文蛤(Meretrix meretrix)铁蛋白的重组表达及其组织表达特征分析

构建了文蛤铁蛋白的重组表达质粒pGEX-4T-1-MmeFer,在大肠杆菌Escherichiacoli中获得了重组蛋白,经酶解和质谱鉴定该蛋白为重组文蛤铁蛋白(rGST-MmeFer),切除GST标签的重组文蛤铁蛋白(rMmeFer)具有氧化和吸收铁离子的功能。利用rGST-MmeFer制备了兔抗文蛤铁蛋白的多克隆抗体,进而利用Western blot的方法对文蛤铁蛋白的组织表达分布进行了研究。结果表明,铁蛋白在文蛤各组织中均有分布,其中消化腺中表达量最高,足中表达量最低。此外,利用实时定量PCR分析了文蛤消化腺、外套膜和鳃组织中铁蛋白mRNA的表达,发现铁蛋白mRNA在外套膜中表达量最高,消化腺次之,鳃中表达量最低,差异达到显著水平(P<0.05)。上述结果为进一步研究铁蛋白参与贝类贝壳形成的分子机制奠定了基础。