黄花草木犀总皂苷体外抗肿瘤作用研究

目的以MCF-7、PC3M、ACC、A549、SW620几种肿瘤细胞株为研究对象,体外加入黄花草木犀总皂苷,研究黄花草木犀总皂苷对几种肿瘤细胞株的增殖抑制作用。方法 CCK-8法检测黄花草木犀总皂苷对5种肿瘤细胞株的增殖抑制作用。结果黄花草木犀总皂苷对MCF-7、PC3M、ACC、A549、SW620肿瘤细胞株均有细胞毒作用,但对正常细胞株的毒性作用则明显较低,对MCF-7、PC3M、ACC、A549、SW620作用72 h时的IC50分别为0.45、0.73、1.05、1.17、1.19 mg/m L。结论黄花草木犀总皂苷能有效抑制5种肿瘤细胞株增殖,且对正常细胞株毒性较小,筛选出对黄花草木犀总皂苷最敏感的肿瘤细胞株为MCF-7、PC3M肿瘤细胞,值得进一步开展基础及临床研究。

唐山地区3种豆科牧草种子破除硬实方法的研究

[目的]比较苜蓿、草木樨、沙打旺种子硬实破除的方法,为生产实践中破除3种牧草种子硬实提供参考。[方法]对3种牧草的种子进行浓硫酸、氢氧化钠、硝酸钾3种处理,并对发芽率和一些生理指标进行研究。[结果]各种处理都不同程度提高了种子的出苗率。[结论]最适宜于苜蓿、草木樨、沙打旺破除硬实的方法是0.10 mol/L硝酸钾溶液浸种12 h,0.05 mol/L硝酸钾溶液浸种12 h,0.40 mol/L氢氧化钠溶液浸种2 h。

黄花草木樨MoSOS1基因克隆及表达分析

植物质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因SOS1是植物耐盐性必需的基因之一,在抵御盐胁迫过程中发挥十分重要的作用。以黄花草木樨叶片总RNA为模板,通过RT-PCR结合RACE方法克隆得到黄花草木樨MoSOS1基因全长序列,命名为MoSOS1。序列分析表明该基因全长为3 931 bp,开放阅读框(ORF)为2 874 bp,编码957个氨基酸,分子量为112.8 k D,等电点为5.31。TMHAM软件跨膜区的预测分析表明,黄花草木樨MoSOS1蛋白具有8个跨膜结构区域,N端和C端都位于细胞外。氨基酸序列分析表明,MoSOS1蛋白含有1个Na+/H+Exchanger superfamily和一个c NMP(Cyclic nucleotide-monophosphate)结合位点以及1个CAP_ED(Catabolite gene activator protein-effector domain)superfamily结构域。生物信息预测显示,MoSOS1的编码蛋白为不稳定酸性蛋白,不存在信号肽,二级结构多为α-螺旋和无规则卷曲。荧光实时定量RT-PCR分析表明:随着Na Cl浓度的增加,黄花草木樨地上部和根中MoSOS1基因表达水平呈增加趋势,根中表达量大于地上部,表明MoSOS1基因的表达受盐胁迫诱导和调节。

草木犀翻压配施化肥对烤烟土壤酶活性的影响

当前的农业栽培高度依赖化肥,致使土壤的微生态环境不断恶化,为了改善土壤的生物学特性,培肥地力,通过田间试验研究了草木犀(一年生)作为绿肥或配施化肥对烤烟土壤蔗糖酶、脲酶、磷酸酶、过氧化氢酶活性的影响。结果显示,草木犀翻压能够显著提高4种酶的活性,并且土壤酶活性随着绿肥翻压量的提高而增加,与空白对照(CK2)相比,草木犀第3批(9月18日翻压,生物量为32 180 kg/hm2)翻压的酶活性增加最大,最大增量分别为:蔗糖酶6月48. 4%,脲酶4月91. 5%,磷酸酶8月72. 4%,过氧化氢酶10月51. 6%;绿肥与化肥配施的处理中,从整体上看,绿肥+化肥的处理均高于对照(CK1,仅施化肥),第3批翻压绿肥+常规施肥的处理土壤酶活性的提升效果均好于绿肥+减氮30%的处理,第1批(8月3日翻压,生物量为19 350 kg/hm2)和第2批(8月18日,生物量为22 930kg/hm2)翻压,绿肥+常规施肥与绿肥+减氮30%的处理土壤酶活性多数差异不显著,脲酶和磷酸酶表现尤为突出;烟株的不同生育期内酶的动态变化特征表现为:翻压绿肥和绿肥与化肥配施的各处理土壤蔗糖酶、脲酶、磷酸酶均在旺长期(6月)出现峰值,过氧化氢酶在烟叶采收前期(8月)出现峰值。以上结果说明,翻压草木犀后土壤代谢活跃,有利于土壤的营养转化,为烤烟正常生长提供所需的营养。

草木犀翻压时期和化肥用量对烤烟生长和产量的影响

为明确植烟区草木犀用作绿肥的最适翻压时期和烤烟适宜化肥用量,通过田间试验研究了草木犀在3个时期(营养生长期、初花期、盛花期)翻压以及配合化肥的3个用量(不施肥、70%常量施肥和常量施肥)对烤烟生长和产量的影响。结果表明,同一化肥用量下,随着翻压时期的推迟,烤烟的净光合速率、蒸腾速率和叶片羧化效率均显著提高,胞间二氧化碳浓度显著降低;烤烟的经济性状提高,以盛花期翻压最优,盛花期翻压处理的上中等烟比例、产量和产值分别较营养生长期翻压的显著提高18.09%、20.00%和36.29%。同一时期翻压,随着配施化肥用量的增加,光合特性及烤后烟叶的经济性状先增加后降低,均在70%常量施肥量达最大值。可见,草木犀翻压时期的推迟配合化肥用量的适当减施可提高烤烟的光合作用强度,促进干物质的积累,增值提产效果明显,以盛花期翻压配70%常量化肥为宜。

黄花草木犀化学成分研究

目的研究黄花草木犀Melilotus officinalis的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和ODS柱色谱进行分离纯化,通过理化方法和波谱数据进行结构鉴定。结果从黄花草木犀70%乙醇渗漉液中分离得到12个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、香豆素(2)、对羟基苯丙酸甲酯(3)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(4)、芦丁(5)、芹菜素-7-O-β-D-芦丁糖苷(6)、邻苯二甲酸二丁酯(7)、robinin(8)、clovin(9)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(10)、异槲皮苷(11)、美迪紫檀素-3-O-β-葡萄糖吡喃糖苷(12)。结论化合物3、4、6、7、11、12为首次从该属植物中分离得到。

大孔吸附树脂纯化黄花草木犀的工艺研究

目的考察黄花草木犀中芦丁、clovin和香豆素的最佳大孔吸附树脂的纯化工艺。方法通过对不同型号大孔树脂的考察优选出纯化黄花草木犀中药效成分的最佳树脂类型,并对其最大上样量、上样体积流量、洗脱溶剂体积分数和洗脱溶剂最佳用量进行优化。结果经过筛选确定HPD-300大孔树脂为纯化黄花草木犀药效成分的最优树脂类型,其最佳纯化条件:树脂的上样量为2.4 g生药/g树脂,上样体积流量为2.0 BV/h,依次用2 BV水洗脱和7 BV 50%乙醇洗脱。在此条件下芦丁、clovin、香豆素质量分数提升了7.8倍,平均收率为85.38%。结论 HPD-300大孔树脂用于纯化黄花草木犀中芦丁、clovin、香豆素稳定性高、重复性好。

草木犀中香豆素的超临界CO_2萃取工艺研究

目的研究草木犀中香豆素的超临界CO2萃取工艺。方法采用单因素和正交试验的方法,考察萃取压力、萃取温度、萃取时间和物料粒度等因素对黄香草木犀中香豆素超临界CO2萃取物得率的影响。结果超临界CO2萃取草木犀中香豆素的影响因素次序为萃取压力>萃取温度>萃取时间。结论最佳萃取工艺条件为:萃取压力25 MPa,物料粒度40～60目,萃取温度35℃,萃取时间1.0 h。此条件下草木犀中香豆素萃取率为0.76%。

黄花草木犀抗氧化活性成分研究

目的研究黄花草木犀[Melilotus officinalis(L.)]化学成分及其抗氧化活性。方法 DPPH法及β-胡萝卜素漂白等方法筛选黄花草木犀体积分数70%乙醇提取物的抗氧化活性部位,通过硅胶、Sephadex LH-20、制备柱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定所得化合物的结构,再评价其抗氧化活性。结果黄花草木犀的乙酸乙酯部位抗氧化活性最显著,从中分离出13个化合物,分别鉴定为山柰酚(1)、木犀草素(2)、橙皮苷(3)、槲皮素(4)、芦丁(5)、芹菜素(6)、水杨酸(7)、香豆素(8)、滨蒿内酯(9)、7-甲氧基香豆素(10)、富马酸(11)、咖啡酸(12)和对羟基苯甲酸-4-O-α-D-吡喃甘露糖-(1→3)-α-L-鼠李糖苷(13);活性研究表明,化合物2、4、7、12对DPPH自由基的清除能力较强,IC50值分别25. 89、14. 09、28. 03和23. 04μg·m L^-1;化合物4、7、12、13对ABTS自由基的清除能力较强,IC50值分别为10. 48、23. 77、22. 79和25. 20μg·m L^-1。结论化合物3、7、9、10、11、12、13为首次从该植物中分离得到,经检索化合物13为未经文献报道的新化合物;化合物2、4、7、12对DPPH自由基的清除能力较强;化合物4、7、12、13对ABTS自由基的清除能力较强。

杨树对草木犀的化感作用

研究了‘中辽1号’杨(Populus×canadensis cv.‘Zhongliao 1’)叶片、根系、根际土浸提液对草木犀[Melilotus officinalis(Linn.)Pall.]种子萌发的化感效应。研究表明:杨树叶片、根系浸提液对草木犀种子萌发及幼苗生长的化感效应为负效应,起到了抑制作用,且浓度越大抑制效果越明显,相同浓度的叶片浸提液抑制作用大于根系浸提液的抑制作用;高浓度杨树根际土浸提液对草木犀种子萌发及幼苗生长的化感效应为负,起到了抑制作用,但低浓度杨树根际土浸提液的化感效应为正效应,起到了促进作用。初步认为,杨树林下适宜种植草木犀。