不同施肥量对仙草产量和土壤微生物多样性的影响

本研究以仙草为对象,探讨了不同施肥量对其产量及根际土壤微生物多样性的影响。通过大田栽培试验,设置多个氮磷钾复合肥施肥量处理,测定仙草产量,采用Pacbio三代测序平台构建采收期仙草根际土壤细菌16S rRNA基因文库,对其进行高通量测序和生物信息学分析。结果表明:仙草产量随施肥量的增加呈先增后降的趋势;土壤微生物多样性随施肥量的增加呈先降后增的趋势;与对照相比,300、450、600 kg/hm^(2)复合肥处理的土壤中在门水平上优势种群及其含量变化较少,在目水平上拟杆菌目和黄单胞菌目的相对丰度均有所增加,在属水平上未分类酸杆菌属显著降低,在种水平上表皮葡萄球菌丰度显著降低;NMDS分析显示,不施肥和施300 kg/hm^(2)复合肥土壤细菌多样性显著不同于其他处理,施450~600 kg/hm^(2)复合肥细菌群落多样性差异不显著。施用300~450 kg/hm^(2)化肥可显著提高仙草产量,显著降低土壤细菌微生物多样性,类杆菌门、厚壁菌门和拟杆菌目的富集受施肥影响较大。综合考量,300 kg/hm^(2)为仙草最佳施肥量。

凉粉草降糖颗粒的稳定性研究

目的:按照2020版《中国药典》四部通则《原料药物与制剂稳定性试验指导原则》规定,对研制出的凉粉草降糖颗粒进行影响因素试验、加速试验和长期试验等稳定性试验,为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据[1],同时通过试验建立凉粉草降糖颗粒的有效期。结果:凉粉草颗粒的外观性状、水分、鉴别及含量测定等检查结果与0月相比无明显变化,说明该制剂的性质较稳定,包装材料对制剂性质无影响。结论:根据以上试验的结果,凉粉草颗粒应在密封、防潮、阴凉、干燥等条件下储存,有效期可暂定为12个月[2]。

基于UPLC-Q-TOF-MS的凉粉草不同栽培品系代谢物分析

目的基于代谢组学方法探究凉粉草不同栽培品系(台湾草、平远草和增城草)的差异代谢物,筛选品系鉴别的主要代谢物。方法运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)非靶向代谢组学技术分析不同品系凉粉草的化学成分,数据经主成分分析、正交偏最小二乘判别分析和方差分析处理,筛选不同品系鉴别的代谢物。结果共筛选得到186种差异代谢物,台湾草、平远草与增城草之间的差异代谢物主要显著富集于黄酮类生物合成通路。3个品系均有芸香苷、山奈酚3-O-葡萄糖苷、槲皮素等黄酮类代谢物;结合差异倍数和文献报道,槲皮素、山奈酚3-O-葡萄糖苷可作为3个凉粉草品系区分的差异代谢物。结论UPLC-Q-TOF-MS代谢组学技术可阐明不同品系凉粉草化学成分差异,为其品系鉴别和资源开发提供参考。

凉粉草多糖对鱼肌球蛋白理化性质和结构特征的影响

探究不同质量浓度凉粉草多糖(Mesona chinensis Benth polysaccharide,MCP)(0~0.10 mg/mL)对肌球蛋白理化特性(电位、粒径、表面疏水性、巯基)、结构特性(紫外光谱、荧光光谱、红外光谱、圆二色谱、电泳)和微观结构的影响,并阐明肌球蛋白-MCP相互作用机制。结果表明:随着MCP的增加,改变了肌球蛋白-MCP混合体系中的相互作用力,两者主要通过静电相互作用力、疏水相互作用等形成肌球蛋白-MCP复合物和肌球蛋白-肌球蛋白聚集体,从而使肌球蛋白-MCP混合体系的浊度增加,Zeta电位、表面疏水性整体呈下降趋势,内部颗粒的分布变宽、平均粒径(D50)整体呈减小趋势。同时,紫外光谱、荧光光谱、红外光谱、圆二色谱实验证明肌球蛋白结构因MCP质量浓度增加而改变。

凉粉草不同种质的染色体倍性与基因组大小研究

目的:建立凉粉草基于流式细胞术的染色体倍性鉴定技术与基因组大小检测方法。方法:以收集的36份凉粉草栽培种质及1份野生种质为材料,采用流式细胞术估测凉粉草基因组大小,并以二倍体为对照,计算凉粉草染色体倍性。结果:内参与待测样品峰值能完全分开,无重叠峰,峰形清晰集中,可对凉粉草基因组大小进行有效估测。鉴定凉粉草供试材料中12份为二倍体,基因组大小为1.14~1.35 Gb;20份为三倍体,基因组大小为1.74~2.01 Gb;5份为四倍体,基因组大小为2.42~2.47 Gb。结论:成功建立了凉粉草基于流式细胞术的染色体倍性鉴定技术与基因组大小检测方法,凉粉草不同种质倍性水平丰富,不同凉粉草种质的倍性水平与其性状具有显著相关性。

凉粉草多糖的理化性质及其体外抗氧化活性

该文对不同处理方式得到的两种凉粉草多糖(Mesona chinensis polysaccharides,MCP)的理化性质和体外抗氧化活性进行研究,采用同步热分析仪、紫外光谱、红外光谱、X射线衍射、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)等方法表征多糖结构,从DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率以及还原力方面考察多糖抗氧化活性。结果表明,在动态旋转水合半径上MCP-A溶液比MCP-B溶液黏度大;热分析结果表明,MCP-A比MCP-B具有更强的耐热性;红外光谱结果表明,两种多糖都具有多糖的特征吸收峰,MCP-A为α-糖苷键和β-糖苷键的吡喃型糖苷环骨架,MCP-B为β-糖苷键的吡喃型糖苷环骨架;X射线衍射图谱表明两种多糖主要形态以非晶体存在;SEM结果表明MCP-B比MCP-A具有更大比表面积。体外抗氧化结果显示,MCP-A清除DPPH自由基、ABTS+自由基的能力比MCP-B强,二者均有较强的还原力。研究表明,两种处理方法得多糖的理化性质和抗氧化存在明显差异,MCP-A具有更高的热稳定性和抗氧化能力,可作为可潜在的抗氧化食品成分用于食品加工。

中国凉粉草属植物研究进展

凉粉草作为重要的药用和食用植物资源,含有丰富的营养成分、具有特殊的医疗功效,是天然、安全、保健、营养食品较理想的原料,其加工利用价值非常广泛,近年来发展规模不断扩大,对凉粉草的研究已成为热点。文章在介绍凉粉草的资源分布、生理特性和加工应用的基础上,从凉粉草的性状、显微特征、栽培管理技术、化学成分、药理作用、组织培养与分子生物学等方面进行了总结和探讨,并对凉粉草的研究与应用进行了展望,为该属植物进一步深入研究和开发利用提供了参考。

凉粉草组织培养快繁技术及优化研究(英文)

以凉粉草带茎节的茎段为外植体,采用L9(34)正交设计,对影响凉粉草组培快繁过程的3个因素(6-BA、ZT、NAA)的3个浓度水平进行优化试验,试验结果采用SPSS13.0软件统计分析,并针对凉粉草在组培快繁过程中极易发生玻璃化等问题进行研究。结果表明:凉粉草的最适初代诱导培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L,无玻璃化;最适继代增殖培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+ZT0.5 mg/L+NAA 0.02 mg/L+PVA 1000 mg/L,无玻璃化,增殖系数达9.1,芽壮;最适生根培养基为1/2MS+NAA0.1 mg/L+KT0.01 mg/L。1000 mg/L PVA为有效防治凉粉草组培快繁过程中玻璃苗发生的最佳浓度。采用这一技术,理论上1株试管苗一年可以生产凉粉草种苗约为9万株。

凉粉草中抗缺氧化学成分

目的研究凉粉草(Mesona chinensisBenth)中的抗缺氧化学成分。方法用硅胶柱色谱、Sephadex LH 20柱色谱、ODS柱色谱及制备HPLC色谱分离纯化化合物;通过化合物的理化常数、1H NMR和13C NMR波谱数据,鉴定化合物结构;通过大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株(PC12)实验,对各单体化合物进行活性评价。结果从凉粉草体积分数为65%的乙醇提取物的氯仿层和乙酸乙酯层分离得到8个化合物:咖啡酸(1)、3(4乙氧基3羟基苯基)烯丙酸(2)、咖啡酸乙酯(3)、山奈酚(4)、高山黄芩素(5)、2十六烷基-十八烷酸(6)、熊果酸(7)和豆甾醇(8);应用PC12细胞缺氧模型在DMSO溶液中测得化合物1、4、5、6、7、8在不同质量浓度下具有不同的抗缺氧活性。结论首次从凉粉草属中分离得到化合物2、3、5、6;化合物1、4、5、6、7、8有一定的抗缺氧活性,化合物4、5、7、8有较好的抗缺氧活性。

仙草保肝活性成分的分离纯化与结构探析

以大鼠肝匀浆丙二醛(MDA)作为保肝活性的追踪指标,并采用S-8型大孔树脂、固相萃取小柱对仙草热水提物进行分离纯化。得到MDA抑制率为88.63%的F33组分,其紫外光谱(UV)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)及化学反应特征表明可能为黄酮类化合物。F33经高效液相色谱(HPLC)进一步分离及LC/MS质谱分析,分离出两个组分,推测其结构分别为槲皮素葡萄糖甙及槲皮素鼠李糖甙。

HPLC法测定凉粉草中齐墩果酸和熊果酸含量

目的建立以高效液相色谱法同时测定凉粉草药材中齐墩果酸和熊果酸含量的方法。方法色谱柱为Kromasil 100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸水溶液(95∶5),流速为1.0 mL.min-1,柱温:室温,检测波长为210 nm。结果齐墩果酸和熊果酸的进样量分别在0.101 0～0.909 0μg(r=0.999 3)、0.083 0～0.747 4μg(r=0.999 7)范围内与各自峰面积呈良好的线性关系;二者平均加样回收率分别为100.26%、100.23%,RSD分别为1.5%、1.4%。结论本方法简便、准确、可靠,可用于凉粉草的质量控制。

仙草最佳采收期研究

分别采用苯酚硫酸法和硝酸铝显色法测定仙草多糖和总黄酮,结合仙草产量测定,综合得到了仙草多糖总量和总黄酮总量的动态变化,确定8月下旬为仙草的最佳采收期,此时仙草的单株产量为240g·株-1,折合产量9 000kg·hm-2,多糖含量1.96%,总黄酮含量13.83%。

仙草生产、研究现状与发展趋势

通过实地调研和文献查阅,概述近几年仙草栽培面积、产量、产地收购价格变化及加工工艺现状;综述关于仙草种质资源、化学成分、品种选育、栽培技术等方面的研究进展;展望其未来发展趋势,为仙草规范生产及后期研究开展提供理论参考。

仙草色素的提取研究

采用常用的正交试验法[L1(645)]和单因素试验法相结合的方法优选了提取仙草色素的方法,并对该提取工艺的条件进行了初步探索。试验结果表明,各因素对仙草色素提取效果的影响程度依次为:浸提酸度>原料粒度>浸提温度>浸提剂;最佳提取工艺条件是:浸提酸度pH=14,原料粒度为40目,浸提温度为室温(25℃),浸提剂为水,浸提时间为90min;此时色素的提取率可达12.44%。另外,微波或超声波对仙草色素的提取有明显促进作用。

柱前衍生超高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定仙草多糖组成及其含量

建立了测定仙草多糖组成及其含量的超高效液相色谱-串联四极杆质谱分析方法。仙草样品在碱性条件下用沸水提取,提取液经固相萃取小柱净化后加三氟乙酸在110℃水解,然后采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生。以Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm i.d.×50 mm,1.7μm)为分析柱,乙腈和缓冲盐溶液(0.5 mmol/L乙酸铵-0.05%乙酸)为流动相进行梯度洗脱分离,流速0.5 mL/min,电喷雾正离子多反应监测模式检测,内标法定量。结果显示8种单糖在1～100μmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r2均大于0.96,方法的回收率为84%～112%,相对标准偏差(RSD)不高于4.7%。仙草多糖由甘露糖、鼠李糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖8种单糖组成,其摩尔百分比为7.4%、5.7%、4.2%、0.9%、28.4%、26.5%、16.4%和10.6%。该法简单、快速、灵敏高、重现性好,可用于仙草多糖的单糖组成分析和含量测定。

凉粉草基因组DNA提取与分析

[目的]为分子生物学研究提供高质量、高产量的凉粉草总DNA。[方法]采用改良CTAB法提取总DNA,通过测定OD260/OD280值、琼脂糖凝胶电泳和RAPD扩增对所得DNA的浓度和质量进行检测,考察该方法对DNA的提取效果。[结果]改良CTAB法提取的总DNAOD260/OD280值为1.6～2.0;电泳条带清晰,完整性好,纯度高,总DNA分子量与λDNA相近;以所提DNA为模板进行RAPD扩增时,可得到稳定的扩增条带。[结论]改良CTAB法适合凉粉草基因组DNA的提取。

仙草的化学成分和药理作用研究进展

仙草具有多种功效活性成分而且价格低廉,为了更好地开发和利用中国丰富的仙草资源,本文对近年来国内外仙草的化学成分、药理作用的研究概况进行综述,并提出了今后的研究方向,旨在为仙草功效成分的开发利用提供参考。

仙草开发与利用的研究进展

仙草作为重要的药食两用植物资源,是生产天然、营养、保健食品的理想原料,有着广泛的加工利用价值。本文综述了仙草的开发与利用现状,为进一步开发利用我国丰富的仙草资源与仙草功能保健食品的研发提供参考。

3个仙草品系核糖体DNA-ITS序列分析

目的为仙草资源的分子标记和仙草品种选育提供参考。方法采用克隆测序法,测定仙草3个品系的核糖体DNA-ITS序列。结果 3个仙草品系的ITS序列存在2个碱基差异,分别在ITS1区段的第355位和在ITS2区段的第578位。结论 3个仙草品系间既有差异又有较近的亲缘关系,序列结果已登录到NC-BI。

电感耦合等离子体原子发射光谱法测定凉粉草不同部位中22种无机元素的含量

为测定凉粉草根、枝和叶中无机元素的含量,采用HNO3-H2O2消解体系,通过微波消解彻底有效地消解样品中的有机物,应用电感耦合等离子体原子发射光谱法测定Al、As、Ag、Ba、Bi、Ca等22种无机元素含量.结果表明,在优化条件下,待测各元素间相互干扰较小,22种元素在一定范围具有良好的线性关系,相关系数（r）均不小于0.999 6,检出限范围为0.000 1～0.019 0 μg/mL,平均回收率为98.9％～103.4％,相对标准偏差为0.7％～5.2％（n=6）.实验方法快速、简便、准确、灵敏度高,能够准确测定凉粉草不同部位中22种无机元素含量.