重组慢病毒介导的内肽酶Meprinα对ApoE^(-/-)小鼠主动脉粥样斑块形成的影响

目的观察重组Meprinα慢病毒质粒对ApoE-/-小鼠主动脉粥样斑块形成的影响,并初步探讨其机制。方法 15月龄ApoE-/-小鼠按随机数字表法分为对照组、LvMep1A组和LvGFP组,予高脂喂食,并于第11周分别给予病毒质粒。尾动脉测压法测量动脉血压,全自动生化分析仪检测血浆胆固醇、甘油三酯及脂蛋白含量。Western blot检测血管壁Meprinα蛋白,血管HE染色观测粥样斑块面积,ELISA法检测血浆中Meprinα蛋白和炎症因子含量。TUNEL法检测血管壁粥样斑块细胞凋亡情况。结果与对照组比较,LvMep1A组小鼠血浆和血管壁中Meprinα含量分别增高3.7倍、3.4倍(P<0.05);相较于对照组,LvMep1A组小鼠体质量、甘油三酯、胆固醇和低密度脂蛋白显著升高(P<0.05),而高密度脂蛋白(HDL)则显著降低(P<0.05);HE染色结果提示,LvMep1A组小鼠主动脉粥样斑块面积较对照组显著升高(P<0.05);荧光显微镜下可见,与对照组比较,LvMep1A组小鼠粥样斑块内TUNEL阳性细胞百分比约增加了58.25%(P<0.05);ELISA结果提示,LvMep1A组小鼠血浆中炎症因子IL-1β、TNF-α、MMP-9含量较对照组明显升高(P<0.05),而MCP-1、IL-6则较对照组无明显变化(P>0.05)。与对照组比较,LvGFP组各项指标无明显变化(P>0.05)。结论Meprinα促进粥样斑块形成、进展,其机制可能与Meprinα促进小鼠体内炎症因子分泌,诱导粥样斑块内细胞凋亡有关。

Meprinα对TGF-β1诱导的成纤维细胞胶原合成的调节作用

目的观察Meprinα对转化生长因子(TGF)-β1介导的成纤维细胞胶原合成和肌成纤维细胞分化的调节作用。方法原代培养肺成纤维细胞,采用TGF-β1诱导,并予以重组Meprinα及放线酰胺素(Actinonin)预处理。免疫细胞化学染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,免疫印迹法检测Meprinα、I型胶原、α-SMA的表达。结果 TGF-β1能够促进肺成纤维增殖和迁移能力,显著上调I型胶原、α-SMA的表达,同时降低Meprinα的表达(P<0.05)。免疫印迹结果显示,予以Meprinα预处理能够显著抑制TGF-β1介导的I型胶原、α-SMA表达的上调(P<0.05);予以Actinonin预处理,则能够显著促进TGF-β1介导的I型胶原、α-SMA表达的上调(P<0.05)。结论 Meprinα具有抑制TGF-β1介导的肺成纤维细胞胶原合成和肌成纤维细胞分化的作用。

血清Meprin A联合NT-proBNP对川崎病伴冠状动脉损害预测价值的研究

为了探讨血清Meprin A联合NT-proBNP对川崎病(KD)伴冠状动脉损害(CAL)的预测价值,选取宁波市妇女儿童医院住院KD患儿334例为实验组,同期匹配的上呼吸道感染患儿201例为对照组,实验组依据超生心动图结果分为冠状动脉损害组(CAL组n=64例)与无冠状动脉损害组(NCAL组n=270例),所有KD患儿在急性期与恢复期分别检测血清Meprin A、NT-proBNP等相关实验室指标,运用Logistic回归方程拟合Meprin A及NT-proBNP的联合诊断模型,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,用DeLong检验两组之间曲线下面积.结果发现:KD患儿急性期血清Meprin A、NT-proBNP水平均显著高于缓解期及对照组,差异有统计学意义(P<0.001);CAL组患儿血清Meprin A、NT-proBNP水平均高于NCAL组(P<0.001);Spearman相关性分析显示KD患儿急性期血清Meprin A与NT-proBNP、CRP、ESR之间呈正相关性;ROC曲线分析当血清Meprin A>7.7ng·mL^(-1)时,预测KD患儿伴CAL的灵敏度为84.37%,特异度为67.04%,曲线下面积为0.809;NT-proBNP>966ng·L^(-1)预测KD患儿伴CAL的灵敏度为84.37%,特异度为79.63%,曲线下面积为0.883;联合检测诊断KD伴CAL的预测值>0.134,灵敏度及特异度分别为75.00%、92.22%,曲线下面积为0.874.DeLong检验表明二者联合检测及血清NT-proBNP诊断KD伴CAL的ROC曲线下面积均大于血清Meprin A,差异有统计学意义,而联合检测特异度为92.22%.因此,Meprin A、NT-proBNP可能参与KD的致病过程,且与KD伴冠状动脉损害密切相关,可用于KD伴冠状动脉损害的辅助诊断.二者联合检测的诊断特异度均高于单一检测,可为其早期诊断提供可靠证据.

跨膜蛋白酶研究进展

目的 总结近几年国内外对跨膜蛋白酶的研究现状。方法 综合分析近年发表的有关文献。结果 探讨了跨膜蛋白酶的分类、结构、功能及研究前景。结论 跨膜蛋白酶具有蛋白裂解和附着能力 ,在信号跨膜传导。