地稔的需肥特性是决定地稔人工栽培能否成功的关键,研究了在地稔人工栽培中N、P、K三要素对地稔的生长状况及植株养分分配的影响。结果显示:N、P、K均可以有效增加地稔的分枝数、叶片数、叶面积、开花量、结果数和干物量,且以N肥效果最明显,其次是K和P肥,研究还发现三元素间配合施用具有相互促进吸收的作用,对促进地稔生长的效果更加明显,且养分配合效果大小依次是NPK>NK>NP>PK。

地菍口服液治疗原发免疫性血小板减少症的药效学研究

目的:观察地菍口服液对原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)模型小鼠血小板计数、出凝血时间、骨髓巨核细胞数量、血清白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的影响。方法:取60只BALB/C小鼠随机分为6组:地菍口服液高、中、低剂量组、醋酸泼尼松组、模型组、正常对照组。以隔日注射豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)进行造模。造模第8天开始给药,每日1次,连续14 d后处死小鼠,检测外周血小板计数、出凝血时间、骨髓巨核细胞数量、IL-4及IFN-γ水平。结果:1地菍口服液高、中、低剂量组血小板数量明显高于模型组(P<0.05),出血时间及巨核细胞计数明显低于模型组(P<0.05);地菍口服液高剂量组凝血时间低于模型组(P<0.05),但中、低剂量与模型组间比较无显著变化(P>0.05);地菍口服液高、中剂量组血小板计数高于低剂量组(P<0.05)。2模型组IL-4、IFN-γ及IFN-γ/IL-4比值水平均高于正常对照组(P<0.05),以IFN-γ及IFN-γ/IL-4值升高为主(P<0.05);地菍口服液高剂量组IL-4、IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4值低于模型组(P<0.05),而中、低剂量组仅IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4值低于模型组(P<0.05);地菍口服液高、中、低剂量组IL-4、IFN-γ及IFN-γ/IL-4值无明显差异(P>0.05)。结论:地菍口服液对于提升ITP小鼠血小板计数及改善出血症状有较好疗效,增加剂量有助于提高疗效。通过降低ITP小鼠INF-γ水平及IFN-γ/IL-4比值,使Th1/Th2细胞恢复平衡,可能是其起效的机制之一。

地稔的止血活性初探

目的研究地稔的止血作用,寻找其止血有效部位。方法选取健康小鼠,应用剪尾法、玻片法和毛细管法研究地稔水提液、50%乙醇提液和95%乙醇提液的止血凝血时间。然后对止血效果最好的提取液依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取,对所得萃取部位进行止血实验,找到地稔的止血有效部位。结果 3种提取液中以50%乙醇提液止血效果最佳:剪尾法止血时间为3±1.49min;玻片法凝血时间为1.4±0.45min;毛细管法凝血时间为1.8±0.48min。50%乙醇提液依次萃取的各部位中,正丁醇部位止血效果最佳:剪尾法止血时间为2.35±1.16min;玻片法凝血时间为1.4±0.56min;毛细管法凝血时间为1.4±0.57min。结论选取的3种提取溶剂以50%乙醇为最佳,地稔的止血有效部位为正丁醇部位。

利用秋水仙素诱导地艹念多倍体的研究

[目的]探索利用秋水仙素诱导地艹念多倍体的可行性。[方法]以秋水仙素作为诱变剂,对地艹念无菌试管苗丛芽进行多倍体诱导,研究秋水仙素浓度、处理方法和处理时间对地艹念组培苗丛芽诱导效果的影响。经纯化和鉴定后,分析地艹念多倍体的外部形态和叶片气孔特征。[结果]采用混培法用0.1%秋水仙素对地艹念处理14 d的诱导率达28%,明显优于浸泡法。秋水仙素浓度对地艹念染色体的加倍率影响显著。采用不定芽技术切取变异株顶芽继代5次后,可得到纯合四倍体地艹念植株,染色体数目为2n=56。与正常二倍体相比,四倍体地艹念植株表现出多倍体巨大型特征。[结论]采用混培法用0.1%秋水仙素处理地艹念试管苗丛芽21 d,可获得最好的诱导效果。

地菍多糖MD_1清除活性氧自由基及对人红细胞膜脂质过氧化作用影响的研究

Objective:To investigate the effects of polysacharide MD 1 on eliminating free radical O -· 2,·OH and anti peroxidation on human erythrocyte membrane. Methods:testing the effect of eliminating O -· 2?·OH of MD 1 at different concentrations in vitro;testing the influence of MD 1 on peroxidation of free radical of human erythrocyte membrane by fluorescence. Results:Polyssacharide MD 1 could eliminate O -· 2 and·OH(<250 mg/L).compared with the control group( P <0.01). The result also showed that MD 1 could inhibit lipid peroxidation of human erythrocyte membrane,compared with the control group( P <0.01).

地菍水溶性多糖MD_1的分离纯化及组成分析

目的 :探讨地多糖的提取分离 ,以便研究其药理功效。方法 :采用Sevage法、DEAE -纤维素 (DEAE -5 2 )离子交换层析法及SephadexG - 10 0凝胶过滤法提纯地多糖 (MD1)。纯化的地多糖MD1的结构经TLC、UV、IR、GC、HPLC方法以及高碘酸氧化、Smith降解等方法进行测定。结果 :地多糖MD1是有许多支链的中性多糖 ,其组成为Rha∶Xyl∶Ara∶Man∶Glc∶Gal =1∶ 1.7∶ 1.9∶ 2 4 .5∶ 12 .3∶ 3.5 (摩尔比 ) ,分子量为 3.1× 10 3 。

地心芩总黄酮体外抗小鼠肝线粒体脂质过氧化作用的研究

目的:研究地心芩总黄酮(Melastomadodecandrumflavonoids,MDF)清除氧自由基与抗脂质过氧化作用。方法:以黄嘌吟-黄嘌呤氧化酶系统产生的超氧阴离子自由基,研究MDF对氧自由基的清除作用;分别以NAPDH-维生素C和Fe2+-半胱氨酸系统诱发的肝线粒体脂质过氧化的产物,研究MDF抗脂质过氧化的抑制作用。结果:MDF能有效地清除氧自由基,其IC50为46·4mg/L;能抑制小鼠肝匀浆自氧化,能有效地抑制NAPDH-维生素C和Fe2+-半胱氨酸系统诱发的肝线粒体脂质过氧化作用,对肝线粒体有保护作用,并呈浓度依赖作用。结论:MDF对氧自由基有清除作用,并能预防性对抗超氧阴离子自由基引起的氧化性损伤,对肝线粒体的氧化性损伤有保护作用。

地稔总黄酮含量的测定

[目的]建立地稔中总黄酮含量的测定方法。[方法]采用紫外-可见分光光度法,以芦丁为对照,以Na NO2-Al(NO3)3-Na OH为显色剂,检测波长为500 nm,测定地稔中总黄酮含量。[结果]芦丁浓度在0.01~0.07 mg/m L时与吸光度呈良好的线性关系(R2=0.999 8);平均加样回收率为99.34%,相对标准偏差为0.56%。[结论]该方法简单可靠、精密度高、重现性好,为地稔的进一步开发利用提供了理论依据。

地稔凝集素的提取及凝血活性的研究

为研究和利用地稔的促凝血活性物质,以地稔为试材,提取地稔凝集素,研究pH、温度和糖等理化因素对凝血活性的影响。结果表明:经硫酸铵沉淀及透析提取的地稔凝集素具有红细胞凝集活性;碱性条件下,抑制作用明显,而酸性条件有较强促进作用;温度对凝集素凝血活性影响很小;半乳糖有明显促进作用。

地埝药材薄层色谱鉴别研究

目的:研究中药地埝的薄层色谱鉴别方法。方法:依据现行《中国药典》2010年版一部附录ⅥB试验方法考察了不同提取方法、薄层板、展开剂、显色剂下地埝的薄层鉴别研究。结果:用硅胶GF254薄层板,二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)为展开剂,以氨熏为显色剂,再置可见光下检视斑点,分离效果最佳。结论:本实验研究可作为地埝药材质量标准的提高与完善提供依据。

基于网络药理学和分子对接探讨地稔治疗宫颈癌的分子机制

目的运用网络药理学方法探索地稔治疗宫颈癌的潜在作用机制。方法通过检索相关文献得到地稔化学成分并筛选出地稔的活性成分,利用SwissTargetPrediction平台预测活性成分的潜在靶点。利用Genecards数据库检索宫颈癌相关靶点。利用Cytoscape3.7.2软件构建"地稔-活性成分-宫颈癌靶点"网络,并运用String数据库构建蛋白互作网络(protein-protein interaction,PPI)。使用OmicShare Tools数据库进行基因本体(Gene Ontology,GO)分析和京东基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。结果得到地稔中活性成分25个、活性成分靶点420个、宫颈癌靶点150个,最后获得关键靶点7个,与地稔治疗宫颈癌显著相关的信号通路20条。地稔的主要活性成分为3-甲氧基鞣花酸、柚皮素、芹菜素等。地稔治疗宫颈癌关键靶点为STAT3、PIK3CA、AKT1、ESR1等;关键的生物进程和通路可能包括免疫系统过程、转录调节活性、内分泌与代谢相关信号通路、细胞周期信号转导通路等。另外,3-甲氧基鞣花酸成剂量依赖性地抑制人宫颈癌细胞Hela细胞的增殖。结论本研究通过筛选发现地稔治疗宫颈癌的关键靶点及通路与细胞信号转导、细胞的增殖、分化、凋亡以及免疫调节等过程密切相关。因此,3-甲氧基鞣花酸可能主要通过影响宫颈癌细胞增殖和凋亡,从而达到治疗宫颈癌的目的。

地菍总黄酮微波预处理提取工艺优化及生物活性研究

为了优化微波辐射预处理提取地菍总黄酮的工艺及挖掘其生物活性,在单因素试验基础上,采用正交实验(L_(18)(3~7))确定总黄酮提取最佳工艺,参照CLSI标准测定了总黄酮提取物对金葡菌等5种细菌的抑菌活性。结果显示,地菍(根、茎)总黄酮提取的最优工艺为:微波功率420 W,汽化剂用量0 mL,微波时间120 s,水浴温度60℃,水浴时间90 min,乙醇浓度45%,固液比为1:40,黄酮提取率为34.755 mg·g^(-1);叶的最优提取工艺为:微波功率630 W,汽化剂用量0 mL,微波时间30 s,水浴温度60℃,水浴时间60 min,乙醇浓度60%,固液比为1:20,黄酮提取率为25.431 mg·g^(-1);果的最优提取工艺为:微波功率350 W,汽化剂用量0 mL,微波时间30 s,水浴温度80℃,水浴时间60 min,乙醇浓度60%,固液比1:50,黄酮提取率为39.952 mg·g^(-1),较传统水浴提高了46.366%。抑菌实验显示根茎总黄酮提取物对铜绿假单胞菌(标准)、铜绿假单胞菌(耐药)、金黄色葡萄球(标准)、金黄色葡萄球菌(耐药)、大肠杆菌的MIC分别为8 mg·mL^(-1)、8 mg·mL^(-1)、8 mg·mL^(-1)、8 mg·mL^(-1)、16 mg·mL^(-1),叶总黄酮对前4种菌的MIC分别为8 mg·mL^(-1)、16 mg·mL^(-1)、16 mg·mL^(-1)、8 mg·mL^(-1)。实验表明,微波辐射预处理对地菍总黄酮的提取具有指导意义。地菍总黄酮抑菌活性值得进一步研究。

地菍粗多糖对STZ致糖尿病小鼠血糖、血脂及抗氧化作用的影响

目的研究地菍粗多糖对链脲佐菌素(STZ)致糖尿病小鼠血糖、血脂及抗氧化作用的影响。方法以STZ诱导小鼠糖尿病模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.6 g/kg)、地菍粗多糖低、中、高剂量组(0.25 g/kg、0.50 g/kg、1.00 g/kg),另设空白组,共6组,每组12只。治疗组分别按相应剂量每天灌胃1次,模型组、空白组给予生理盐水,给药21 d。观察小鼠空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TG)、三酰甘油(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果二甲双胍组及地菍多糖各剂量组体重显著高于模型组(P<0.05,P<0.01)。给药第7、14、21天,二甲双胍组及地菍多糖各剂量组FPG显著低于模型组(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,二甲双胍组及地菍多糖高剂量组TG、TC、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。地菍多糖中剂量组TG、TC水平显著低于模型组(P<0.05,P<0.01);地菍多糖低剂量组TC水平显著低于模型组(P<0.01)。与模型组比较,二甲双胍组及地菍多糖高、中剂量组血清及肝脏MDA水平显著降低,血清及肝脏SOD、GSH-Px水平显著升高(P<0.05,P<0.01);地菍多糖低剂量组血清及肝脏MDA水平显著低于模型组(P<0.01)。结论地菍粗多糖能够降低糖尿病小鼠空腹血糖,有效调节血脂紊乱且具有抗氧化作用。