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Translational research of adult stem cell therapy 被引量:3
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作者 Gen Suzuki 《World Journal of Cardiology》 CAS 2015年第11期707-718,共12页
Congestive heart failure(CHF) secondary to chronic coronary artery disease is a major cause of morbidity and mortality world-wide. Its prevalence is increasing despite advances in medical and device therapies. Cell ba... Congestive heart failure(CHF) secondary to chronic coronary artery disease is a major cause of morbidity and mortality world-wide. Its prevalence is increasing despite advances in medical and device therapies. Cell based therapies generating new cardiomyocytes and vessels have emerged as a promising treatment to reverse functional deterioration and prevent the progression to CHF. Functional efficacy of progenitor cells isolated from the bone marrow and the heart have been evaluated in preclinical large animal models. Furthermore, several clinical trials using autologous and allogeneic stem cells and progenitor cells have demonstrated their safety in humans yet their clinical relevance is inconclusive. This review will discuss the clinical therapeutic applications of three specific adult stem cells that have shown particularly promising regenerative effects in preclinical studies, bone marrow derived mesenchymal stem cell, heart derived cardiosphere-derived cell and cardiac stem cell. We will also discuss future therapeutic approaches. 展开更多
关键词 CONGESTIVE HEART FAILURE ADULT STEM cells mesenchy
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骨髓间质干细胞联合抗炎治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究 被引量:1
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作者 朱志勇 崔莹 +1 位作者 魏毅东 魏经汉 《河南医学研究》 CAS 2005年第1期5-7,共3页
目的 :观察静脉移植骨髓间质干细胞 (MSC)及早期抗炎治疗心肌梗死的可能性及对心肌梗死后心功能的影响。方法 :大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)培养后 ,制备成悬液备用。 3 7只SD大鼠均结扎冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌梗死模型后 ,随机分... 目的 :观察静脉移植骨髓间质干细胞 (MSC)及早期抗炎治疗心肌梗死的可能性及对心肌梗死后心功能的影响。方法 :大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)培养后 ,制备成悬液备用。 3 7只SD大鼠均结扎冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌梗死模型后 ,随机分为 4组 :ArMSC加地塞米松组 (n =10 ) ;BrMSC组 (n =10 ) ;C地塞米松组 (n =10 ) ;D心肌梗死对照组 (n =7只 )。 4周后 ,观察心脏的结构、功能改变。结果 :与对照组及地塞米松组相比 ,rMSC加地塞米松组、干细胞组的左室结构与功能明显改善 (P <0 .0 5 ) ,干细胞组低于地塞米松加干细胞组 (P <0 . 0 5 ) ,地塞米松组与对照组无明显差别 (P >0. 0 5 )。结论 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 地塞米松 抗炎治疗 对照组 急性心肌梗死 联合 大鼠 结论 培养 目的
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pcDNA3.1(+)/GDF-5真核表达质粒的构建及其在小鼠骨髓基质干细胞的表达
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作者 张宇坤 杨述华 +2 位作者 杨操 吴星火 孙立 《中国药师》 CAS 2006年第9期786-789,共4页
目的:通过基因重组技术体外构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/GDF-5,并检测其在小鼠骨髓基质干细胞中的表达。方法:提取孕14 d小鼠胚胎肢芽组织总RNA,RT-PCR扩增,将扩增产物GDF-5基因片断插入至pcDNA 3.1(+)载体,并进行酶切鉴定及测序;... 目的:通过基因重组技术体外构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/GDF-5,并检测其在小鼠骨髓基质干细胞中的表达。方法:提取孕14 d小鼠胚胎肢芽组织总RNA,RT-PCR扩增,将扩增产物GDF-5基因片断插入至pcDNA 3.1(+)载体,并进行酶切鉴定及测序;脂质体介导pcDNA 3.1(+)/GDF-5重组质粒瞬时转染小鼠MSC,RT-PCR和免疫细胞化学检测GDF-5的表达。结果:重组质粒双酶切图谱显示有5.4 kbp和1.6 kbp两条带;测序结果与Genbank中的序列完全相同;转染后RT- PCR显示实验组有一219bp特异性条带,免疫细胞化学检测发现实验组细胞胞浆内有棕色阳性染色,实验对照组和空白组均为阴性。结论:本实验成功构建pcDNA3.1(+)/GDF-5真核表达质粒,转染小鼠MSC中有GDF-5表达,为进一步研究其在软骨发育机制和软骨骨组织工程领域提供了实验基础。 展开更多
关键词 GDF-5 基因转染 骨髓基质干细胞
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高糖对人视网膜色素上皮细胞神经钙黏连蛋白和纤维连接蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 毕文娇 李睿姝 +2 位作者 侯定善 范妍 张晓梅 《国际眼科杂志》 CAS 2014年第9期1578-1583,共6页
目的:体外建立高糖培养人视网膜色素上皮(hRPE)细胞模型,观察高糖条件下RPE细胞神经钙黏连蛋白(N-cadherin)和纤维连接蛋白(fibronectin)的表达变化,探讨高糖对RPE细胞发生上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养hRPE细胞,以60mmol/L... 目的:体外建立高糖培养人视网膜色素上皮(hRPE)细胞模型,观察高糖条件下RPE细胞神经钙黏连蛋白(N-cadherin)和纤维连接蛋白(fibronectin)的表达变化,探讨高糖对RPE细胞发生上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养hRPE细胞,以60mmol/L的葡萄糖建立高糖模型,实验分对照组(5.5mmol/L的葡萄糖)和高糖24,48,72h组,用免疫组织化学法及Real-time PCR技术检测各组RPE细胞N-cadherin和fibronectin的表达。结果:高糖组RPE细胞出现排列紊乱,胞体变长变大,高糖72h组最明显。免疫组织化学法检测结果显示:与对照组相比,高糖组RPE细胞N-cadherin表达呈下降趋势;而fibronectin表达出现并呈升高趋势。Real-time PCR检测结果显示:与对照组相比,高糖组RPE细胞N-cadherin mRNA表达水平在24h时出现下降,72h时降低最明显(F=12.252,P=0.000),24h组与对照组相比差异无统计学意义,48h及72h组分别与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,高糖组RPE细胞fibronectin mRNA表达水平在24h时出现升高,72h时升高最明显(F=50.543,P=0.000),24h组与对照组相比差异无统计学意义,48h及72h组fibronectin mRNA表达水平明显升高,分别与对照组相比差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000)。结论:高糖条件下RPE细胞上皮标记物N-cadherin表达下调,间质标记物fibronectin表达出现,发生EMT改变,这一现象为探讨增生性糖尿病视网膜病变的发病机制及其防治提供新的思路。 展开更多
关键词 人视网膜色素上皮细胞 高糖 上皮间质转化 神经钙黏连蛋白 纤维连接蛋白
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鳖甲煎丸通过Wnt/β-catenin信号通路逆转大鼠肝卵圆细胞EMT的机制 被引量:16
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作者 招文婷 孙嘉玲 +7 位作者 文彬 孙海涛 杨雪梅 陈炜聪 何春雨 钟晓丹 陈冠新 贺松其 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期38-45,共8页
目的:研究鳖甲煎丸对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝卵圆细胞WB-F344上皮间质转化(EMT)的影响,探讨其逆转EMT改变的作用机制。方法:将WB-F344细胞随机分为空白组,TGF-β1模型组(10μg·L-1TGF-β1),鳖甲煎丸低剂量组(10μg&... 目的:研究鳖甲煎丸对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝卵圆细胞WB-F344上皮间质转化(EMT)的影响,探讨其逆转EMT改变的作用机制。方法:将WB-F344细胞随机分为空白组,TGF-β1模型组(10μg·L-1TGF-β1),鳖甲煎丸低剂量组(10μg·L-1TGF-β1+0.55 g·kg^(-1)鳖甲煎丸),鳖甲煎丸中剂量组(10μg·L-1TGF-β1+1.1 g·kg^(-1)鳖甲煎丸),鳖甲煎丸高剂量组(10μg·L-1TGF-β1+2.2 g·kg^(-1)鳖甲煎丸),除空白组外,均采用TGF-β1诱导WB-F344细胞构建EMT模型,分别加入鳖甲煎丸低、中、高剂量含药血清处理细胞,采用细胞划痕实验检测WB-F344细胞迁移能力的改变;使用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)表达的变化;使用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测β-连环蛋白(β-catenin)mRNA表达的改变;使用细胞免疫荧光法检测β-catenin的表达。结果:与空白组比较,TGF-β1诱导WB-F344细胞4 d,WB-F344细胞间隙从紧密逐渐变得松散,细胞形态由鹅卵石状向成纤维样细胞转变,且E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin蛋白表达升高(P<0.01),说明成功构建了WB-F344细胞EMT模型。划痕实验结果显示,与空白组比较,TGF-β1模型组WB-F344细胞的迁移能力增强(P<0.01);与TGF-β1模型组比较,鳖甲煎丸中、高剂量组可以明显抑制WB-F344细胞的迁移能力(P<0.05)。Western blot结果显示,与空白组比较,TGF-β1模型组E-cadherin蛋白表达水平降低,N-cadherin,Vimentin蛋白表达水平升高(P<0.01);与TGF-β1模型组比较,鳖甲煎丸中、高剂量组E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin,Vimentin蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,TGF-β1模型组中β-catenin mRNA表达升高(P<0.01);与TGF-β1模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组中β-catenin mRNA的表达降低(P<0.01)。细胞免疫荧光结果显示,与空白组比较,TGF-β1模型组β-catenin在细胞核内荧光表达增强;与TGF-β1模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组β-catenin在细胞核内荧光表达减弱,且鳖甲煎丸对细胞核内β-catenin抑制作用与其浓度呈正相关。结论:鳖甲煎丸可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,逆转TGF-β1诱导WB-F344细胞的EMT进程,抑制WB-F344细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 鳖甲煎丸 肝卵圆细胞 上皮间质转化 Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路 肝癌前病变 转化生成因子-β1
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骨髓间质干细胞静脉移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究 被引量:7
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作者 朱志勇 周庆国 +1 位作者 魏毅东 魏经汉 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期161-163,共3页
目的:观察多次静脉移植骨髓间质干细胞治疗心肌梗死的可行性及对心肌梗死后心功能的影响。方法:骨髓间质干细胞培养传至5代后,制备成终浓度为4×10^9个/L的悬液备用。将40只SD大鼠均结扎冠状动脉左前降支,建立急性心肌梗死模... 目的:观察多次静脉移植骨髓间质干细胞治疗心肌梗死的可行性及对心肌梗死后心功能的影响。方法:骨髓间质干细胞培养传至5代后,制备成终浓度为4×10^9个/L的悬液备用。将40只SD大鼠均结扎冠状动脉左前降支,建立急性心肌梗死模型后,随机分为3组:①对照组(10只):只静脉注射0.85%氯化钠溶液;②静脉移植组(15只):心肌梗死模型制备后24h,从尾静脉注射骨髓间质干细胞0.5ml(含2×10^9个/L)连续7d;③心外膜移植组(15只):心肌梗死模型制备后1~3h,于梗死周边区(心肌颜色苍白区周边)分6点注射骨髓问质干细胞,每点50μl。5周后,观察3组的生存情况及心脏的结构功能。结果:心肌梗死对照组有3只大鼠死亡,其他组无死亡。与对照组相比,静脉移植组、心外膜移植组的左室结构与功能明显改善(P〈0.05),静脉移植组与心外膜移植组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:骨髓间质干细胞可以在体外大量扩增,异体输入无不良反应,静脉注射与直接心肌注射无明显差别,方法可行。 展开更多
关键词 心肌梗死 骨髓间质干细胞 细胞移植
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siRNA干扰SIRT1对辐射后IL-6表达的影响
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作者 王璐 李晴 +6 位作者 徐畅 王彦 杜利清 王芹 杨福军 孙元明 刘强 《国际放射医学核医学杂志》 2015年第5期423-426,共4页
目的 研究siRNA干扰沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)对间充质干细胞(MSCs)电离辐射后诱导的炎性因子白细胞介素6(IL-6)的影响,探究SIRT1的辐射防护作用.方法 使用0、2、4、8 Gy照射MSCs,分别在照后3、6、12、24 h提取总RNA和总蛋... 目的 研究siRNA干扰沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)对间充质干细胞(MSCs)电离辐射后诱导的炎性因子白细胞介素6(IL-6)的影响,探究SIRT1的辐射防护作用.方法 使用0、2、4、8 Gy照射MSCs,分别在照后3、6、12、24 h提取总RNA和总蛋白,检测IL-6表达水平;将MSCs分为空白对照组、单纯照射组和SIRT1干扰联合照射组,使用Western blot、RT-PCR检测SIRT1和IL-6胞内表达.结果 MSCs在电离照射后,IL-6的表达水平先升高后降低;在照后12h达到最高,24 h恢复基准水平;而联合SIRT1干扰会引起IL-6水平进一步升高,加重MSCs电离辐射后的炎症反应.结论 SIRT1可能通过抑制电离辐射诱导的炎性因子IL-6的表达,发挥辐射防护作用. 展开更多
关键词 沉默信息调节蛋白质类 RNA干扰 间充质干细胞 白细胞介素6 辐射 电离 INTERLEUKIN-6
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