HPLC测定亚硫酸氢钠穿心莲内酯

目的:建立一种用 HPLC 测定亚硫酸氢钠穿心莲内酯的新方法。方法:采用 Diamonsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-乙腈-0.02 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(5:24:75)为流动相,220 nm 为检测波长,流速1.0 mL·min^(-1),进样量10μL。结果:能将亚硫酸氢钠穿心莲内酯与其主要杂质分离,在100.4～1004μg·mL^(-1)浓度范围内,其峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9999),平均回收率(n=3)为100.2%,100.5%,99.6%;RSD 分别为0.49%,0.98%,0.49%。结论:该方法简便、快速、准确,可用于亚硫酸氢钠穿心莲内酯的检验。

RP-HPLC法测定亚硫酸氢钠甲萘醌粉(水产用)的含量均匀度

目的:建立RP-HPLC法测定亚硫酸氢钠甲萘醌粉(水产用)的含量及其含量均匀度方法。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18(15cm×4.6mm,5um)色谱柱,以0.015mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇(70∶30)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长230nm。结果:在5～250μg/mL范围内,色谱峰面积与对照品浓度呈良好的线性关系,r=0.9998;回收率为100.2%(n=30)。结论:该法快速、简便、重现性好,可用于亚硫酸氢钠甲萘醌粉(水产用)的质量控制。

HPLC法测定亚硫酸氢钠甲萘醌注射液的含量

目的研究HPLC法测定亚硫酸氢钠甲萘醌注射液的含量。方法采用SinoChromODS-BP C18(200mm×4.6mm,5μm)色谱柱,大连依利特分析仪器有限公司;流动相:0.015mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇(70:30,用磷酸调节pH至4.8±0.1),检测波长230nm。流速1.0ml/min,柱温:30℃。并进行了方法学验证。结果在0.08～2.40μg范围内,色谱峰面积与对照品浓度呈良好的线性关系,r=0.9999;回收率为99.8%(n=18)。结论该法快速、简便、准确,可用于亚硫酸氢钠甲萘醌注射液的质量控制。

HPLC法测定亚硫酸氢钠甲萘醌片的含量

目的:研究 HPLC 法测定亚硫酸氢钠甲萘醌片的含量及其含量均匀度。方法:采用 Lichrospher C_(18)(25cm×4.6mm,5μm)色谱柱,以0.015mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液-甲醇(70:30)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长230nm。结果:在0.08～2.40μg范围内,色谱峰面积与对照品浓度呈良好的线性关系,r=0.9999;回收率为100.4%(n=18)。结论:该法快速、简便、重现性好,可用于亚硫酸氢钠甲萘醌片的质量控制。

莲必治注射液及注射用莲必治的HPLC测定

建立了HPLC法测定莲必治注射液及注射用莲必治含量。采用C18 (4.6mm×150mm)柱,流动相为甲醇-乙腈-0.02mol/L 磷酸二氢钾溶液(10∶20∶70),流速1.0ml/min,检测波长220nm。亚硫酸氢钠穿心莲内酯在0.24～2.4mg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率98.7%,RSD 0.60%。

亚硫酸氢钠甲萘醌合成工艺改进

传统亚硫酸氢钠甲萘醌(MSB)合成原料2-甲基-1,4-萘醌(2-MNQ)中含有6-甲基-1,4-萘醌(6-MNQ),致使产品含量较低。为提高产品质量,对原料中的6-MNQ进行了分离去除,在正己烷溶剂中和NaHSO_3反应合成MSB。考察了原料配比、反应温度、反应时间等因素对合成MSB的收率和纯度的影响,最佳工艺条件为:n(2-MNQ)与n(NaHSO_3)=1∶1.45,反应温度40℃,反应时间4 h。改进工艺后MSB的收率提高到81%,质量分数大于98%。

过硫酸铵引发法制备维生素K_3的合成研究

以过硫酸铵为引发剂,双氧水为氧化剂,冰乙酸为溶剂,将2-甲基萘氧化为2-甲萘醌,进而制得亚硫酸氢钠甲萘醌.研究了反应时间、反应温度、引发剂的用量及反应物与氧化剂、溶剂的物料比等因素对产品收率的影响.确定了最佳的反应条件是2-甲萘醌的合成条件为:反应时间3h,反应温度85℃,引发剂的用量为反应物总量的2%,n(2-甲基萘)∶n(冰乙酸)∶n(双氧水)=1∶15∶11.5.亚硫酸氢钠甲萘醌的合成条件为:反应温度45℃,反应时间1h,n(2-甲萘醌)∶n(亚硫酸氢钠)=1∶1.5.在以上条件下,2-甲萘醌的收率为54%,亚硫酸氢钠甲萘醌的收率为70%.

两种方法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中亚硫酸氢钠含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法和比色法两种方法用于测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中的抗氧剂亚硫酸氢钠,并比较两种方法是否存在显著性差异。方法:HPLC法色谱条件为采用Shoedx Sugar SH1011色谱柱(300 mm×8 mm,6μm),以0.04 mol/L磷酸溶液为流动相,流速0.8 ml/min,柱温为30℃,检测波长为200 nm;比色法原理为亚硫酸氢钠在酸性条件下与甲醛和碱性品红可生成紫红色络合物,通过测定该络合物在556 nm波长处的吸光度,可计算出亚硫酸氢钠的含量。结果:HPLC法亚硫酸氢钠在41.8~313.9μg/ml范围内峰面积与浓度呈良好线性关系(r=0.999 5),平均回收率为102.4%,RSD为0.65%(n=9);比色法亚硫酸氢钠在0.8~2.5μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.999 0),平均回收率为99.7%,RSD为0.83%(n=9)。结论:两种方法均可用于测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中的抗氧剂亚硫酸氢钠,且无显著性差异,但HPLC法操作更简便,适合批量样品的测定。

维生素K_3的合成及应用

本文概述了维生素K3的各种合成技术路线,对维生素K3生产技术的发展进行了展望,介绍了其应用和市场供求现状。

注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯与2种输液配伍的稳定性及溶血性研究

目的考察注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液配伍的稳定性及溶血性。方法采用高效液相色谱法试验。结果亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液配伍后,在强光(4 500±500)Lx、(40±2)℃两种条件下,24 h内,主药含量和降解产物均无明显变化。注射用亚硫酸氢钠穿心莲内酯分别与2种输液配伍后无溶血现象和凝集现象。结论亚硫酸氢钠穿心莲内酯与2种输液配伍24 h内稳定,临床上可配伍使用。

正清风痛宁注射液中辅料亚硫酸氢钠的配伍合理性初探

目的:分析正清风痛宁注射液中原料与辅料亚硫酸氢钠的配伍合理性。方法:采用液相色谱法测定正清风痛宁注射液中杂质及主成分含量,采用离子色谱测定正清风痛宁注射液中亚硫酸根含量,比较原样品与经过影响因素试验(高温40℃、60℃或光照4 500 Lx)样品中有关物质的变化、主成分峰的变化及亚硫酸根离子的变化,并用LC-MS对杂质峰进行了结构确认。结果:正清风痛宁注射液中杂质为原料药物与辅料亚硫酸氢钠的加成杂质。结论:正清风痛宁注射剂中采用亚硫酸氢钠作为抗氧剂属于配伍不合理。

高效液相色谱法同时鉴别3种维生素K3类饲料添加剂

农业部《饲料添加剂品种目录(2013)》收录了3种维生素K_3类饲料添加剂,即亚硫酸氢钠甲萘醌(MSB)、亚硫酸氢烟酰胺甲萘醌(MNB)和二甲基嘧啶醇亚硫酸甲萘醌(MPB),目前发布的标准中分别采用甲萘醌的沉淀反应、二氧化硫的气味鉴别及烟酰胺的薄层色谱法来鉴别,方法繁锁,专属性不强。文章建立了用高效液相色谱法鉴别3种维生素K_3类化合物,采用Waters Atlantis~?HILIC Sili-ca色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈/水(80.20)为流动相,230 nm为检测波长,流速1 ml/min,结果显示MSB为1个主峰、MNB和MPB均出现2个主峰,即亚硫酸氢甲萘醌、烟酰胺和二甲基嘧啶醇,3个色谱峰的分离度R≥1.9,MSB、MPB、MNB在该色谱条件下得到较好的分离。MPB中亚硫酸氢甲萘醌和二甲基嘧啶醇峰的相对保留时间均为0.19,MNB中亚硫酸氢甲萘醌和烟酰胺的相对保留时间为0.30~0.32。该色谱条件下,用保留时间或相对保留时间即能有效鉴别3种维生素K_3类化合物,方法简便、专属性强。

恩诺沙星粉中未知添加物的确证

应用非靶向分析技术,筛查、分析和确证恩诺沙星粉(水产用)中的非法添加物。分别制备甲酸酸化、碳酸钠碱化的恩诺沙星粉供试品溶液,经超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)检测初筛,获取未知物色谱图。应用超高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱(UPLC-TOF-HRMS),在正、负离子模式下对酸化、碱化样液进一步检测,获得未知物母离子和二级特征碎片的精确质荷比、同位素信息,并应用SCIEX OS软件进行分析推导。最后取疑似化合物对照品进行确证研究。UPLC-PDA初筛结果显示:酸化样液在1.870 min、5.122 min,碱化样液在5.122 min,均发现高响应未知色谱峰。对吸收波长和峰面积进行分析,推测含2个未知物,且未知物1(1.870 min)与未知物2(5.122 min)在酸性/碱性条件下可能发生转换。SCIEX OS软件分析推导结果显示:未知物2,母离子分子式拟合为C11H8O2,二级碎片结构解析含1个苯环、2个羰基和1个通过成环连接的丙烯结构,推测为甲萘醌;未知物1的分子离子峰为C11H9O5S-,二级碎片仅采集到HSO-3,丢失部分与未知物2一致,结合甲萘醌常见衍生物类型,推测为亚硫酸氢钠甲萘醌。取甲萘醌、亚硫酸氢钠甲萘醌对照品进行对比研究,UPLC-PDA检测结果显示:未知物1与亚硫酸氢钠甲萘醌、未知物2与甲萘醌,保留时间和紫外光谱一致;向供试溶液中添加对照品溶液后检测,未知物为单一峰。UPLC-TOF-HRMS检测发现:未知物1与亚硫酸氢钠甲萘醌保留时间一致,一级质谱质量偏差为1.0×10-6,二级谱库匹配度为100%;未知物2与甲萘醌保留时间一致,一级质谱质量偏差为0.6×10-6,二级谱库匹配度为99.7%。未知物1和2的结构得以确证。亚硫酸氢钠甲萘醌可止血,与恩诺沙星治疗败血症的适应证相应,佐证试验结果。随着对兽药非法添加行为的严格监管和严厉打击,非法添加物和添加手段愈发隐蔽,常规靶向分析难以满足监控需求。该文详述的使用UPLC-PDA结合UPLC-TOF-HRMS对未知物进行非靶向分析的技术,可为药品、食品、保健品、化妆品及农药等产品中非法添加物的筛查和确证提供思路和技术参考。

甲萘醌在饲料中的分析

研究了用紫外分光光度法测定甲萘醌在饲料中含量的方法 ,探讨了测定过程中有关条件的变化对测定的影响 ,获得了适宜的测定条件 :紫外光吸收波长为 2 50± 2nm ,在所测的浓度范围内有良好的线性关系和回收率。此方法简便、快捷 ,与传统的SMAO4 0A方法对比有较高的准确性 ,结果令人满意。

止血散、清肠汤、冠心胶囊联合西药治疗肝硬化门脉高压上消化道出血随机平行对照研究

[目的]观察止血散、清肠汤联合西药治疗肝硬化门脉高压上消化道出血疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将82例住院及门诊患者按抛硬币法简单随机分为两组。对照组41例吸氧、补充血容量、抑酸、保肝、预防感染常规治疗;亚硫酸氢钠甲萘醌4mg/次,3次/d,肌注;氨甲苯酸0.2g+0.9%生理盐水20m L,1次/d,静滴;西咪替丁0.6g+0.9%生理盐水3m L,1次/d,静滴;去甲肾上腺素2mg+0.9%生理盐水20m L,3次/d,口服;冠心胶囊,2g/次,3次/d。治疗组41例止血散(白及粉、三七粉、大黄、碳粉炒各5g),100m L凉水米汤冲服,8h/次;清肠汤(蒲公英3g,赤芍、乌梅各30g,黄连、生牡蛎、生槐米各15g,生大黄5g),1剂/d,水煎400m L,早晚口服,200m L/次;西药治疗同对照组。连续治疗7d为1疗程。观测临床症状、血压、血红蛋白浓度、红细胞、出血量、不良反应。治疗1疗程,判断疗效。[结果]治疗组显效15例,有效23例,无效3例,总有效率92.68%。对照组显效12例,有效19例,无效10例,总有效率75.61%。治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。[结论]止血散、清肠汤联合西药治疗肝硬化门脉高压上消化道出血疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

阿萨希毛孢子菌体外亚硫酸氢钠甲萘醌抗氧化诱导及对其形态学影响的研究

目的研究体外能否用亚硫酸氢钠甲萘醌(MSB)诱导出抗MSB的阿萨希毛孢子菌(T.asahii)菌株,并观察抗氧化株的稳定性,进一步观察诱导前后菌株形态学的变化。方法将T.asahii CBS 2479、CBS 8904在MSB浓度逐渐梯级倍增的YPD液体培养基中传代,直至T.asahii在YPD液体培养基中不会生长即终止诱导;将诱导末代菌株在不含MSB的YPD液体培养基中连续传10代,观察诱导和回复过程中菌株的酶学和形态学变化。结果 CBS 2479诱导前过氧化氢酶(CAT)值为46.89 U/mgprot,MSB诱导后、回复后CAT均值分别为(150.36±62.49)U/mgprot和(82.35±21.13)U/mgprot;诱导前超氧化物歧化酶(SOD)值为178.54U/mgprot,诱导后、回复后均值分别为(500.30±181.13)U/mgprot和(577.58±63.71)U/mgprot。CBS 8904诱导前CAT值为44.06 U/mgprot,MSB诱导后、回复后CAT均值分别为(109.69±39.80)U/mgprot、(83.30±6.96)U/mgprot;诱导前SOD值为226.70 U/mgprot,MSB诱导后、回复后CAT均值分别为(640.65±195.60)U/mgprot和(719.70±48.23)U/mgprot。MSB诱导前后T.asahii的菌落形状、沟回形态、沟回数量均发生了明显变化,光镜下T.asahii由以菌丝为主或孢子为主向菌丝、孢子混合状态转换。结论无论是T.asahii的临床株,还是环境株,利用浓度梯级倍增MSB在体外均能成功诱导出抗氧化的T.asahii菌株,但抗氧化能力有差异。MSB诱导前后T.asahii的肉眼形态和光镜下形态均发生了较明显的变化。

HPLC法测定依达拉奉注射液中亚硫酸氢钠的含量

目的:建立适用于依达拉奉注射液中抗氧剂亚硫酸氢钠含量测定的HPLC法.方法:使用Thermo C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,离子对溶液(取四丁基硫酸氢铵10.19 g和磷酸二氢钾1.36 g,加水溶解定容至1000 mL,用40%氢氧化钠溶液调节pH至6.0)-乙腈(80:20)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为215 nm,进样量为20μL.结果:亚硫酸氢钠与其他峰分离良好,在0.25~1.50μg·mL^(-1)浓度范围内,线性关系良好.平均回收率为99.49%,精密度、耐用性良好.结论:所建方法简单、准确,适用于依达拉奉注射液的质量评价与控制.

亚硫酸氢钠甲萘醌注射液中4个降解杂质的UPLC-Q-Orbitrap HRMS结构鉴定

目的:以超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术为主要手色谱段,结构定性亚硫酸氢钠甲萘醌注射液中的4个降解杂质。方法:超高效液相色谱采用Thermo Gold C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以0.02 mol·L^(-1)乙酸铵溶液-甲醇(92∶8)为流动相,质谱采用HESI离子源、正负离子检测模式,碎片分析借助MsFrontier7.0软件,结构定性分析亚硫酸氢钠甲萘醌注射液中的4个降解杂质。结果:通过HPLC-PDA、UPLC-HRMS、^(1)HNMR等手段,结合有机合成制备杂质对照品、强制降解试验归属杂质来源、推测形成路径等方式,确定了亚硫酸氢钠甲萘醌的4个重要的降解杂质的分子结构,它们分别是:3-羟甲基-1,4-二-氧代-1,4-二-氢-2-萘磺酸钠(杂质1)、1-羟基-3-甲基-4-氧代-1,2,3,4-四-氢萘-1,3-二-磺酸钠(杂质2)、4-羟基3-甲基-1-氧代-1,2-二-氢-萘磺酸钠(杂质3)和1,4-二-羟基3-甲基-2-萘磺酸钠(杂质4)。结论:通过降解杂质结构定性及其互变异构、自氧化等机制研究,为亚硫酸氢钠甲萘醌注射液的工艺优化和质量控制提供了参考依据。