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蜂毒素分子的改造及其基因在毕赤酵母中的表达 被引量:8
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作者 赵亚华 董竟南 +3 位作者 崔红 白云 金科华 蒋智勇 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期45-48,56,共5页
为获得保留有抗菌活性而降低溶血作用的蜂毒素,对蜂毒素的分子结构进行了改造。将第5位的Val变为Arg,第15位Ala变为Arg,删除了第16位的Leu。用PCR技术获得了改造后的蜂毒素基因,将其克隆入酵母表达载体pPICZa-A,获得重组表达质粒pPICZa-... 为获得保留有抗菌活性而降低溶血作用的蜂毒素,对蜂毒素的分子结构进行了改造。将第5位的Val变为Arg,第15位Ala变为Arg,删除了第16位的Leu。用PCR技术获得了改造后的蜂毒素基因,将其克隆入酵母表达载体pPICZa-A,获得重组表达质粒pPICZa-A-MEA。该质粒转化毕赤酵母菌GS115,甲醇诱导下表达,发酵上清液经抑菌活性、溶血活性测定及亲和层析纯化,结果表明,蜂毒素基因成功地在毕赤酵母中表达,经改造后表达的蜂毒素保留了抗菌活性且溶血活性显著降低,经纯化后用Bradford法测定表达蜂毒素的含量约为0.29mg/ml。 展开更多
关键词 蜂毒素 酵母表达载体 基因 溶血活性 保留 毕赤酵母菌 抗菌活性 纯化 重组表达质粒 亲和层析
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