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Analyzing the cellular and molecular atlas of ovarian mesenchymal cells provides a strategy against female reproductive aging 被引量:3
1
作者 Longzhong Jia Wenji Wang +15 位作者 Jing Liang Shudong Niu Yibo Wang Jian Yang Lingyu Li Ge Wang Xueqiang Xu Lu Mu Kaixin Cheng Xuebing Yang Yijing Wang Haoshu Luo Guoliang Xia Yuwen Ke Yan Zhang Hua Zhang 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2023年第12期2818-2836,共19页
Ovarian mesenchymal cells(oMCs)constitute a distinct microenvironment that supports folliculogenesis under physiological conditions.Supplementation of exogenous non-ovarian mesenchymal-related cells has been reported ... Ovarian mesenchymal cells(oMCs)constitute a distinct microenvironment that supports folliculogenesis under physiological conditions.Supplementation of exogenous non-ovarian mesenchymal-related cells has been reported to be an efficient approach to improve ovarian functions.However,the development and cellular and molecular characteristics of endogenous oMCs remain largely unexplored.In this study,we surveyed the single-cell transcriptomic landscape to dissect the cellular and molecular changes associated with the aging of oMCs in mice.Our results showed that the oMCs were composed of five ovarian differentiatedMC(odMC)populations and one ovarian mesenchymal progenitor(oMP)cell population.These cells could differentiate into various odMCs via an oMP-derived route to construct the ovarian stroma structures.Comparative analysis revealed that ovarian aging was associated with decreased quantity of oMP cells and reduced quality of odMCs.Based on the findings of bioinformatics analysis,we designed different strategies involving supplementation with young oMCs to examine their effects on female fertility and health.Our functional investigations revealed that oMCs supplementation prior to ovarian senescence was the optimal method to improve female fertility and extend the reproductive lifespan of aged females in the longterm. 展开更多
关键词 single-cell analysis OVARY mesenchyma mesenchymal progenitor cells aging INFERTILITY
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Hematopoietic stem cell transplantation for non-malignant gastrointestinal diseases
2
作者 Abdulbaqi Al-toma Petula Nijeboer +2 位作者 Gerd Bouma Otto Visser Chris JJ Mulder 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第46期17368-17375,共8页
Both, autologous and allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) can be used to cure or ameliorate a variety of malignant and non-malignant diseases. The rationale behind this strategy is based on the co... Both, autologous and allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) can be used to cure or ameliorate a variety of malignant and non-malignant diseases. The rationale behind this strategy is based on the concept of immunoablation using high-dose chemotherapy, with subsequent regeneration of naive T-lymphocytes derived from reinfused hematopoietic progenitor cells. In addition, the use of HSCT allows for the administration of high-dose chemotherapy (whether or not combined with immunomodulating agents such as antithymocyte globulin) resulting in a prompt remission in therapy-refractory patients. This review gives an update of the major areas of successful uses of HSCT in non-malignant gastrointestinal disorders. A Medline search has been conducted and all relevant published data were analyzed. HSCT has been proved successful in treating refractory Crohn&#x02019;s disease (CD). Patients with refractory celiac disease type II and a high risk of developing enteropathy associated T-cell lymphoma have shown promising improvement. Data concerning HSCT and mesenchymal SCT in end-stage chronic liver diseases are encouraging. In refractory autoimmune gastrointestinal diseases high-dose chemotherapy followed by HSCT seems feasible and safe and might result in long-term improvement of disease activity. Mesenchymal SCT for a selected group of CD is promising and may represent a significant therapeutic alternative in treating fistulas in CD. 展开更多
关键词 Hematopoietic stem cell transplantation mesenchymal stem cells Non-malignant gastrointestinal diseases Celiac disease Refractory celiac disease LYMPHOMA Crohn’ s Ulcerative colitis Cirrhosis
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膝关节骨性关节炎股骨髁负重区与非负重区组织形态学观察的研究 被引量:1
3
作者 陈德胜 张晨 +4 位作者 王硕 袁昂 王文鹏 郭凤英 李燕 《中国当代医药》 CAS 2023年第20期5-8,F0003,共5页
目的观察膝关节骨性关节炎患者股骨髁负重区与非负重区软骨组织形态学的改变,从而探讨膝关节骨性关节炎软骨退变的病理过程。方法选取2021年8月至2022年9月就诊于宁夏回族自治区人民医院行人工全膝关节置换术的56例原发性膝骨性关节炎... 目的观察膝关节骨性关节炎患者股骨髁负重区与非负重区软骨组织形态学的改变,从而探讨膝关节骨性关节炎软骨退变的病理过程。方法选取2021年8月至2022年9月就诊于宁夏回族自治区人民医院行人工全膝关节置换术的56例原发性膝骨性关节炎伴内翻畸形患者为研究对象,采集患者术中截取的股骨髁部分作为临床标本,将股骨髁磨损严重的关节软骨作为负重区(观察组),将股骨髁磨损较轻的关节软骨作为非负重区(对照组),进行HE染色和番红O染色,镜下观察观察组与对照组的组织病理形态;通过扫描电子显微镜观察对比观察组及对照组软骨表面的超微结构特征。结果大体观察显示,观察组股骨髁软骨面缺损明显,粗糙欠平整,边缘形成了部分骨赘,软骨下骨可见松质骨硬化灶,对照组股骨髁软骨面光滑且平整,软骨表面色泽清亮、均匀,边缘无骨赘生成。HE染色显示,观察组中软骨细胞数目大量减少,排列不整齐,细胞增生异常,成簇出现,对照组关节软骨基质染色均匀,软骨细胞数目正常,形态完整饱满,细胞核、细胞质清晰可见。番红O染色显示,观察组中软骨细胞形态明显改变,软骨层纤维化,软骨基质淡染,对照组软骨细胞大小形态正常,排列较为整齐,软骨基质染色均匀,潮线正常;扫描电子显微镜观察:观察组关节软骨表面结构层次不清,可见大量大小不一的孔隙分布,胶原纤维不成形,正常软骨细胞极少见;对照组关节软骨表面相对平整,胶原纤维呈束且排列整齐,可见正常软骨细胞。结论软骨细胞生理功能的正常发挥需要软骨细胞基质代谢水平的稳定,KOA患者是由于多种原因引起软骨基质变化引起膝关节软骨退行性变。 展开更多
关键词 膝关节骨性关节炎 关节软骨 软骨细胞 软骨基质 间充质干细胞 退行性变
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骨髓间充质干细胞来源外泌体通过ERK1/2信号通路调控子痫前期滋养层细胞侵袭和增殖相关机制研究 被引量:1
4
作者 宋素香 徐琳 《实用癌症杂志》 2023年第7期1045-1050,共6页
目的探究骨髓间充质干细胞(human bone mesenchyma stem cell,BMSCs)来源外泌体通过ERK1/2信号通路调控子痫前期滋养层细胞的增殖和侵袭的机制。方法以大鼠来源的BMSCs为种子细胞,采用超速离心法进行收集BMSCs来源外泌体。将子痫前期滋... 目的探究骨髓间充质干细胞(human bone mesenchyma stem cell,BMSCs)来源外泌体通过ERK1/2信号通路调控子痫前期滋养层细胞的增殖和侵袭的机制。方法以大鼠来源的BMSCs为种子细胞,采用超速离心法进行收集BMSCs来源外泌体。将子痫前期滋养层细胞分成3组,即实验组,抑制剂组和对照组,其中实验组滋养层细胞与外泌体共培养,抑制剂组滋养层细胞与外泌体共培养后,加入ERK1/2的抑制剂AZD0364,对照组滋养层细胞与PBS溶液共培养。应用CCK-8试剂盒和Transwell试剂盒检测细胞的增殖和侵袭能力。应用RT-PCR和Western blot检测各组细胞的ERK1/2和核因子NF-κB的相对表达量。结果透射电镜结果显示,BMSCs来源外泌体为直径50~150 nm的双层膜囊泡状结构。外泌体与子痫前期滋养层细胞共培养的过程中,可见MEG-01细胞可以摄取并内化PKH67标记的外泌体。CCK-8试剂盒结果显示,实验组细胞增殖率要明显高于对照组,而抑制剂组细胞的增殖率明显低于实验组(P<0.05)。Transwell试剂盒检测结果显示,实验组细胞的侵袭明显强于对照组(P<0.05),抑制剂组细胞的侵袭明显弱于实验组(P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示,实验组ERK1/2和NF-κB的相对表达量明显高于对照组(P<0.05),抑制剂组ERK1/2和NF-κB的相对表达量明显低于实验组(P<0.05)。结论BMSCs来源外泌体可以提高ERK1/2信号通路表达,进而促进子痫前期滋养层细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 子痫前期 增殖 侵袭
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3种不同来源的围产期间充质干细胞外泌体对大鼠肾间质纤维化的抑制作用及相关机制
5
作者 田秀丽 乔莲 裴明 《辽宁中医杂志》 2023年第12期232-236,共5页
目的分析3种不同来源的围产期间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)外泌体对大鼠肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)的抑制作用及相关机制。方法采用单侧输尿管结扎法构建大鼠RIF模型。按照随机数字表法将大鼠分为假... 目的分析3种不同来源的围产期间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)外泌体对大鼠肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)的抑制作用及相关机制。方法采用单侧输尿管结扎法构建大鼠RIF模型。按照随机数字表法将大鼠分为假手术组(S组)、模型组(M组)、羊水间充质干细胞(amniotic fluid MSC,AFMSC)-外泌体(exosomes,Ex)组(AFE组)、脐带间充质干细胞(umbilical cord MSC,UC-MSC)-Ex组(UCE组)和胎盘间充质干细胞(placental MSC,PMSC)-Ex组(PE组)。AFE组、UCE组和PE组分别在术后24 h通过尾静脉注射250μg对应外泌体,之后每隔2 d注射1次,共注射3次。于规定时间对大鼠体质量和血清生化指标检测、分析。治疗14 d后处死大鼠,对肾脏组织中胶原沉积、微血管密度(microvascular density,MVD)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原Α1(type I collagenΑ1,COL1A1)和赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysine oxidase like protein 2,LOXL2)蛋白表达量进行检测、分析,综合评价MSC外泌体对大鼠肾脏纤维化的抑制效果。结果与假手术组相比,模型组大鼠肾脏组织结构破坏严重,炎性因子、成纤维细胞和胶原纤维大量生成,模型组、AFE组、UCE组和PE组大鼠体质量、E-cadherin蛋白质表达量显著降低,血清尿氮素、血清肌酐、肾组织胶原容积分数、N-cadherin、TGF-β1、α-SMA、COL1A1和LOXL2蛋白质表达量均显著升高(P<0.05)。3种不同来源的围产期MSC外泌体干预后,AFE组、UCE组和PE组大鼠肾脏组织得到部分恢复,炎性因子、成纤维细胞和胶原纤维生产减少。大鼠体质量、E-cadherin蛋白质表达量显著升高,血清尿氮素、血清肌酐、肾组织胶原容积分数、N-cadherin、TGF-β1、α-SMA、COL1A1和LOXL2蛋白质表达量均显著降低(P<0.05)。3个治疗组比较,UCE组大鼠体质量、肾脏结构、炎症浸润等改善最明显。结论3种不同来源的围产期MSC外泌体均可减轻大鼠肾组织病理性损伤,延缓大鼠RIF的进程,其中脐带MSC外泌体延缓效果最明显。 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 肾间质纤维化 尿氮素 肌酐 胶原容积分数 钙黏蛋白
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骨髓间充质干细胞的生物学特性 被引量:50
6
作者 李秀森 郭子宽 +4 位作者 杨靖清 刘晓丹 侯春梅 唐佩弦 毛宁 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期346-348,共3页
从人骨髓中分离人间充质干细胞 (MSCs) ,台盼蓝拒染法测定细胞增殖状态 ,MTT实验检测不同细胞因子对细胞增殖的影响。应用流式细胞学技术测定细胞周期及细胞表面抗原特征并观察细胞组织化学特点。结果 :MSCs具有独特的表征 ,即CD2 9,CD4... 从人骨髓中分离人间充质干细胞 (MSCs) ,台盼蓝拒染法测定细胞增殖状态 ,MTT实验检测不同细胞因子对细胞增殖的影响。应用流式细胞学技术测定细胞周期及细胞表面抗原特征并观察细胞组织化学特点。结果 :MSCs具有独特的表征 ,即CD2 9,CD44 ,CD16 6阳性 ,CD34,CD45 ,HLA DR和荆豆素阴性。细胞化学结果显示 ,几乎所有细胞酸性萘酚醋酸酯酶 (ANAE)及糖原 (PAS反应 )阳性 ,酸性磷酸酶 (ACP)及苏丹黑反应 (SB)阴性 ,约5 %细胞碱性磷酸酶 (ALP)阳性。细胞倍增时间约为 30h ,细胞周期分析显示约 10 %细胞处于S期。MTT结果表明 ,MSCs对多种细胞因子的增殖反应性不同 ,TNF α ,IFN γ ,干细胞因子 (SCF)及胰岛素样生长因子 - 1(IGF 1)明显促进细胞的增殖。提示 :MSCs是一群均一的细胞 ,具有独特的增殖、表征及组织化学特征。MSCs对细胞因子的不同反应性 ,为筛选合适的细胞体外扩增及维持体系提供了有意义的线索。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 细胞因子 生物学特性
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同种异体骨髓间充质干细胞对肾小管周毛细血管丛修复影响的研究 被引量:8
7
作者 邹杰 冯江敏 +2 位作者 李维 郭伟 王力宁 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期146-151,共6页
目的探讨同种异体Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)是否具修复肾小管周毛细血管丛(PTC)潜能,同时观察其对肾小管-间质低氧状态的改善。方法从骨髓中提纯单核细胞,体外扩增、鉴定为MSCs。将30只雌性大鼠随机分为非移植组、MSCs移植组及... 目的探讨同种异体Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)是否具修复肾小管周毛细血管丛(PTC)潜能,同时观察其对肾小管-间质低氧状态的改善。方法从骨髓中提纯单核细胞,体外扩增、鉴定为MSCs。将30只雌性大鼠随机分为非移植组、MSCs移植组及正常对照组。非移植组和MSCs移植组经关木通水煎剂灌胃12周,制成慢性马兜铃酸肾病(CAAN)大鼠模型。第12周,MSCs移植组经尾静脉输入1mL MSCs悬液;非移植组和正常对照组经尾静脉输入1mL生理盐水。第16周留取血、尿及肾组织标本。肾组织连续切片,检测Y染色体和CD34双阳性细胞的分布,并作病理、免疫组织化学、Western blotting、RT-PCR等检查。结果MSCs移植组肾组织中可见Y染色体和CD34双阳性细胞。第16周,非移植组与MSCs移植组结果:PTC密度分别为(5.26±0.78)/0.13mm2、(26.47±1.56)/0.13mm2(P<0.01);低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α,IOD值)分别为(6.74±0.67)×103、(25.27±1.46)×103(P<0.01);MSCs移植组较非移植组CD34显著增强(P<0.01)。结论同种异体MSCs可向肾小管周毛细血管丛内皮细胞分化修复PTC,从而改善肾小管-间质低氧状态。 展开更多
关键词 干细胞 毛细血管 马兜铃酸 肾间质
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脐带华通胶间充质干细胞的分离培养及鉴定 被引量:13
8
作者 陈宇 张宁坤 +3 位作者 杨明 沈燕华 王丽华 高连如 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期2412-2415,2420,共5页
目的探讨人脐带华通胶间充质干细胞体外分离、培养方法,并通过成脂成骨诱导及表面标记物的检测进行鉴定。方法剔除脐带动脉、静脉和外膜,取遗留的华通胶组织,将其剪成细小的碎块,用浓度为0.2%的Ⅱ型胶原酶消化,提取脐带华通胶间充质干细... 目的探讨人脐带华通胶间充质干细胞体外分离、培养方法,并通过成脂成骨诱导及表面标记物的检测进行鉴定。方法剔除脐带动脉、静脉和外膜,取遗留的华通胶组织,将其剪成细小的碎块,用浓度为0.2%的Ⅱ型胶原酶消化,提取脐带华通胶间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44、CD90、CD105、CD73、HLA-ABC、CD34、CD45及HLA-DR,成骨细胞、成脂细胞分化诱导。结果脐带华通胶经胶原酶消化后,可提取大量间充质干细胞,流式细胞仪检测脐带华通胶干细胞不表达造血干细胞的表面特征,而表达间充质干细胞的标志,例如CD44、CD90、CD105及CD73,并且干细胞HLA-ABC阳性表达,CD34、CD45及HLA-DR呈阴性。组织化学染色显示茜素红、碱性磷酸酶及油红染色强阳性。结论该方法可较好地分离脐带华通胶间充质干细胞,将为实验研究和临床应用提供一种新的干细胞来源。 展开更多
关键词 脐带 华通胶 间充质干细胞 分离培养 鉴定
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骨髓间充质干细胞对多发性骨髓瘤细胞迁移和归巢特性的影响 被引量:6
9
作者 张艳丽 傅晋翔 +2 位作者 张宏 朱慧玲 欧阳桂芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期469-473,共5页
目的:构建骨髓间充质干细胞(BMMSC)与多发性骨髓瘤(MM)细胞共培养体系,探讨共培养后BMMSC对M M细胞迁移和归巢的影响。方法:采用贴壁筛选法培养绿色荧光蛋白(GFP)小鼠BM M SC,建立M M细胞株XG-7细胞和BMMSC间接及直接共培养体系;用CD13... 目的:构建骨髓间充质干细胞(BMMSC)与多发性骨髓瘤(MM)细胞共培养体系,探讨共培养后BMMSC对M M细胞迁移和归巢的影响。方法:采用贴壁筛选法培养绿色荧光蛋白(GFP)小鼠BM M SC,建立M M细胞株XG-7细胞和BMMSC间接及直接共培养体系;用CD138磁珠法分离直接共培养的XG-7细胞及BMMSC,用台盼蓝染色计数法检测XG-7细胞的增殖水平、Annexin V/PI测定细胞凋亡水平、单丹(磺)酰戊二胺(MDC)法检测细胞自噬泡数量、在共聚焦显微镜下动态观察BMMSC与PE-CD138标记的XG-7细胞共培养过程的分子流向和分布。结果:经共培养后,BMMSC促进XG-7细胞增殖;单独培养后凋亡率为(17.90±1.46)%,直接和间接共培养后凋亡率分别降至(6.23±0.12)%和(6.97±0.03)%(P<0.01);XG-7细胞单独培养及与BMMSC共培养后,荧光显微镜下均可出现自噬,共培养后的XG-7细胞自噬现象相对少见;在共聚焦荧光显微镜下XG-7细胞是以极化的胞膜区同BMMSC接触,加入甲基β环糊精后极化现象消失。结论:BMMSC可促进XG-7细胞的生长,且增强XG-7细胞抗凋亡及抗自噬能力,影响骨髓瘤细胞的迁移和归巢。 展开更多
关键词 间充质干细胞 多发性骨髓瘤 自噬 归巢 绿色荧光蛋白
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人脐带间充质干细胞的分离、培养及鉴定 被引量:7
10
作者 韩华 薛改 +2 位作者 张俊勤 闫萍 李艳丽 《河北医科大学学报》 CAS 2015年第1期21-23,共3页
目的探讨人脐带华通胶间充质干细胞体外分离、培养、鉴定及冻存、复苏的方法。方法收集健康足月新生儿脐带组织,采用组织块贴壁法分离、培养脐带间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面抗原,将细胞冻存3个月后复苏,鉴定复苏后细胞的特性... 目的探讨人脐带华通胶间充质干细胞体外分离、培养、鉴定及冻存、复苏的方法。方法收集健康足月新生儿脐带组织,采用组织块贴壁法分离、培养脐带间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面抗原,将细胞冻存3个月后复苏,鉴定复苏后细胞的特性。结果组织块贴壁法获得脐带间充质干细胞成功率高;细胞表面高表达CD29、CD44、CD90和CD105,不表达造血干细胞表型CD34、CD45等;冻存后再复苏细胞活性高达80%~90%。结论组织块贴壁法可以从人脐带华通胶中较好的分离、培养出间充质干细胞,为干细胞移植实验研究和临床治疗提供了理想的细胞来源。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 胎血
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苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响 被引量:8
11
作者 高红宇 何晓峰 +3 位作者 邵菊芳 易艳 黄晓丽 刘晓城 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期535-539,共5页
目的探讨苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响及可能机制。方法大鼠行单侧输尿管结扎(UUO)建立肾小管间质纤维化模型。实验分为假手术、UUO及苦参素治疗组。治疗组在UUO的基础上每天以苦参素100mg/kg腹腔注射。各... 目的探讨苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响及可能机制。方法大鼠行单侧输尿管结扎(UUO)建立肾小管间质纤维化模型。实验分为假手术、UUO及苦参素治疗组。治疗组在UUO的基础上每天以苦参素100mg/kg腹腔注射。各组于术后第7、14、21天分别处死5只大鼠,分别检测大鼠血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)及24h尿蛋白定量。用PAS及Masson染色法观察肾脏病理改变。用免疫组织化学法观察转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达。用RT-PCR法测定肾组织TGF-β1及α-SMA mRNA水平。结果与UUO组比较,苦参素治疗组肾脏TGF-β1、Smad3、α-SMA及ColⅠ的表达明显减少,肾小管损害和肾间质纤维化的程度也明显减轻。治疗组TGF-β1 mRNA及α-SMA mRNA表达显著低于对应时间点的UUO组。结论苦参素可下调TGF-β1、ColⅠ的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化及肌成纤维细胞的活化与增殖,其作用途径可能是通过下调Smad3的表达,从而干预Smad3介导的细胞内信号转导,最终减轻肾间质纤维化。 展开更多
关键词 苦参素 肾间质纤维化 肾小管上皮细胞-间质转分化
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不同强度静电磁场对体外培养骨髓间充质干细胞增殖与分化的影响 被引量:5
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作者 周建 陈克明 +2 位作者 葛宝丰 程国政 韦哲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期650-657,共8页
本实验研究不同强度静电磁场对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞增殖与分化作用.体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,传代后随机分为6组,分别用强度为0(对照组)、0.9、1.2、1.5、1.8和2.1 mT的静电磁场处理,每d每次处理30 min.在磁场处理后... 本实验研究不同强度静电磁场对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞增殖与分化作用.体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,传代后随机分为6组,分别用强度为0(对照组)、0.9、1.2、1.5、1.8和2.1 mT的静电磁场处理,每d每次处理30 min.在磁场处理后的9~10 d,骨髓间充质干细胞开始出现钙化小颗粒.0.9 mT组抑制骨髓间充质干细胞增殖,1.5到2.1mT组促进骨髓间充质干细胞增殖.在磁场处理后的12 d和15 d,1.5和1.8 mT组极显著地增加了碱性磷酸酶(AKP)活性.采用AKP组织化学染色和钙化结节染色对骨髓间充质干细胞成骨性分化进行鉴定,AKP组织化学染色和钙化结节染色都呈现了极强的阳性结果,尤以1.5 mT和1.8 mT阳性染色面积最大.在SEMFs处理后的48 h和96 h,1.5 mT和1.8 mT组胶原I(collagen-Ⅰ)和骨形态发生蛋白2(bonemorphogenetic protein-2,Bmp-2)基因表达水平显著高于对照组.在SEMFs处理后的12 d,BMP-2蛋白表达量高于对照组.研究表明,0.9 mT组抑制骨髓间充质干细胞增殖,1.5 mT到2.1 mT组不同强度静电磁场促进体外培养骨髓间充质干细胞的增殖.磁场组能促进骨髓间充质干细胞成骨性分化,其中尤以1.5 mT和1.8 mT组促进大鼠骨髓间充质干细胞分化作用效果最为明显. 展开更多
关键词 大鼠骨髓间充质干细胞 静电磁场 成骨性分化
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冻存复苏对脐带间充质干细胞生物学特性的影响 被引量:4
13
作者 韩华 赵静 +2 位作者 赵红伟 李洁 闫萍 《现代中西医结合杂志》 CAS 2016年第23期2512-2514,2518,共4页
目的观察脐带间充质干细胞经冻存复苏后的生物学特性,并鉴定其是否具有间充质干细胞的特征。方法采用组织块贴壁法从人脐带组织中分离培养间充质干细胞,将传至第3代的细胞进行冻存6个月后复苏,观察冻存前和冻存复苏后细胞的形态学变化,... 目的观察脐带间充质干细胞经冻存复苏后的生物学特性,并鉴定其是否具有间充质干细胞的特征。方法采用组织块贴壁法从人脐带组织中分离培养间充质干细胞,将传至第3代的细胞进行冻存6个月后复苏,观察冻存前和冻存复苏后细胞的形态学变化,比较冻存前后细胞的存活率,测定细胞生长曲线,并用流式细胞仪检测冻存后细胞表面抗原的表达情况。结果组织块贴壁法可以成功地分离培养脐带间充质干细胞;经低温冻存复苏后细胞仍保持贴壁生长的特性,形态未发生明显变化;复苏后细胞存活率与未冻存细胞相比差异无统计学意义;冻存前后细胞的生长曲线相似;流式细胞仪分析冻存后细胞表面高表达间充质干细胞抗原CD29、CD90、CD44、CD105,低表达或不表达造血干细胞抗原CD34、CD45和白细胞相关抗原HLA-DR。结论冻存复苏对脐带间充质干细胞的生物学特性无明显影响,冻存后细胞符合间充质干细胞的基本要求。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐带 冻存 生物学特性
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猴骨髓间充质干细胞的分离及多向诱导分化 被引量:3
14
作者 曹军 金岩 郑崇勋 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2002年第24期2305-2308,共4页
目的 探讨猴骨髓间充质干细胞 (MSCs)体外生长特性及多向分化潜力 .方法 以Percoll(质量密度 10 73g·L-1)非连续密度梯度离心分离出骨髓悬液中的MSCs,在非诱导条件下进行培养 ,观察细胞的形态、生长状况 .取原代体外培养3wk的MSC... 目的 探讨猴骨髓间充质干细胞 (MSCs)体外生长特性及多向分化潜力 .方法 以Percoll(质量密度 10 73g·L-1)非连续密度梯度离心分离出骨髓悬液中的MSCs,在非诱导条件下进行培养 ,观察细胞的形态、生长状况 .取原代体外培养3wk的MSCs分别向成软骨细胞、成骨细胞、成脂肪细胞及成肌细胞方向诱导 ,观察其诱导分化结果 .结果 原代培养的MSCs增殖缓慢 ,细胞增殖率和形态分化不均一 ,在培养过程中有多种形态的细胞出现 ,如伸展及增殖均不明显的圆形细胞 ,伸展充分但增值不明显的片状细胞、神经元样细胞 ,还可见增殖明显的克隆团状或条带状细胞群出现 .传代培养的MSCs细胞仍可见增殖情况及形态分化的多样性 ,但有“拉网”现象出现 .所培养的MSCs经诱导可向软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞发展分化 .结论 体外培养的猴MSCs细胞具有形态分化、增殖情况多样性的特点 ,并具有多向分化潜能 . 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分离 细胞分化
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人脐带华通胶间充质干细胞的分离培养及标记方法研究 被引量:2
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作者 韩华 李洁 +1 位作者 薛改 张俊勤 《医疗卫生装备》 CAS 2016年第12期28-31,共4页
目的 :探讨从人脐带华通胶中分离培养间充质干细胞的方法,并对细胞进行标记,为细胞移植奠定基础。方法:采用组织块贴壁法分离培养人脐带华通胶间充质干细胞并进行传代,观察细胞的形态学特征,测定细胞生长曲线,通过流式细胞仪检测细胞免... 目的 :探讨从人脐带华通胶中分离培养间充质干细胞的方法,并对细胞进行标记,为细胞移植奠定基础。方法:采用组织块贴壁法分离培养人脐带华通胶间充质干细胞并进行传代,观察细胞的形态学特征,测定细胞生长曲线,通过流式细胞仪检测细胞免疫表型;用荧光染料PKH26对获取的细胞进行体外标记,观察标记细胞形态并记录其生长曲线。结果:组织块贴壁法可以成功地从人脐带华通胶中培养出间充质干细胞,并且在连续增殖传代过程中细胞形态未发生明显变化,细胞生长曲线相似;细胞能够高表达基质细胞抗原(CD29、CD90、CD44、CD105),而低表达造血干细胞抗原(CD34、CD45)和白细胞相关抗原(HLA-DR);PKH26可以标记脐带间充质干细胞,显示红色荧光,且标记细胞形态良好,与未标记细胞的生长曲线相似。结论:组织块贴壁法是一种简便有效的分离脐带间充质干细胞的方法;应用PKH26体外标记细胞成功率高、技术稳定。 展开更多
关键词 脐带华通胶 间充质干细胞 细胞培养 细胞标记 细胞移植
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左归丸含药血清对间充质干细胞向软骨分化过程中骨粘连蛋白基因表达的影响 被引量:2
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作者 甘可 徐凌霄 +3 位作者 王芳 张缪佳 谈文峰 张前德 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期233-237,共5页
目的研究左归丸含药血清对间充质干细胞向软骨分化过程中骨粘连蛋白基因(SPARC)表达的影响。方法诱导间充质干细胞向软骨分化,诱导同时以左归丸含药血清刺激细胞。分别在在0、7、14、21d通过Real-time PCR检测左归丸含药血清对诱导前后S... 目的研究左归丸含药血清对间充质干细胞向软骨分化过程中骨粘连蛋白基因(SPARC)表达的影响。方法诱导间充质干细胞向软骨分化,诱导同时以左归丸含药血清刺激细胞。分别在在0、7、14、21d通过Real-time PCR检测左归丸含药血清对诱导前后SPARC mRNA表达的影响。构建SPARC启动子报告载体并转染骨髓间质细胞系,双荧光素酶试剂盒检测左归丸含药血清SPARC启动子转录活性的影响。结果与空白对照组和单纯诱导组相比,在诱导第21天时,左归丸能明显促进诱导细胞中SPARC mRNA的表达(P<0.05)。与空白组比,当予以左归丸含药血清刺激后,SPARC基因启动子转录活性能增强近1倍(P<0.05)。结论左归丸含药血清能促进间充质干细胞向软骨分化过程中SPARC基因表达,可能主要是通过增强SPARC基因转录活性。 展开更多
关键词 间充质干细胞 左归丸含药血清 软骨细胞 骨粘连蛋白
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干细胞移植治疗骨质疏松 被引量:4
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作者 王强 赵兵 +1 位作者 李超 陶天遵 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2012年第3期225-229,共5页
目前治疗原发性骨质疏松症的药物主要作用于骨形成和骨吸收耦联失调,而对骨髓间充质干细胞(MSCs)与骨质疏松关联的治疗方法尚未研制成功。骨髓间充质干细胞的衰老是原发性骨质疏松症的发病机制之一。间充质干细胞衰老,导致干细胞增殖能... 目前治疗原发性骨质疏松症的药物主要作用于骨形成和骨吸收耦联失调,而对骨髓间充质干细胞(MSCs)与骨质疏松关联的治疗方法尚未研制成功。骨髓间充质干细胞的衰老是原发性骨质疏松症的发病机制之一。间充质干细胞衰老,导致干细胞增殖能力下降,成骨分化能力减弱,成脂分化增强,骨组织成分减少,骨矿物质基质减少,脂肪组织增加,最终导致骨量减少,骨纤维结构异常,进而出现骨质疏松。移植自体、同种异体的MSCs或者基因修饰MSCs可以有效增加局部骨量,提高骨密度,增强骨力学强度,改善局部骨质疏松情况,可纠正骨代谢失衡,减少骨量丢失,增加成骨,有望为治疗骨质疏松提供一种新的策略和方法。 展开更多
关键词 骨质疏松 骨髓间充质干细胞 干细胞移植
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淫羊藿苷对骨髓间充质干细胞表达GATA-4的影响 被引量:4
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作者 谢玲玲 邹移海 +2 位作者 陈嘉 黄海定 王萧 《河南中医》 2010年第4期357-359,共3页
目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对骨髓间充质干细胞(MSCs)表达锌指转录因子(GATA-4)的影响。方法:把MSCs随机分为6组:正常对照组、4个浓度的ICA组(10-6M、10-7M、10-8M、10-9M)、5-氮胞苷组,每组又分为4个诱导时间组:24 h+1 d、24 h+1 w、48 h+... 目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对骨髓间充质干细胞(MSCs)表达锌指转录因子(GATA-4)的影响。方法:把MSCs随机分为6组:正常对照组、4个浓度的ICA组(10-6M、10-7M、10-8M、10-9M)、5-氮胞苷组,每组又分为4个诱导时间组:24 h+1 d、24 h+1 w、48 h+1 d、48 h+1 w。利用RT-PCR方法检测各组的GATA-4表达量。结果:与其他时间组相比,各组在培养24 h+1 w时,GATA-4表达量最高。结论:ICA与MSCs共培养24 h+1 w时,能更好的促进GATA-4的表达。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 淫羊藿苷 GATA-4 大鼠
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兔骨髓间充质干细胞移植后移植细胞凋亡的实验研究 被引量:1
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作者 段玉印 张桂敏 杨百晖 《中国心血管病研究》 CAS 2011年第1期64-66,共3页
目的利用TUNEL法检测5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)移植后的凋亡情况。方法5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞MSCs向肌源性心肌细胞分化,通过免疫组化,鉴定诱导后的MSCs是否向类心肌细胞转化。建立兔心肌梗死模型,将细... 目的利用TUNEL法检测5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)移植后的凋亡情况。方法5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞MSCs向肌源性心肌细胞分化,通过免疫组化,鉴定诱导后的MSCs是否向类心肌细胞转化。建立兔心肌梗死模型,将细胞移植于心梗区域。移值2周后,利用TUNEL法检测植入细胞的凋亡率。结果移植2周后,可见DAPI标记带蓝色荧光的供体细胞核,分布比较广泛,形态呈椭圆形类似心肌细胞核,并与心肌纤维排列方向一致,证明移植细胞已存活。移值细胞表达troponinT,证明移植的MSCs分化为类心肌细胞。移植细胞均出现不同程度细胞凋亡。结论移植的MSCs细胞可在缺血的心肌组织存活,并分化为类心肌细胞,但移植细胞均出现不同程度凋亡。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 移植 心肌梗死 细胞凋亡
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牙源性间充质干细胞诱导iPS细胞的效率与时间的研究 被引量:5
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作者 颜兴 George T-J Huang 张方明 《北京口腔医学》 CAS 2010年第2期61-64,共4页
目的研究比较不同种牙源性间充质干细胞诱导iPS细胞的效率与时间。方法分离牙髓干细胞(DPSCs)、脱落乳牙干细胞(SHED)、牙乳头干细胞(SCAP)。应用慢病毒介导Lin28、Nanog、Oct4和Sox2因子重编程获得iPS细胞。比较在同等条件下三种细胞获... 目的研究比较不同种牙源性间充质干细胞诱导iPS细胞的效率与时间。方法分离牙髓干细胞(DPSCs)、脱落乳牙干细胞(SHED)、牙乳头干细胞(SCAP)。应用慢病毒介导Lin28、Nanog、Oct4和Sox2因子重编程获得iPS细胞。比较在同等条件下三种细胞获得iPS细胞的克隆数与平均诱导时间。结果DPSC诱导iPS细胞的效率是0.167%,高于SHED细胞和SCAP细胞的诱导效率(0.125%,0.033%);DPSC诱导iPS细胞的平均重编程时间是20.1d,均少于SHED细胞和SCAP细胞(23.73d,25.25d),差异均有统计学意义。结论三种不同牙源性细胞有不同的iPS细胞诱导效率与重编程时间,牙髓干细胞有较好的诱导iPS细胞的应用潜能。 展开更多
关键词 诱导性多潜能干细胞(iPS) 牙源性间充质干细胞
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