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Increased osteogenesis with hydroxyapatite constructs combined with serially-passaged bone marrow-derived mesenchymal stem cells 被引量:1
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作者 Manabu Akahane Tomoyuki Ueha +5 位作者 Takamasa Shimizu Yusuke Inagaki Akira Kido Tomoaki Imamura Kenji Kawate Yasuhito Tanaka 《Stem Cell Discovery》 2012年第4期133-140,共8页
We have previously reported on both the osteogenic potential of hydroxyapatite (HA) combined with bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSCs) and a method involving osteogenic matrix cell sheet transplantation ... We have previously reported on both the osteogenic potential of hydroxyapatite (HA) combined with bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSCs) and a method involving osteogenic matrix cell sheet transplantation of BMSCs. In the present study, we assessed the osteogenic potential of serially-passaged BMSCs, both in vitro and in vivo. We also assessed whether an additional cell-loading technique can regain the osteogenic potential of the constructs combined with serially-passaged BMSCs. The present study revealed that passage (P) 1 cells cultured in osteogenic-induced medium showed strong positive staining for alkaline phosphatase (ALP) and Alizarin Red S, whereas P3 cells showed faint staining for ALP, with no Alizarin Red S staining. Staining of P1, P2 and P3 cells were progressively weaker, indicating that the osteogenic potential of the serially-passaged rat BMSCs is lost after P3 in vitro. The in vivo study showed that little bone formation was observed in the HA constructs seeded with P3 cells, 4 weeks after subcutaneous implantation. However, P3 cell/HA constructs which had increased cell-loading showed abundant bone formation within the pores of the HA construct. ALP and osteocalcin mRNA expression in these constructs was significantly higher than that of constructs with regular cell-seeding. The present study indicates that the osteogenic potential of the constructs with serially-passaged BMSCs is increased by additional cell-loading. This method can be applied to cases requiring hard tissue reconstruction, where BMSCs require serial expansion of cells. 展开更多
关键词 OSTEOGENESIS mesenchymal stem cells SERIAL Passaging HYDROXYAPATITE tissue engineering Bone reconstruction
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生物活性静电纺丝纳米纤维支架在乳房脂肪组织工程中的研究与应用进展
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作者 张丽萍 朱荔 +2 位作者 穆德露 武广敏 王建东 《解放军医学院学报》 CAS 2024年第3期320-325,共6页
乳房重建手术是乳腺癌综合治疗中常用的方法。随着外科技术和材料学的进步,术后仿真乳房重建已成为可实现的目标。为解决当前手术存在的问题,乳腺整形外科医师积极研究组织工程技术。乳房脂肪组织工程是一种新兴技术,基于自体脂肪移植... 乳房重建手术是乳腺癌综合治疗中常用的方法。随着外科技术和材料学的进步,术后仿真乳房重建已成为可实现的目标。为解决当前手术存在的问题,乳腺整形外科医师积极研究组织工程技术。乳房脂肪组织工程是一种新兴技术,基于自体脂肪移植、生物学和组织工程领域的经验,为尚未满足的乳房重建临床需求提供了潜在的解决方案。脂肪组织工程可以制备具有仿生结构的软组织,为乳房重建提供了新的可能性。通过将稳定增殖、低免疫原性的种子细胞植入支架,脂肪组织工程可以构建具有生物活性的支架,实现脂肪组织的再生和修复。其中,采用静电纺丝技术制备的纳米纤维支架具有优异的细胞外基质结构和力学性能,不仅提供了脂肪组织生长的空间,还通过调节细胞表型与启动细胞外基质之间的相互作用,为细胞分化和增殖提供诱导平台。因此,静电纺丝纳米纤维支架被认为是乳房脂肪组织工程有前景的应用材料之一。本文综述了乳房脂肪组织工程中生物活性静电纺丝纳米纤维支架的研究进展,旨在更好地了解乳房重建手术的发展趋势,并为未来的临床应用提供指导和借鉴。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 静电纺丝支架 组织工程 修复和再生 乳房重建
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Scaffold strategies combined withmesenchymal stem cells in vaginalconstruction: a review 被引量:1
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作者 Nicole Andréa Corbellini Henckes Dalana Faleiro +1 位作者 Laura Chao Chuang Elizabeth Obino Cirne-Lima 《Cell Regeneration》 2021年第1期269-279,共11页
Tissue engineering has provided new treatment alternatives for tissue reconstruction. Advances in the tissue engineeringfield have resulted in mechanical support and biological substitutes to restore, maintain or impr... Tissue engineering has provided new treatment alternatives for tissue reconstruction. Advances in the tissue engineeringfield have resulted in mechanical support and biological substitutes to restore, maintain or improve tissue/organs structuresand functions. The application of tissue engineering technology in the vaginal reconstruction treatment can not onlyprovide mechanical requirements, but also offer tissue repairing as an alternative to traditional approaches. In this review, wediscuss recent advances in cell-based therapy in combination with scaffolds strategies that can potentially be adopted forgynaecological transplantation. 展开更多
关键词 mesenchymal stem cells Scaffolds tissue engineering Vaginal reconstruction
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Tissue engineering in mandibular reconstruction: osteogenesis-inducing scaffolds
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作者 Laurel Nelms William Jack Palmer 《Plastic and Aesthetic Research》 2019年第9期1-12,共12页
Currently, the gold standard for aesthetic and functional reconstruction of critical mandibular defects is an autologous fibular flap;however, this carries risk of donor site morbidity, and is not a promising option i... Currently, the gold standard for aesthetic and functional reconstruction of critical mandibular defects is an autologous fibular flap;however, this carries risk of donor site morbidity, and is not a promising option in patients with depleted donor sites due to previous surgeries. Tissue engineering presents a potential solution in the design of a biomimetic scaffold that must be osteoconductive, osteoinductive, and support osseointegration. These osteogenesis-inducing scaffolds are most successful when they mimic and interact with the surrounding native macro- and micro-environment of the mandible. This is accomplished via the regeneration triad: (1) a biomimetic, bioactive osteointegrative scaffold, most likely a resorbable composite of collagen or a synthetic polymer with collagen-like properties combined with beta-tri calcium phosphate that is 3D printed according to defect morphology;(2) growth factor, most frequently bone morphogenic protein 2 (BMP-2);and (3) stem cells, most commonly bone marrow mesenchymal stem cells. Novel techniques for scaffold modification include the use of nano-hydroxyapatite, or combining a vector with a biomaterial to create a gene activated matrix that produces proteins of interest (typically BMP-2) to support osteogenesis. Here, we review the current literature in tissue engineering in order to discuss the success of varying use and combinations of scaffolding materials (i.e., ceramics, biological polymers, and synthetic polymers) with stem cells and growth factors, and will examine their success in vitro and in vivo to induce and guide osteogenesis in mandibular defects. 展开更多
关键词 Osteogenic scaffolds mandibular reconstruction tissue engineering regeneration triad bone morphogenic protein bone marrow mesenchymal stem cells beta-tri calcium phosphate gene activated matrix
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同种异体骨支架复合自体骨髓间充质干细胞修复下颌骨节段缺损动物模型的建立 被引量:3
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作者 刘昌奎 谭新颖 +2 位作者 罗金超 黄海涛 胡敏 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期27-30,共4页
目的:建立同种复合自体骨髓间充质干细胞修复下颌骨节段性的动物模型,为研究同种异体骨支架复合自体骨髓间充质干细胞修复下颌骨节段性缺损效果及其机制打下基础。方法:24只1岁龄比格犬,拔出所有动物右侧下颌前磨牙和磨牙,伤口愈合后制... 目的:建立同种复合自体骨髓间充质干细胞修复下颌骨节段性的动物模型,为研究同种异体骨支架复合自体骨髓间充质干细胞修复下颌骨节段性缺损效果及其机制打下基础。方法:24只1岁龄比格犬,拔出所有动物右侧下颌前磨牙和磨牙,伤口愈合后制造左侧下颌骨3mm节段性缺损(从颏孔后1mm到下颌角前),随机分两组,实验组用同种异体骨支架复合骨髓间充质干细胞修复重建,对照组仅用同种异体骨修复重建。术后4、12、24、48周处死动物(每组3只),取标本并行CT检查。结果:实验组和对照组所有动物同种异体骨均能与自体骨愈合,48周时实验组动物同种异体骨几乎全部被自体骨替代,但是新骨的大小较植入时同种异体骨支架变小。对照组中,新骨主要在同种异体骨与自体骨结合部形成,新骨大小与原植入时同种异体骨大小变化不大。结论:同种异体骨支架复合自体骨髓间充质干细胞能加速成骨,该动物模型的成功建立,为进一步研究同种异体骨支架复合自体骨髓间充质干细胞修复下颌骨节段行缺损的效果及其机制打下基础。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 同种异体骨 下颌骨 修复重建 组织工程
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纳米级细胞型组织工程人工骨的构建:修复下颌骨缺损 被引量:7
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作者 李冬梅 刘新晖 李庆星 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第14期2146-2151,共6页
背景:研究表明将纳米级细胞型组织人工骨用于修复下颌骨缺损能发挥干细胞与纳米级材料的优势,是较佳的生物支架材料,能加速骨及软组织形成。目的:探讨纳米级细胞型组织人工骨构建方法及在下颌骨缺损中的应用效果。方法:取1只新西兰大白... 背景:研究表明将纳米级细胞型组织人工骨用于修复下颌骨缺损能发挥干细胞与纳米级材料的优势,是较佳的生物支架材料,能加速骨及软组织形成。目的:探讨纳米级细胞型组织人工骨构建方法及在下颌骨缺损中的应用效果。方法:取1只新西兰大白兔,利用离心法获得骨髓基质干细胞,定向诱导为成骨细胞。取制备好的纳米相羟基磷灰石胶原复合材料,将3×108 L-1成骨细胞10μL接种到复合材料上共同培养,制备纳米级细胞型组织人工骨。另取20只新西兰大白兔,在下颌体部位制作大小为15 mm×8 mm的单侧洞穿型骨缺损模型,随机数字法分为对照组(n=10)和人工骨组(n=10)。对照组不植入任何材料,人工骨组植入纳米级细胞型组织人工骨,比较2组修复效果。结果与结论:(1)倒置显微镜下可见成骨细胞沿着材料边缘生长,且随着培养时间的延长,细胞数量增加;(2)扫描电镜结果显示:纳米级细胞型组织人工骨材料表面可见大量细胞黏附,细胞呈梭形、多边形,细胞生长良好;(3)人工骨组植入后4周缺损部位缩小;植入后8周下颌骨缺损部位消失,与周围组织无明显界限;对照组植入后4周缺损部位大小变化不明显;8周时缺损部位缩小,与周围组织边界清晰;(4)人工骨组修复后4,8周骨密度、骨小梁厚度及骨小梁数显著高于对照组(P<0.05);(5)人工骨组修复后4周,缺损部位存在较多新生骨,8周时可见大量成熟骨细胞;对照组修复后4,8周可见缺损部位存在少许成骨细胞,骨成熟度低;(6)结果提示,将制备的纳米级细胞型组织人工骨植入新西兰大白兔下颌骨缺损处,可明显促进缺损部位愈合,修复效果理想。 展开更多
关键词 羟基磷灰石类 胶原 间质干细胞 下颌骨 组织工程 羟基磷灰石 胶原复合材料 纳米级细胞型组织人工骨 骨缺损模型 下颌骨缺损 修复效果 离心法 脊髓间质干细胞 种子细胞
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同种异体骨复合骨髓间充质干细胞用于髁突缺损修复的实验性研究 被引量:5
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作者 黄硕 李永锋 +4 位作者 谭新颖 王宏 张安东 胡敏 刘昌奎 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第5期558-562,共5页
目的:运用组织工程的方法,以同种异体冻干骨支架复合骨髓间充质干细胞修复髁突缺损的重建方案,为临床单侧髁突缺损患者的修复提供实验依据。方法:12只12月龄比格犬,自髁突颈部切除所有动物左侧髁突,制造单侧髁突缺损的动物模型,随机分... 目的:运用组织工程的方法,以同种异体冻干骨支架复合骨髓间充质干细胞修复髁突缺损的重建方案,为临床单侧髁突缺损患者的修复提供实验依据。方法:12只12月龄比格犬,自髁突颈部切除所有动物左侧髁突,制造单侧髁突缺损的动物模型,随机分为两组,实验组用同种异体冻干骨支架复合骨髓间充质干细胞修复重建,对照组仅用同种异体冻干骨修复重建。分别于术后4、12、24周观察开口度变化,24周时进行螺旋CT扫描,然后处死动物,取标本行大体观察、Micro-CT扫描和组织学检测。结果:实验组和对照组所有动物同种异体冻干骨均能与自体骨愈合,24周时2组动物张口度基本正常,髁突形态无明显改变,实验组动物同种异体骨几乎全部被自体骨替代,对照组中,新骨主要在同种异体骨与自体骨结合部形成,实验组骨密度及成骨质量较对照组好(P<0.05)。结论:同种异体骨支架复合骨髓间充质干细胞能加速成骨,术后24周髁突形态变化不大,功能恢复良好,为进一步研究同种异体骨支架复合BMMSCs对髁突缺损的临床修复打下基础。 展开更多
关键词 同种异体冻干骨 骨髓间充质干细胞 髁突缺损 组织工程 修复重建
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膝关节腔内培养骨髓间充质干细胞复合脱钙骨的组织工程软骨 被引量:2
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作者 徐斌 王英明 +1 位作者 徐洪港 王瑞 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第24期4371-4379,共9页
背景:如何更好地以组织工程学方法修复关节软骨缺损并达到良好的远期疗效目前尚无公识。目的:创新性地在膝关节腔内培养兔骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨的组织工程软骨。方法:采用全骨髓贴壁筛选法分离培养兔骨髓间充质干细胞,DME... 背景:如何更好地以组织工程学方法修复关节软骨缺损并达到良好的远期疗效目前尚无公识。目的:创新性地在膝关节腔内培养兔骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨的组织工程软骨。方法:采用全骨髓贴壁筛选法分离培养兔骨髓间充质干细胞,DMEM/F12完全培养基培养,成软骨诱导条件培养基诱导分化。取同种异体兔的髂骨和椎体骨制作成脱钙骨支架,诱导后的骨髓间充质干细胞种植于脱钙骨支架上,培养1d后将细胞-支架复合物用筋膜包裹置于兔左膝关节腔内培养,单纯脱钙骨支架筋膜包裹置入右膝关节腔。于培养第4,8,12周分别取材,行大体观察并制成石蜡切片,采用苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色,Ⅱ型胶原免疫组化染色方法进行组织学观察。结果与结论:培养4,8周,细胞-支架组标本Ⅱ型胶原免疫组化的平均吸光度值(A)分别为0.263±0.031,0.340±0.052,单纯支架组标本分别为0.147±0.027,0.165±0.030,两组比较差异有显著性意义(P<0.05);培养12周细胞-支架组标本Ⅱ型胶原免疫组化A值平均为0.362±0.037,标本类似正常软骨外观,Ⅱ型胶原免疫组化反应呈阳性;而单纯支架组脱钙骨支架降解。培养12周细胞-支架组苏木精-伊红染色结果显示细胞数量多,脱钙骨支架基本被吸收;而甲苯胺蓝染色结果显示有被染成紫红色的异染性基质形成。结果提示兔骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨可在兔膝关节腔内培养出组织工程软骨。 展开更多
关键词 组织构建 软骨组织构建 骨髓间充质干细胞 细胞支架蛋白质类 同种异体 脱钙骨 组织工程软 骨细胞 省级基金
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下颌骨缺损组织工程骨修复术的护理 被引量:2
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作者 唐军 刘广鹏 《解放军护理杂志》 2011年第11期39-41,共3页
目的总结自体骨髓基质干细胞组织工程骨修复下颌骨缺损的护理经验。方法对3例下颌骨肿瘤术后骨缺损患者术前做好心理护理,进行充分的手术护理配合,术后重点观察伤口渗血、渗液情况,保持引流管通畅,并做好康复护理与出院指导。结果 3例... 目的总结自体骨髓基质干细胞组织工程骨修复下颌骨缺损的护理经验。方法对3例下颌骨肿瘤术后骨缺损患者术前做好心理护理,进行充分的手术护理配合,术后重点观察伤口渗血、渗液情况,保持引流管通畅,并做好康复护理与出院指导。结果 3例患者均良好地修复了下颌骨缺损,术后随访3~5年肿瘤无复发。结论对运用组织工程骨技术修复下颌骨缺损的患者进行有针对性的护理,可有效促进患者的术后康复。 展开更多
关键词 下颌骨肿瘤 骨缺损 骨髓基质干细胞 组织工程 护理
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MSCs与CD34^+单核细胞共培养联合脱细胞支架植入体内构建兔阴茎海绵体 被引量:1
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作者 李瑞庭 刘志瀚 +3 位作者 冀晨阳 肖小莲 梁伟强 张金明 《岭南现代临床外科》 2017年第2期177-182,共6页
目的研究将异体骨髓间充质干细胞(MSCs)和CD34^+单核细胞(MNCs)共培养体系种植于脱细胞海绵体支架上在兔体内构建阴茎海绵体组织的可行性。方法分别从兔骨髓与兔外周血中提取并鉴定MSCs与CD34^+MNCs,将两种细胞组分以107/mL的密度种植... 目的研究将异体骨髓间充质干细胞(MSCs)和CD34^+单核细胞(MNCs)共培养体系种植于脱细胞海绵体支架上在兔体内构建阴茎海绵体组织的可行性。方法分别从兔骨髓与兔外周血中提取并鉴定MSCs与CD34^+MNCs,将两种细胞组分以107/mL的密度种植于制备好的兔阴茎海绵体脱细胞胶原支架上,同时将相同密度的MSCs、CD34^+MNCs分别种植于支架上,培养4天后植入一种兔阴茎海绵体缺损模型中。3个月后对工程化组织进行取材,行H&E及Masson三色染色等组织学检测。结果 MSCs和CD34^+MNCs共培养组近白膜处的海绵体保留了正常海绵体结构,而MSCs组、CD34+单核细胞组及空白支架组以疤痕增生为主,尽管较之CD34^+单核细胞组及空白支架组,间充质干细胞组疤痕组织中的血管数目较多(P<0.05)。结论我们的研究证明了将MSCs和CD34^+MNCs的共培养体系种植于脱细胞支架上植入兔体内可以构建出一段组织学上与原生海绵体相似的组织;CD34^+MNCs在体内主要通过协同MSCs而非单独发挥其促血管化的生物学效应。 展开更多
关键词 CD34+单核细胞 骨髓间充质干细胞 脱细胞海绵体支架 组织工程 组织工程化阴茎海绵体 阴茎再造
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绿色荧光蛋白标记结合激光共聚焦显微镜三维重建技术观测组织工程骨的构建和体内移植 被引量:5
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作者 侯天勇 边巴罗布 +4 位作者 罗飞 吴雪晖 靳慧勇 姜恒 许建中 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期774-778,共5页
目的结合荧光蛋白标记技术和激光共聚焦显微镜三维重建技术观察体外构建的组织工程骨及其体内移植情况,为筛选优良的支架材料和三维构建方法提供技术支持。方法取2岁龄青山羊(体重约25kg)髂骨骨髓,利用密度梯度离心法结合贴壁培养法分... 目的结合荧光蛋白标记技术和激光共聚焦显微镜三维重建技术观察体外构建的组织工程骨及其体内移植情况,为筛选优良的支架材料和三维构建方法提供技术支持。方法取2岁龄青山羊(体重约25kg)髂骨骨髓,利用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离培养BMSCs,并通过流式细胞技术检测表面分子CD29、CD60L、CD45和CD44表达情况。将质粒pLEGFP-N1扩增、提取后酶切鉴定。用脂质体转染的方法将质粒转染到PT67包装细胞,G418筛选后扩增,获取病毒液。根据测定的滴度转染BMSCs,获得绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)表达的BMSCs,扩增后作为种子细胞,以脱钙骨基质作为支架材料构建组织工程骨,并利用激光共聚焦显微镜观察种子细胞。将构建的组织工程骨移植到山羊股骨缺损处,利用激光共聚焦显微镜观察其存活和分布情况。结果获得的细胞呈成纤维细胞状,CD29和CD44呈阳性表达,CD60L和CD45呈阴性。质粒pLEGFP-N1用HindⅢ、BamHⅠ、SalⅠ和BglⅡ内切酶酶切后,凝胶电泳可见其相对分子质量约6900bp。将pLEGFP-N1转染到PT67包装细胞扩增后获取病毒液。根据测定的滴度(1.3×106cfu/mL)转染BMSCs,获得GFP表达阳性的BMSCs克隆。激光共聚焦显微镜三维立体成像技术观察到BMSCs在组织工程骨支架上分布、增殖和迁移。将构建的组织工程骨移植到山羊股骨缺损处,28d后激光共聚焦显微镜观察到GFP阳性细胞在移植区仍存在。结论荧光蛋白标记技术结合激光共聚焦显微镜三维重建技术可很好地观察支架上和移植体内的细胞,为组织工程产物三维培养的立体观察提供了可行方法 。 展开更多
关键词 组织工程骨 BMSCS 绿色荧光蛋白标记 激光共聚焦显微镜三维重建技术
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