血清可溶性肿瘤坏死因子受体P55、金属硫蛋白1E对雌激素受体阳性乳腺癌根治术病人临床转归的影响

目的探讨血清可溶性肿瘤坏死因子受体P55(sTNFR-P55)、金属硫蛋白1E(MT1E)对雌激素受体(ER)阳性乳腺癌根治术病人临床转归的影响。方法2017年2月~2018年3月在本院治疗的ER阳性乳腺癌根治术病人146例,依据术后临床转归情况分为复发转移组和未复发转移组,比较两组病人的临床资料、血清sTNFR-P55、MT1E水平。采用多因素Logistic回归分析影响ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归的相关因素。制作受试者工作特征(ROC)曲线,以曲线下面积(AUC)分析血清sTNFR-P55、MT1E及两者联合对ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归的预测价值。结果截止随访结束,146例ER阳性乳腺癌根治术病人共有32例发生复发转移。复发转移组肿瘤直径、肿瘤坏死因子-α、糖类抗原125(CA125)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、肿瘤分期为Ⅲ期占比、血清sTNFR-P55、MT1E水平均高于未复发转移组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,CYFRA21-1(OR=2.768,95%CI 1.107~6.920)、CEA(OR=2.751,95%CI 1.101~6.879)、肿瘤分期为Ⅲ期(OR=3.611,95%CI 1.444~9.029)、sTNFR-P55(OR=3.343,95%CI 1.337~8.361)及MT1E(OR=3.267,95%CI 1.307~8.169)均为影响ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归的相关因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清sTNFR-P55、MT1E及两者联合对ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归预测的灵敏度分别为78.12%(95%CI 59.56~90.06)、75.00%(95%CI 56.25~87.87)、71.88%(95%CI 53.02~85.60),特异度分别为63.16%(95%CI 53.56~71.85)、75.44%(95%CI 66.32~82.80)、96.49%(95%CI 90.73~98.87),AUC分别为0.723(95%CI 0.642~0.793)、0.760(95%CI 0.682~0.827)、0.880(95%CI 0.816~0.928)。结论血清sTNFR-P55、MT1E与ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归有关,且血清sTNFR-P55、MT1E两者联合对ER阳性乳腺癌根治术病人临床转归预测效能较高。

MT1E在肝癌形成过程中的表达及其在肝癌细胞中的作用

目的:探讨MT1E基因在肝癌形成过程中不同阶段的表达及其在肝癌细胞中的生物学功能.方法:DEN诱发大鼠肝癌形成模型,分别观察造模4、8、16、20wk后肝脏组织病理形态学的改变以及MT1E基因表达的差异;针对MT1E基因mRNA序列设计2个siRNA靶点,分别经质粒重组后电转入SMMC-7721肝癌细胞株中,实时荧光定量PCR检测MT1E基因的表达,MTT法检测细胞生长增殖.结果:大鼠肝癌造模4、8wk时肝组织主要表现为炎性病变,而到16wk后呈现典型的增生病变,20wk后已全部发展为肝细胞癌.MT1E基因在造模16wk后表达明显增加,与对照组比较差异显著(芯片读数:11524vs5462).成功筛选到MT1E基因RNA干扰的一个有效靶序列,电转染72h后该基因的表达量较空白对照组与阴性对照组明显降低(0.38vs1.00,0.93,P<0.01).与阴性对照组比较,有效干扰靶点电转染144h后细胞的生长增殖得到了明显抑制(0.1700±0.0313vs0.5748±0.0480,P<0.01).结论:成功应用DEN诱发大鼠肝癌形成MT1E基因在肝癌形成的后期表达明显升高其高表达与肿瘤细胞的恶性增殖有关.

金属硫蛋白1E、糖类抗原153表达与乳腺癌患者临床特征及预后的关系

目的探讨金属硫蛋白1E(MT1E)、糖类抗原153(CA153)在乳腺癌患者血清中的表达情况及其与患者临床特征及预后的关系。方法选取128例乳腺癌患者为观察组,选取130例同期进行体检的健康女性为对照组,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测两组受试者血清中MT1E和CA153的表达水平,并对128例乳腺癌患者进行随访。结果观察组患者血清中MT1E、CA153的表达水平均明显高于对照组患者(P﹤0.01)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达率均明显高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期的乳腺癌患者(P﹤0.01);有淋巴结转移的乳腺癌患者血清中MT1E的阳性表达率明显高于无淋巴结转移的乳腺癌患者(P﹤0.01)。MT1E、CA153阳性表达乳腺癌患者的中位生存时间均短于MT1E、CA153阴性表达的乳腺癌患者(P﹤0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示,有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为中低分化、MT1E阳性表达、CA153阳性表达均是乳腺癌患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05),雌激素受体阳性是乳腺癌患者预后良好的独立保护因素(P﹤0.05)。结论乳腺癌患者血清中MT1E和CA153的表达水平较高,有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为中低分化、MT1E阳性表达、CA153阳性表达是乳腺癌患者预后不良的独立危险因素,雌激素受体阳性是乳腺癌患者预后良好的独立保护因素。

乳腺癌患者TFF1、UBE2C和MT1E的水平与其预后的关系

目的探讨乳腺癌患者血清三叶因子1(TFF1)、人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)和金属硫蛋白1E(MT1E)水平与患者生存期的关系。方法选取接受乳腺手术的132例患者,均经病理诊断,根据疾病诊断分为乳腺癌组(n=78)和乳腺良性病变组(n=54),另选取同期在体检中心体检的60名年龄相匹配的健康女性作为健康对照组。检测并比较所有入选研究对象的住院未治疗前的血清TFF1、UBE2C、MT1E水平,采用Kaplan-Merier生存分析法和Cox比例风险回归分析乳腺癌患者血清TFF1、UBE2C和MT1E水平与预后生存期的关系。结果乳腺癌组血清TFF1、UBE2C、MT1E水平明显高于乳腺良性病变组和健康对照组(P<0.05),乳腺良性病变组和健康对照组血清TFF1、UBE2C、MT1E水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清TFF1、UBE2C、MT1E水平与乳腺癌患者肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05),Kaplan-Merier生存分析显示:血清高TFF1、UBE2C、MT1E水平者生存率明显低于血清低TFF1、UBE2C、MT1E水平者(P<0.05),多因素Cox比例风险回归模型分析显示,血清高TFF1、UBE2C、MT1E均是乳腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论乳腺癌患者血清TFF1、UBE2C?、MT1E水平均明显升高,其血清水平与患者肿瘤大小、淋巴结转移和临床分期有关,同时还与患者预后有关,其血清水平可作为乳腺癌患者预后的判断指标应用于临床。

人金属硫蛋白基因(MT1E)在毕赤酵母中的表达及其铬抗性

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类富含半胱氨酸的蛋白质,巯基含量丰富,其半胱氨酸上的巯基对重金属离子有极强的结合力,能够结合重金属形成无毒或低毒的络合物,具有重金属解毒的功能.本文根据已公布的人金属硫蛋白基因MT1E序列,用Vector NTI 7.0软件设计合成12条寡聚核苷酸片段,并拼接得到MT1E完整基因.将测序正确的MT1E基因克隆至酵母表达载体pPIC9K,酶切验证后的阳性克隆命名为pPIC9K-MT1E,含有该重组基因的毕赤酵母工程菌命名为GS115/pPIC9K-MT1E.通过酶联免疫(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法检测到GS115/pPIC9K-MT1E工程菌发酵液有金属硫蛋白酶活性,表明人金属硫蛋白MT1E基因能在毕赤酵母GS115菌株中正确分泌表达.铜(Cu)、锌(Zn)、锰(Mn)、铬(Cr)、钴(Co)重金属抗性分析表明,工程菌GS115/pPIC9K-MT1E对Cr(Ⅵ)的抗性较强,有解毒重金属Cr(Ⅵ)的能力.