miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路抑制乳腺癌细胞MCF-7侵袭

目的:探究miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路调控上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法:收集承德医学院附属医院2018年1月至10月收治的22例乳腺癌患者癌组织和配对癌旁组织标本,乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453)和正常乳腺上皮细胞MCF10A来自承德医学院基础研究所,然后采用q PCR检测组织和细胞系中miR-130a-3p的表达情况;将实验分为对照组、miR-130a-3p mimics组、miR-130a-3p inhibitor组、PHA665752(MET小分子抑制剂)转染组及共转PHA665752+miR-130a-3p inhibitor组,然后采用CCK-8法和Transwell实验分别检测MCF-7细胞增殖活力、侵袭和迁移能力;WB实验检测MCF-7细胞EMT和HGF/MET信号通路相关蛋白的表达情况;此外,采用双荧光素酶报告基因检测miR-130a-3p与MET之间的靶向关系。结果:miR-130a-3p在乳腺癌组织和细胞系中呈低表达;过表达miR-130a-3p可抑制MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移和EMT;而抑制miR-130a-3p出现相反的结果。双荧光素酶报告基因结果证实miR-130a-3p靶向下调MET的表达水平,且miR-130a-3p负调控HGF/MET信号通路的表达;进一步实验证明,miR-130a-3p通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移和EMT。结论:miR-130a-3p通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7细胞EMT过程,进而抑制MCF-7细胞侵袭转移。

候选转移抑制基因通过调控肝细胞生长因子／c—Met信号通路影响膀胱癌BIU87细胞生物学功能的研究

目的观察候选转移抑制基因（MTSS1）通过调控肝细胞生长因子（HGF）／c—Met信号通路对膀胱癌BIU87细胞生物学功能的影响。方法培养膀胱癌BIU87细胞，将传代的细胞分为以下3组：A组：PEFMTSSl和PSV2neo共转染组；B组：阴性对照小干扰RNA（shNC）和PSV2neo共转染组；C组：未转染组，A组为实验组，B、C两组为阳性对照组和阴性对照组。通过Westernblot和实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测MTSS1蛋白和mRNA在3组细胞中的表达水平，并检测3组BIU87细胞中c—Met、E一钙黏蛋白（E-cadherin）和N一钙黏蛋白（N—eadherin）蛋白和mRNA水平表达变化，并通过流式细胞法和划痕实验观察比较转染PEFMTSSl的BIU87细胞的的迁移能力和增殖凋亡情况。结果（1）Westernblot和Real-timePCR检测结果显示：与B、C组比较，PEFMTSS1组MTSS1蛋白及mRNA表达均显著下调（P〈0．01），c—Met蛋白及其mRNA的表达显著下调（P〈0．01）。（2）Westernblot和Real—timePCR检测结果显示：与B、C组比较，A组上皮标志物E—eadherin蛋白和及mRNA表达显著上调（P〈0．01），c-Met蛋白及其mRNA，间质细胞标志物N—cadherin蛋白及mRNA的表达显著下调（P〈0．01），B、C两组间E—eadherin和N—eadherin蛋白及mRNA表达的差异无统计学意义（P〉0．01）。（3）划痕实验检测细胞迁移：结果表明，A组划痕间距较宽，愈合被抑制，BIU87细胞迁移能力低于B、C组细胞（P〈0．01），B、C两组细胞的划痕间距差异无统计学意义（P〉0．叭）。（4）流式细胞仪分析细胞凋亡：A、B和C组细胞的凋亡率分别为（26．73±3．72）％、（4．28-t-O．68）％和（2．73±0．41）％，A组细胞的凋亡率较C组明显增加（P〈0．01），B、C两组细胞凋亡的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MTSSl基因转染对体外膀胱癌细胞株BIU87细胞具有促进增殖和抑制凋亡作用，其可能是通过调控HGF／c—Met信号转导通路来发挥作用。

黄芩苷通过调控MET/EGFR通路对肝癌细胞增殖的影响

目的考察黄芩苷通过调控MET/EGFR通路对肝癌细胞增殖的影响。方法HepG-2细胞以0、25、5、75、10、125μg/mL黄芩苷分别处理12、24、48 h,CCK-8法筛选黄芩苷最适质量浓度、作用时间。将HepG-2细胞分为对照组、黄芩苷组(125μg/mL)、克唑替尼组(1μmol/L)、黄芩苷+克唑替尼组(125μg/mL+1μmol/L)、吉非替尼组(1μmol/L)、黄芩苷+吉非替尼组(125μg/mL+1μmol/L)、克唑替尼+吉非替尼组(1μmol/L+1μmol/L)、黄芩苷+克唑替尼+吉非替尼组(125μg/mL+1μmol/L+1μmol/L),给药处理48 h后,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blot法检测细胞MET/EGFR通路蛋白表达。结果与对照组比较,各给药组细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期细胞比例升高(P<005),p-MET、p-EGFR蛋白表达降低(P<005);与吉非替尼组比较,黄芩苷+吉非替尼组细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期细胞比例升高(P<005),p-MET、p-EGFR蛋白表达降低(P<005);与克唑替尼组比较,黄芩苷+克唑替尼组细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期细胞比例升高(P<005),p-MET、p-EGFR蛋白表达降低(P<005);与克唑替尼+吉非替尼组比较,黄芩苷+克唑替尼+吉非替尼组细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期细胞比例升高(P<005),p-MET、p-EGFR蛋白表达降低(P<005)。结论黄芩苷可能通过抑制MET/EGFR信号通路蛋白进而抑制增殖、凋亡,并影响细胞周期。

HGF/c-Met信号传导通路与晚期非小细胞肺癌关系的研究进展

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)/c—Met信号传导通路在晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发生、发展中起重要调控作用,并与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂的继发性耐药密切相关。针对该通路的分子靶向治疗为晚期NSCLC提供了新的思路,现已成为近年研究的热点:本文就HGF/c—Met的结构、功能及其在晚期NSCLC中的治疗进展等作一综述。

HGF/Met/JNK信号通路介导的细胞自噬在肝硬化癌变进程中的作用

背景肝癌干细胞样细胞(hepatocarcinoma stem cell-like cells,CSCs)具有较强的自我更新和肿瘤发生能力,在肝硬化进展至肝癌的进程发挥关键作用.我们将肝脏Axin2+CD90+细胞鉴定为肝硬化的CSCs,并观察了HGF/Met/JN信号通路介导的细胞自噬在肝硬化进展至肝癌期间的作用.目的明确肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)/Met/JNK信号通路介导的细胞自噬在肝硬化癌变进程中的作用.方法从肝血管瘤患者中共收集8例非肝硬化手术标本;2007-09,在本院收集了18例酒精相关,30例慢性乙型肝炎相关肝硬化活检样本.这些患者随访至2015-12.来自患者的3例外科肝癌样本与酒精相关的肝硬化,通过手术收集来自乙型肝炎相关肝硬化患者的8个肝癌样本.8 wk龄雄性SD大鼠每周两次腹膜内注射50 mg/kg二乙基亚硝胺持续8 wk建立肝硬化模型.Western-blotting检测人和大鼠进行的组织自噬状态、HGF的水平及HGF/Met/JNK信号途径分子的变化.采用c-Met抑制剂EMD1214063治疗肝硬化大鼠并评估细胞增殖和凋亡,同时评估HGF/Met/JNK信号途径分子的变化.结果相较于正常肝组织对照,肝硬化患者的自噬水平显著升高(全部P<0.05),而自噬水平的下降与肝硬化进展为肝癌有关;同时,这些肝硬化异常自噬样本中HGF的产生显著增加.肝硬化肝脏根据自噬状态和HGF表达首先分层后发现p-Met、t-Met及p-JNK水平在自噬增强的Axin2阳性细胞中显著升高(全部P<0.05).治疗8 wk和11 wk后细胞增殖显著减少(全部P<0.05),而TUNEL染色的结果显示细胞的c-Met抑制剂EMD1214063对肝细胞的凋亡并无明显影响.在第8周和第11周使用来自对照和EMD1214063处理组的全肝裂解物的Western印迹分析显示p-Met、p-JNK及HGF在11 wk的大鼠中显著降低,而t-Met、p-JNK及HGF在8 wk的大鼠中显著降低.结论HGF/Met/JNK信号通路介导的细胞自噬参与到肝硬化癌变进程中,并且c-Met抑制剂能够在肝硬化进程中发挥治疗作用.

c-met信号传导通路在脑胶质瘤中的作用

c-met受体是原癌基因c—met编码的蛋白质产物，在正常情况下可调节胚胎发育、器官形态分化、组织修复等，而在病理状态下可介导肿瘤细胞的增殖、分化、黏附、侵袭等生物学特性。目前已发现其在多种肿瘤中发挥上述作用，包括乳腺癌、食管癌、前列腺癌、肝癌、卵巢癌等。其在胶质瘤中同样高表达且与不良预后密切相关。现将该信号传导通路在胶质瘤中作用的最新研究进展综述如下。

Sema4D在肿瘤新生血管形成中的作用及其机制研究进展

Sema4D属于Semaphorin家族成员之一,最初被认为是影响神经发育的轴突导向因子。近年研究表明,Sema4D在人体肿瘤组织中高表达,并在肿瘤新生血管形成及肿瘤进展中发挥重要作用。Sema4D介导肿瘤新生血管形成的主要机制包括激活Plexin B1-RhoA与Met信号通路、与血管内皮细胞生长因子协同作用、与低氧诱导因子作用。在实体肿瘤中,Sema4D高表达提示血管新生效应更强、恶性程度更高及预后更差,可作为抗肿瘤及抗肿瘤血管治疗的新靶标。