天浆壳化学成分研究

目的 研究天浆壳Metaplexis japonica(Thumb.) Makino的化学成分。方法 天浆壳80%乙醇提取物的二氯甲烷部位采用高速逆流色谱、Sephadex LH-20、硅胶柱色谱、制备液相色谱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果 从中分离得到15个化合物,分别鉴定为orychophragines A(1)、C-藜芦酰乙二醇(2)、烟酰胺(3)、2, 3, 4′-三羟基-3′, 5′-二甲氧基苯丙酮(4)、2, 3-二氢-4(1H)-喹诺酮(5)、2, 4-喹唑啉二酮(6)、吐叶醇(7)、cucubalus baccifer L(8)、3-羟基-1-(4-羟基-3, 5-二甲氧基苯基)丙-1-酮(9)、3, 4′-二羟基-3′-甲氧基苯丙酮(10)、对羟基苯乙醇(11)、楝叶吴萸素B(12)、浙贝素(13)、异莨菪亭(14)、东莨菪亭(15)。结论 化合物1~6、8、10~15为首次从萝藦属植物中分离得到。

萝藦果壳多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

在单因素实验基础上应用响应面法对萝藦果壳多糖提取条件进行优化并初步评价其体外抗氧化活性。优化的萝藦果壳多糖提取条件如下:料液比为1∶18(g/m L),提取温度为86℃,提取时间为3 h,提取次数为3次,此条件下的平均得率为11.22%;抗氧化活性实验结果表明萝藦果壳多糖对O2-、DPPH·的最高清除率分别为80.61%、73.01%。优化的萝藦果壳多糖提取工艺合理、可行,萝藦果壳多糖具有较强的抗氧化性。

响应面法优化白蔹多糖的闪式提取工艺

目的:通过单因素实验筛选和响应面分析,确定闪式提取白蔹多糖的最优工艺条件。方法:以中药白蔹为原料,通过单因素试验,以料液比、电压、提取时间为自变量,确定主要影响因素;通过响应面分析法确定闪式提取白蔹多糖的最优工艺条件。结果白蔹多糖的闪式提取最优工艺条件为料液比(g/m L)1∶25,电压220 V,提取时间110 s,此条件下提取白蔹多糖的理论提取率为10.14%,验证实验中白蔹多糖的提取率为9.92%。结论:闪式提取法适合白蔹多糖的提取,该方法提取率高,提取时间少,具有快捷、方便的优点。

白蔹的化学成分、质量控制及药理作用研究进展

目的全面系统总结中药白蔹的成分、质量控制和药理作用。方法查找迄今为止发表的白蔹相关论文,总结了白蔹分离提纯的化学成分、质量控制和主要的药理作用。结果白蔹成分大体有:多酚类、蒽醌类、黄酮类、甾醇类、有机酸类、三萜类、挥发油类和木脂素类等;质量控制:还没有明确标准,目前主要有大黄素、没食子酸、原儿茶醛、儿茶素、白藜芦醇以及总酚酸含量测定方法,可用于白蔹的质量控制。但是由于产地不同,含量差异较大,需要综合多因素考虑。药理作用:抑菌作用、抗肿瘤、免疫调节、促进伤口愈合和保护多巴胺神经元等。结论中药白蔹成分逐渐明朗,具有重要的药理作用,但是质量控制不明确,还有待于进一步深入研究。

白蔹的化学成分(Ⅱ)

目的研究白蔹的化学成分。方法利用各种色谱法进行分离,根据理化性质和波谱分析鉴定化合物结构。结果从白蔹的氯仿和乙酸乙酯萃取部分又分离得到7个已知成分,分别鉴定为五味子苷(1)、大黄酚(2)、大黄素甲醚(3)、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、poriferast-5-en-3β,7α-diol(5)、棕榈酸(6)、齐墩果酸(7)。结论化合物4和5为首次从该植物中分离得到。

萝藦化学成分的研究

目的研究萝藦Metaplexis japonica(Thunb.)Makino的化学成分。方法萝藦95%乙醇提取物的二氯甲烷部位采用硅胶、制备HPLC柱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到9个化合物,分别鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(1)、(Z)-2-亚乙基-3-甲基琥珀酸(2)、脱氢地芰普内酯(3)、皮树脂醇(4)、异香草醛(5)、吐叶醇(6)、β-谷甾醇(7)、β-胡萝卜苷(8)、孕烯醇酮(9)。结论化合物2~4为首次从萝藦属植物中分得,化合物5~8为首次从该植物中分得。

中药萝藦中C21甾苷的含量测定

[目的]测定萝藦中C21甾苷的含量。[方法]以孕甾烯醇酮为标准物,采用磺基醋酸汞试剂法于510 nm波长处测定C21甾苷的吸光度值,并计算其含量。[结果]萝藦中C21甾苷含量为0.003 3 mg/ml,与相关文献中萝藦科植物中甾苷的含量接近。[结论]该方法准确率、重现性、线性关系等都满足科研和生产要求,可以用于萝藦中C21甾苷的含量测定。

白蔹化学成分的研究

从白蔹Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓｊａｐｏｎｉｃａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｍａｋｉｎｏ块根中分离出７种化合物，经理化常数测定，光谱分析及化学方法分别鉴定为正二十五烷（Ⅰ）、三十烷酸（Ⅱ）、二十八烷酸（Ⅲ）、β－谷甾醇（Ⅳ）、豆甾醇（Ⅴ）、槲皮素（Ⅵ）和豆甾醇－β－Ｄ－葡萄糖甙（Ⅶ）。除β－谷甾醇外，其他化合物均为首次从该植物中分得。

白蔹的化学成分研究

目的研究白蔹的化学成分。方法利用各种色谱法进行分离,根据理化性质和波谱分析鉴定化合物结构。结果从白蔹的氯仿和乙酸乙酯萃取部分又分离得到7个已知成分,分别鉴定为甲基-α-D-呋喃果糖苷(1)、甲基-β-D-吡喃果糖苷(2)、β-D-呋喃果糖甲苷(3)、β-D-呋喃果糖(4)、尿苷(5)、腺苷(6)、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)。结论化合物1、2、3、4、5、6为首次从该植物中分离得到。

白蔹多糖的分离纯化及其对小鼠脾细胞增殖的影响

[目的]分离纯化白蔹多糖,研究白蔹均一多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[方法]采用水提醇沉法提取白蔹多糖,通过三氯乙酸法脱除蛋白,用中空纤维超滤膜和DEAE Cellulose DE-52对白蔹多糖进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱法鉴定纯度并测定分子量,PMP柱前衍生化测定单糖组成,采用MTT法测定均一多糖对Con A和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[结果]PAJM-A均一多糖分子量为1.29×105u,由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(Glc A)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xly)组成,其物质的量比为1.36∶1.87∶2.02∶1.58∶1.04,均一多糖对Con A诱导的T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞有较显著的增殖作用。[结论]PAJM-A是一种新的白蔹均一多糖,并与Con A、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用。

蛇白蔹白藜芦醇合酶基因CNRS2的克隆与原核表达

白藜芦醇合酶(resveratrol synthetic enzyme,RS)是植物白藜芦醇合成途径中的关键酶,利用已知的葡萄RS基因(AF274281)序列设计并合成了一对引物,以蛇白蔹基因组DNA为模板,PCR扩增得到包含RS完整基因在内的一段序列,测序与序列分析表明:该克隆片段全长1 536bp,其中包含一个内含子及两个外显子。采用悬挂延伸PCR法克隆了目的基因,命名为CNRS2。序列分析表明该基因的开放读码框1 170 bp,编码389个氨基酸残基。同源性比较发现,CNRS2与已知葡萄RS基因序列的同源性达93%～98%。CNRS2与pET-30a(+)构建原核表达载体,经IPTG诱导后可表达获得相对分子量约为46 kD的外源融合蛋白。以上结果证实CNRS2属葡萄RS基因家族成员,为今后进一步对该基因的研究利用打下基础。

白蔹中没食子酸含量测定研究

研究并优化了白蔹中没食子酸含量测定时供试品溶液的最佳制备方法。采用法测定白蔹中没食子酸含量,并用正交试验法考察了提取方法、提取溶剂、溶剂用量对没食子酸含量测定结果的影响。得出最佳提取条件为:以50%(质量分数)甲醇为提取溶剂,加入药材10倍体积量的溶剂,超声提取1 h。其中提取方法因素的影响最为显著。该方法下没食子酸的提取率高,共存组分干扰小,操作简便易行,可作为白蔹及含白蔹化妆品中没食子酸含量测定时的供试品溶液制备方法。

白蔹挥发油化学成分分析

首次采用水蒸气蒸馏法制备白蔹挥发油,通过面积归一化法测定其相对百分含量,应用气相色谱-质谱联用技术研究分析其化学成分。最终分离鉴定出14种化学成分,占挥发油总量的99.997%,主要包括:芳姜黄酮(21.465%)、2-甲基-6-对甲苯基-2-庚烯醇(17.438%)和蒽(14.224%)等,为白蔹的进一步开发利用提供了研究依据。

白蔹多糖PAJM-Ⅰ的分离纯化和结构分析

目的从白蔹中提取分离白蔹多糖,并研究其结构性质。方法经热水提取、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白后得到粗多糖PAJM,进一步用DEAE-Sapharose Fast Flow,Sephadex G-200分离纯化得到PAJM-Ⅰ,对分离到的主要多糖应用高碘酸氧化、高效凝胶渗透色谱(HPGPC),GC,GC-MS,IR等方法进行结构分析。结果提取纯化的白蔹多糖(PAJM-Ⅰ)是均一的多糖,相对分子量为3.25×104,鼠李糖,木糖,甘露糖和半乳糖组成摩尔比为:12.98∶23.52∶45.06∶18.44。分子中1→3,1→2,1→6连接的糖苷键数比为51%∶26%:23%。结论首次从白蔹中分离得到PAJM-Ⅰ均一多糖,且PAJM-Ⅰ含有α-D-葡萄吡喃糖。

Development, Reproduction and Body Size Variation of Aphis glycines Matsumura Fed on Different Plants

Soybean aphid, Aphis glycines Matsumura is one of the most important pests in soybean. Life cycle of A. glycines is characterized as heteroecious and holocyclic. The primary hosts of A. glycines are Rhamnus spp. and the secondary hosts include cultivated soybean, Glycine max(L.) Merr, and wild soybean, Glycine soja Sieb.& Zucc. In this study, A. glycines were fed on Trifolium repens L. and Metaplexis japonica(Thunb.) Makino for three generations and their development, reproduction and body sizes were studied. These data were compared to the control fed on the known hosts, G. max and G. soja. These newly deposited offspring by the 3 rd generation were transferred back onto G. max and these differences in their development, reproduction and body sizes were also studied. It showed that A. glycines all could survive, develop and reproduce well, when they were fed on T. repens and M. japonica for three generations, but there were significant differences in their nymph stage, adult longevity and fecundity, life table parameters and body sizes. When these offspring were transferred back onto G. max which were newly deposited by the 3 rd generation aphids fed on T. repens and M. japonica, they could survive, develop and reproduce well, but there were significant differences in their nymph stage, adult longevity, intrinsic rate of increase and body sizes. It provided important information for studies on host adaptability of A. glycines on T. repens and M. japonica and to make clear the potential that this aphid involved into host biotypes on these plants.

天浆壳多酚的提取工艺优化及其抗氧化活性评价

目的:确定天浆壳多酚的最佳提取工艺,并对其抗氧化活性进行初步研究。方法:以多酚提取量为指标,在单因素实验基础上,采用响应面法优化天浆壳多酚提取工艺。通过多酚的还原能力、羟自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)自由基的清除作用来评价其抗氧化活性。结果:天浆壳多酚最佳提取工艺:乙醇浓度(v/v)为42%,液料比为16∶1(m L/g),提取温度为61℃,超声时间为64 min。在此条件下,天浆壳多酚的提取量为(26.86±0.37)mg/10 g。该多酚具有一定的还原能力,当多酚浓度为1 mg/m L时,对羟自由基和DPPH·自由基清除率分别为70.78%和85.22%。结论:此优化工艺可行,该多酚具有一定的抗氧化能力。

萝果壳蛋白提取工艺的优化及其抗氧化活性研究

采用碱提酸沉法对萝藦果壳蛋白的提取条件进行研究,以蛋白提取率为指标,在单因素实验的基础上,进行正交实验。结果表明在料液比1∶20(g/m L)、提取液p H11.5、浸提温度60℃、提取时间1.0 h的条件下,蛋白提取率最高,为89.18%。并对最佳条件下提取的蛋白进行体外抗氧化实验。结果显示,提取蛋白对DPPH·、·OH的清除率分别为79.45%(8 mg/m L)、55.35%(8 mg/m L),且清除DPPH·、·OH的半抑制浓度(IC50)分别为4.19、3.30 mg/m L,并具有还原能力,但弱于VC。

天浆壳生物碱的提取分离纯化及对舌癌Tca8113细胞的增殖抑制作用

目的:从天浆壳中提取分离纯化得到生物碱,并研究其对人舌癌Tca8113细胞的增殖抑制作用。方法:采用醇提法提取天浆壳中总生物碱,硅胶柱色谱分离纯化得到单一生物碱化合物,通过核磁共振光谱和质谱对其化学结构进行分析。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定生物碱对Tca8113细胞增殖的抑制率,Hoechst 33342染色法观察细胞形态变化。结果:从天浆壳中分离出secu’amamine D、securinine、securitinine三种生物碱;MTT结果表明,三种生物碱均能明显抑制Tca8113细胞的增殖;Hoechst 33342染色结果显示,三种生物碱均能使Tca8113细胞发生凋亡形态学改变,且与浓度正相关。结论:首次从天浆壳中分离出secu’amamine D、securinine、securitinine三种生物碱,三种生物碱均能抑制Tca8113细胞增殖并促使其凋亡。

萝藦中有效物质的提取分离及对细胞增殖活性的影响

目的本文对传统中草药萝藦Metaplexis japonica(Thunb.) Makino的有效活性成分进行研究。方法利用MTT法测其对HMEC-1细胞增殖的影响为靶向,对鲜萝藦全株95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果首次从萝藦中分离纯化出可促进内皮细胞增殖有效单体酪醇及5-羟甲基糠醛。结论发现酪醇具有促进内皮细胞增殖的药理活性,进一步揭示了萝藦临床疗效的物质基础。

高分离度快速液相色谱质谱联用同时测定不同部位和不同加工方法的萝藦中氨基酸和核苷类成分含量

目的高分离度快速液相色谱质谱联用(UFLC-QTRAP-MS/MS)同时测定不同组织部位和加工方法萝藦中15种氨基酸和12种核苷类成分的方法。方法采用Waters XBridge Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm),以0.2%甲酸乙腈-0.2%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速0.6 m L·min^(-1),柱温为30℃,正离子多反应监测(MRM)模式测定。用灰色关联度分析(GRA)和TOPSIS分析进行综合性评价。结果 15种氨基酸成分和12种核苷成分在一定范围内线性关系良好,相关系数均大于0.997 3,平均加样回收率为98.17%~100.75%,相对标准偏差在0.90%~2.49%之间。不同部位和加工方法有一定的差异性,低温烘干的叶中氨基酸和核苷综合质量较好。结论该方法准确可靠,为选择最优处理方法提供可靠的方案。