The Effects of Temperature, Light and Moisture on the Seed Germination of Siphonostegia chinensis Benth

To explore the optimum temperature,light intensityand water conditions for seed germination of Siphonostegia chinensis Benth.,seed germination experiment were carried out under different temperatures(5/15,10/20,15/25,20/30℃),different light intensity(14h light/10h darkness,complete darkness)and different concentrations(0%,5%,10%,15%,20%)of PEG-6000 solution.In terms of concentration,5%PEG was regarded as the low level,10%and 15%as the medium level,and 20%as the high level.The results showed that(1)Germination rate,germination potential,and germination index were increased with the rise of temperature.In addition,seed germination was significantly higher under the dark conditions than that with the 14h light/10h darkness.(2)No seed germination occurred when the temperature was below 10/20 C at 14h light/10h darkness.(3)Under 14h light/10h darkness,the germination rate,germination potential and germination index first increased and then decreased with the increase of PEG concentration.The low concentration was more beneficial to the seed germination.(4)Under the condition of complete darkness,the germination rate,germination potential and germination index decline with fluctuation with the increase of PEG concentration.Seed germination of Siphonostegia chinensis Benth.was inhibited in high concentration of PEG.

不同施肥量对仙草产量和土壤微生物多样性的影响

本研究以仙草为对象,探讨了不同施肥量对其产量及根际土壤微生物多样性的影响。通过大田栽培试验,设置多个氮磷钾复合肥施肥量处理,测定仙草产量,采用Pacbio三代测序平台构建采收期仙草根际土壤细菌16S rRNA基因文库,对其进行高通量测序和生物信息学分析。结果表明:仙草产量随施肥量的增加呈先增后降的趋势;土壤微生物多样性随施肥量的增加呈先降后增的趋势;与对照相比,300、450、600 kg/hm^(2)复合肥处理的土壤中在门水平上优势种群及其含量变化较少,在目水平上拟杆菌目和黄单胞菌目的相对丰度均有所增加,在属水平上未分类酸杆菌属显著降低,在种水平上表皮葡萄球菌丰度显著降低;NMDS分析显示,不施肥和施300 kg/hm^(2)复合肥土壤细菌多样性显著不同于其他处理,施450~600 kg/hm^(2)复合肥细菌群落多样性差异不显著。施用300~450 kg/hm^(2)化肥可显著提高仙草产量,显著降低土壤细菌微生物多样性,类杆菌门、厚壁菌门和拟杆菌目的富集受施肥影响较大。综合考量,300 kg/hm^(2)为仙草最佳施肥量。

凉粉草多糖提取和分级及抗氧化性能

文中采用热碱提取法结合超声技术制备了凉粉草多糖(MCP),然后进一步根据相似相溶的原理对凉粉草多糖进行分级,成功获得了分级多糖MCP-1和MCP-2,并通过单因素实验研究了超声时间和提取次数对凉粉草多糖提取率的影响。结果表明,凉粉草多糖的最佳提取条件为在超声功率400W时超声60min,碱提取4次,在此条件下,多糖产率为44.02%±0.06%。紫外和红外光谱测试表明MCP是一种含糖醛酸的粗多糖,凝胶渗透色谱测试其重均分子量(Mw)为4.991×105。而体外抗氧化实验表明,与MCP相比,MCP-1对羟基自由基的清除能力较强,MCP-2对超氧阴离子自由基的清除能力较强,在生物医药领域具有广阔的应用前景。

石见穿多糖对结肠癌SW620细胞上皮间质转化的影响

目的研究石见穿多糖对结肠癌SW620细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,探讨石见穿多糖抑制结肠癌侵袭转移的作用机制。方法采用不同浓度石见穿多糖对SW620细胞进行干预,干预时间分别为12小时和24小时;CCK-8法检测各组细胞的增殖,并选择后续实验的药物浓度和时间;细胞划痕和Transwell迁移实验来检测各组细胞的迁移能力;Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭力;Western blot和qRT-PCR方法检测EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin及其mRNA,以及转录因子ZEB1、ZEB2、Twist1及其mRNA的表达。结果与对照组比较,石见穿多糖能够抑制SW620细胞的增殖,且浓度越高、干预时间越长,抑制作用越强,且呈浓度和时间依赖性。因此,在后续实验中,选择0.25 mg·mL^(-1)、1 mg·mL^(-1)、2 mg·mL^(-1)、3 mg·mL^(-1)作为干预浓度,选择24 h作为干预时间。与对照组比较,石见穿多糖能够抑制SW620细胞的迁移和侵袭,且浓度越高,抑制作用越强,呈浓度依赖性;与对照组比较,石见穿多糖能够上调E-cadherin及其mRNA的表达,且浓度越高,表达水平越高,呈浓度依赖性;同时下调Vimentin、ZEB1、ZEB2、Twist1及其mRNA的表达,且浓度越高,表达水平越低,呈浓度依赖性。结论石见穿多糖能够抑制SW620细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调E-cadherin的表达,下调Vimentin、ZEB1、ZEB2和Twist1的表达,从而抑制EMT过程有关。

响应面法优化凉粉草总黄酮纯化工艺及其成分分析与抗运动性疲劳作用研究

优化AB-8大孔树脂纯化凉粉草总黄酮的工艺,并分析其成分,同时考察其对小鼠运动性疲劳的影响。结果显示:最佳工艺条件为采用70 mL质量浓度1.7 mg/mL、pH 4.2的上样液以1.0 mL/min上样后,使用体积分数73.6%乙醇溶液80 mL以1.5 mL/min流速洗脱,产物中总黄酮含量达到68.1%±0.2%。凉粉草总黄酮类成分包含槲皮苷、山奈酚、异槲皮苷及紫云英苷。动物试验表明,凉粉草总黄酮可延长小鼠的力竭游泳时间和爬杆时间,降低小鼠血清中乳酸与尿素氮含量,增强小鼠肝脏组织中超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶活力,且灌胃相同剂量的总黄酮纯化物比提取物效果极显著,表明最佳纯化工艺有利于提高凉粉草总黄酮的抗运动疲劳活性。

凉粉草种质资源主要光合性状和农艺性状的遗传变异分析及综合评价

[目的]对凉粉草种质资源的主要光合性状和农艺性状进行遗传变异分析及综合评价,为凉粉草种质资源筛选及品种选育提供参考依据。[方法]以来源于不同地区的8份凉粉草种质为试验材料,测定其主要光合性状和农艺性状,采用遗传变异、主成分分析和聚类分析对8份凉粉草种质进行遗传变异分析及综合评价。[结果]8份凉粉草种质光合性状变异系数为6.53%~26.94%,广义遗传力为48.47%~99.14%;农艺性状变异系数为16.26%~36.44%,广义遗传力为69.85%~99.63%。对8份凉粉草种质的20个性状进行主成分分析,提取到3个主成分,累积贡献率达89.145%,基本解释20个性状中的大部分信息。其中第一主成分反映的是相对叶绿素含量(SPAD)、细胞间CO_(2)浓度(C_(i))、蒸腾速率(T_(r))、水分利用率(WUE)和气孔限制值(L_(s)),第二主成分反映的是叶绿素含量、类胡萝卜素含量和净光合速率(P_n),第三主成分反映的是叶宽、叶片面积和茎粗。通过综合得分初步筛选出X2、X3和X4为凉粉草优良种质。聚类分析将8份凉粉草种质划分为三大类群:第Ⅰ类群表现为叶片大,节间长,主茎粗且长,光合能力强,产量高;第Ⅱ类群表现为叶片较大,主茎短,产量低;第Ⅲ类群表现为叶片小,主茎较长,SPAD值高。[结论]8份凉粉草种质主要光合性状和农艺性状遗传变异较大,其中X2、X3和X4种质综合表现较好,可作为杂交优良亲本。在品种选育早期应把SPAD、C_(i)和T_(r)等高遗传力性状纳入到品种筛选的目标性状。

凉粉草降糖颗粒的稳定性研究

目的:按照2020版《中国药典》四部通则《原料药物与制剂稳定性试验指导原则》规定,对研制出的凉粉草降糖颗粒进行影响因素试验、加速试验和长期试验等稳定性试验,为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据[1],同时通过试验建立凉粉草降糖颗粒的有效期。结果:凉粉草颗粒的外观性状、水分、鉴别及含量测定等检查结果与0月相比无明显变化,说明该制剂的性质较稳定,包装材料对制剂性质无影响。结论:根据以上试验的结果,凉粉草颗粒应在密封、防潮、阴凉、干燥等条件下储存,有效期可暂定为12个月[2]。

北刘寄奴标准汤剂指纹图谱及含量测定研究

目的:建立北刘寄奴标准汤剂的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱和多成分定量分析方法。方法:采用HPLC建立北刘寄奴标准汤剂指纹图谱,并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)进行相似度评价。通过聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1为标准筛选影响质量差异的标志物。采用HPLC测定木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、毛蕊花糖苷、木犀草素的含量。结果:北刘寄奴标准汤剂指纹图谱有11个共有峰,各批样品相似度均大于0.90,指认峰1为咖啡酸、峰3为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、峰4为毛蕊花糖苷、峰6为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、峰7为异类叶升麻苷、峰10为木犀草素、峰11为芹菜素。CA结果表明,18批样品分为4类:S16~S18为一类、S4和S12为一类,S9、S11和S14为一类,其余批样品聚为一类。PCA结果表明,3个主成分的累积方差贡献率为89.019%。OPLS-DA表明,峰11、峰9、峰7、峰5、峰4、峰10是影响北刘寄奴标准汤剂质量的关键性成分。18批北刘寄奴标准汤剂中毛蕊花糖苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、木犀草素质量分数分别为0.38%~2.17%、0.13%~0.73%、0.06%~0.21%。结论:建立的指纹图谱和含量测定方法操作简单,具有良好的重复性和重现性,可用于评价北刘寄奴标准汤剂的质量差异,对其质量控制及整体性评价具有一定的意义。

基于UPLC-Q-TOF-MS的凉粉草不同栽培品系代谢物分析

目的基于代谢组学方法探究凉粉草不同栽培品系(台湾草、平远草和增城草)的差异代谢物,筛选品系鉴别的主要代谢物。方法运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)非靶向代谢组学技术分析不同品系凉粉草的化学成分,数据经主成分分析、正交偏最小二乘判别分析和方差分析处理,筛选不同品系鉴别的代谢物。结果共筛选得到186种差异代谢物,台湾草、平远草与增城草之间的差异代谢物主要显著富集于黄酮类生物合成通路。3个品系均有芸香苷、山奈酚3-O-葡萄糖苷、槲皮素等黄酮类代谢物;结合差异倍数和文献报道,槲皮素、山奈酚3-O-葡萄糖苷可作为3个凉粉草品系区分的差异代谢物。结论UPLC-Q-TOF-MS代谢组学技术可阐明不同品系凉粉草化学成分差异,为其品系鉴别和资源开发提供参考。

凉粉草多糖对鱼肌球蛋白理化性质和结构特征的影响

探究不同质量浓度凉粉草多糖(Mesona chinensis Benth polysaccharide,MCP)(0~0.10 mg/mL)对肌球蛋白理化特性(电位、粒径、表面疏水性、巯基)、结构特性(紫外光谱、荧光光谱、红外光谱、圆二色谱、电泳)和微观结构的影响,并阐明肌球蛋白-MCP相互作用机制。结果表明:随着MCP的增加,改变了肌球蛋白-MCP混合体系中的相互作用力,两者主要通过静电相互作用力、疏水相互作用等形成肌球蛋白-MCP复合物和肌球蛋白-肌球蛋白聚集体,从而使肌球蛋白-MCP混合体系的浊度增加,Zeta电位、表面疏水性整体呈下降趋势,内部颗粒的分布变宽、平均粒径(D50)整体呈减小趋势。同时,紫外光谱、荧光光谱、红外光谱、圆二色谱实验证明肌球蛋白结构因MCP质量浓度增加而改变。

凉粉草不同种质的染色体倍性与基因组大小研究

目的:建立凉粉草基于流式细胞术的染色体倍性鉴定技术与基因组大小检测方法。方法:以收集的36份凉粉草栽培种质及1份野生种质为材料,采用流式细胞术估测凉粉草基因组大小,并以二倍体为对照,计算凉粉草染色体倍性。结果:内参与待测样品峰值能完全分开,无重叠峰,峰形清晰集中,可对凉粉草基因组大小进行有效估测。鉴定凉粉草供试材料中12份为二倍体,基因组大小为1.14~1.35 Gb;20份为三倍体,基因组大小为1.74~2.01 Gb;5份为四倍体,基因组大小为2.42~2.47 Gb。结论:成功建立了凉粉草基于流式细胞术的染色体倍性鉴定技术与基因组大小检测方法,凉粉草不同种质倍性水平丰富,不同凉粉草种质的倍性水平与其性状具有显著相关性。

凉粉草多糖的理化性质及其体外抗氧化活性

该文对不同处理方式得到的两种凉粉草多糖(Mesona chinensis polysaccharides,MCP)的理化性质和体外抗氧化活性进行研究,采用同步热分析仪、紫外光谱、红外光谱、X射线衍射、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)等方法表征多糖结构,从DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率以及还原力方面考察多糖抗氧化活性。结果表明,在动态旋转水合半径上MCP-A溶液比MCP-B溶液黏度大;热分析结果表明,MCP-A比MCP-B具有更强的耐热性;红外光谱结果表明,两种多糖都具有多糖的特征吸收峰,MCP-A为α-糖苷键和β-糖苷键的吡喃型糖苷环骨架,MCP-B为β-糖苷键的吡喃型糖苷环骨架;X射线衍射图谱表明两种多糖主要形态以非晶体存在;SEM结果表明MCP-B比MCP-A具有更大比表面积。体外抗氧化结果显示,MCP-A清除DPPH自由基、ABTS+自由基的能力比MCP-B强,二者均有较强的还原力。研究表明,两种处理方法得多糖的理化性质和抗氧化存在明显差异,MCP-A具有更高的热稳定性和抗氧化能力,可作为可潜在的抗氧化食品成分用于食品加工。

凉粉草不同部位多糖和黄酮含量测定及水培研究

为了提高凉粉草不同部位的利用率、进一步开发其药食两用价值,采用蒽酮-硫酸法对新鲜采摘的、储存1、4个月的凉粉草叶、茎、花、根的多糖含量进行测定和分析;采用乙醇回流法对新鲜采摘的、储存时间1、4个月的凉粉草叶、茎、花、根的黄酮含量进行测定和分析;此外,还探究了PBU(N-苯基-N-噻唑基脲)、6-BA(6-苄氨基嘌呤)、KT(N6-呋喃甲基腺嘌呤)、NAA(α-萘乙酸)、IBA(吲哚丁酸)5种外源生长调节物对水培凉粉草生根的影响,以及不同浓度梯度的N6·MS培养液对水培凉粉草生长的影响。结果显示:凉粉草各部位多糖含量从高到低依次为叶、茎、根、花,各部位黄酮含量从高到低依次为花、叶、茎、根;新鲜采摘的凉粉草各部位的多糖和黄酮含量均高于储存1、4个月凉粉草,二者含量均随储存时间延长总体呈下降趋势,仅储存1个月的茎多糖含量不降反升;PBU、6-BA对水培凉粉草生根促进效果相对较差,KT、NAA、IBA对水培凉粉草生根促进效果相对较好,但KT促生根较细密,NAA促生根较粗壮、稀疏,IBA中等;各外源调节物促水培凉粉草生根效果最佳浓度均为0.5 mg/L,随浓度增加促生根效果依次递减;凉粉草在不同浓度N6·MS营养液中出现短暂的重量负增长后,均表现出不同程度的增重,增重率从大到小依次为:1/8浓度>1/6浓度>1/4浓度>1/10浓度>1/2浓度,但1/2浓度和1/4浓度的N6·MS培养液出现不同程度“烧苗”现象。

基于主要农艺性状的25份凉粉草种质资源遗传多样性分析与综合评价

为明确凉粉草农艺性状的遗传变异,筛选出优异种质,本研究以采自不同地区的25份凉粉草种质为试验材料,调查其12个农艺性状,采用遗传变异分析、相关分析、主成分分析和聚类分析法等进行遗传多样性分析和综合评价。结果表明,各农艺性状在不同种质间差异显著,变异系数范围为7.33%~50.90%,其中分枝长的变异系数最大,单株产量的次之;各种质具有丰富的遗传多样性,Shannon-Wiener多样性指数(H′)变化范围为1.219~2.111,以叶长和分枝长的H′较高。单株产量与分枝数、分枝长、叶长、叶重率均呈极显著正相关(P<0.01),这几个性状可作为凉粉草种质评价的主要指标。主成分分析所提取4个主成分的累积贡献率达75.081%,能反映凉粉草农艺性状的大部分信息。种质V18、V16和V22的综合评价得分较高,是适合凉粉草亲本选配的优异种质。聚类分析将25份凉粉草种质分为3大类群,以第Ⅲ类种质(V24、V25)的综合表现最好,第Ⅱ类种质(V1、V2和V3)最差,第Ι类种质(V4—V23)居中。本研究结果可为今后凉粉草种质资源的开发和新品种选育提供参考。

中国凉粉草属植物研究进展

凉粉草作为重要的药用和食用植物资源,含有丰富的营养成分、具有特殊的医疗功效,是天然、安全、保健、营养食品较理想的原料,其加工利用价值非常广泛,近年来发展规模不断扩大,对凉粉草的研究已成为热点。文章在介绍凉粉草的资源分布、生理特性和加工应用的基础上,从凉粉草的性状、显微特征、栽培管理技术、化学成分、药理作用、组织培养与分子生物学等方面进行了总结和探讨,并对凉粉草的研究与应用进行了展望,为该属植物进一步深入研究和开发利用提供了参考。

凉粉草中抗缺氧化学成分

目的研究凉粉草(Mesona chinensisBenth)中的抗缺氧化学成分。方法用硅胶柱色谱、Sephadex LH 20柱色谱、ODS柱色谱及制备HPLC色谱分离纯化化合物;通过化合物的理化常数、1H NMR和13C NMR波谱数据,鉴定化合物结构;通过大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株(PC12)实验,对各单体化合物进行活性评价。结果从凉粉草体积分数为65%的乙醇提取物的氯仿层和乙酸乙酯层分离得到8个化合物:咖啡酸(1)、3(4乙氧基3羟基苯基)烯丙酸(2)、咖啡酸乙酯(3)、山奈酚(4)、高山黄芩素(5)、2十六烷基-十八烷酸(6)、熊果酸(7)和豆甾醇(8);应用PC12细胞缺氧模型在DMSO溶液中测得化合物1、4、5、6、7、8在不同质量浓度下具有不同的抗缺氧活性。结论首次从凉粉草属中分离得到化合物2、3、5、6;化合物1、4、5、6、7、8有一定的抗缺氧活性,化合物4、5、7、8有较好的抗缺氧活性。

仙草保肝活性成分的分离纯化与结构探析

以大鼠肝匀浆丙二醛(MDA)作为保肝活性的追踪指标,并采用S-8型大孔树脂、固相萃取小柱对仙草热水提物进行分离纯化。得到MDA抑制率为88.63%的F33组分,其紫外光谱(UV)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)及化学反应特征表明可能为黄酮类化合物。F33经高效液相色谱(HPLC)进一步分离及LC/MS质谱分析,分离出两个组分,推测其结构分别为槲皮素葡萄糖甙及槲皮素鼠李糖甙。

HPLC法测定凉粉草中齐墩果酸和熊果酸含量

目的建立以高效液相色谱法同时测定凉粉草药材中齐墩果酸和熊果酸含量的方法。方法色谱柱为Kromasil 100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸水溶液(95∶5),流速为1.0 mL.min-1,柱温:室温,检测波长为210 nm。结果齐墩果酸和熊果酸的进样量分别在0.101 0～0.909 0μg(r=0.999 3)、0.083 0～0.747 4μg(r=0.999 7)范围内与各自峰面积呈良好的线性关系;二者平均加样回收率分别为100.26%、100.23%,RSD分别为1.5%、1.4%。结论本方法简便、准确、可靠,可用于凉粉草的质量控制。

北刘寄奴中黄酮类化学成分的研究

目的 对北刘寄奴 Siphonostegia chinensis的黄酮类活性成分进行研究。方法 采用 95 %乙醇提取及各种柱色谱法分离 ,光谱技术鉴定结构。结果 分离得到 6个黄酮类化合物 ,分别鉴定为 :5 ,3′-二羟基 - 6 ,7,4′-三甲氧基黄酮 ( )、5 ,7-二羟基 - 3′,4′-二甲氧基黄酮 ( )、芹菜素 ( )、木犀草素 ( )、芹菜苷 ( )、木犀草苷 ( )。结论 化合物 , , 和

仙草生产、研究现状与发展趋势

通过实地调研和文献查阅,概述近几年仙草栽培面积、产量、产地收购价格变化及加工工艺现状;综述关于仙草种质资源、化学成分、品种选育、栽培技术等方面的研究进展;展望其未来发展趋势,为仙草规范生产及后期研究开展提供理论参考。