绿僵菌MS01对光肩星天牛成虫取食、产卵、孵化及子代幼虫存活的影响

采用喷菌法将3种不同密度的绿僵菌孢子悬浮液(106、107、108个.mL-1)接种到光肩星天牛(Ano-plophora glabripennis(Motschu lsky))成虫上,以0.1%吐温-80溶液为对照。研究其对光肩星天牛取食、产卵、孵化及其幼虫成活的影响。结果表明,光肩星天牛的选择取食效果随时间的推移均逐渐增大。与对照相比,其产卵量、孵化率和幼虫存活率均明显降低,且接种密度愈大,降低愈多。接种15 d后,3种染菌处理每对天牛产卵量分别为(21.25±1.71)、(18.00±1.41)、(11.50±2.88)粒,而对照可产(24.75±1.26)粒;孵化率分别比对照组降低了38.34%、30.43%和12.41%;幼虫死亡率分别比对照高67.53%、58.99%和46.68%,幼虫最终存活率分别为13.04%、20.83%和35.29%,而对照为79.80%。可见,光肩星天牛成虫感染绿僵菌MS01后可降低其取食量与产卵量,并通过水平传播传递给子代从而降低子代成活率。

金龟子绿僵菌和球孢白僵菌对大黑鳃金龟二龄幼虫的致病力

为了筛选生物防治大黑鳃金龟(Holotrichia diomphalia Batesa)的高毒力生防虫生真菌,室内生物测定和比较了金龟子绿僵菌[Metarhizium anisopliae Metschnikoff(Sorokin)]KMa0107菌株、球孢白僵菌[Beauveria bassiana(Balsamo)Vuillemin]菌株Bb070610和Bb070917对大黑鳃金龟2龄幼虫的致病力。结果表明:接种后5~12 d,KMa0107,Bb070610和Bb070917菌株对大黑鳃金龟2龄幼虫的致死剂量对数值间差异显著(F=19.45,P<0.01),分别为(9.45±1.71)^(4.73±0.37)、(9.76±1.87)^(5.20±0.79)、(10.48±1.24)^(5.99±0.43)。用密度为1.15×108~1.15×105个/m L的孢子悬浮液接种后,对大黑鳃金龟2龄幼虫侵染致病的LT50估计值范围为5.7~8.7 d,6.4~9.2 d,6.3~8.6 d。接种孢子悬浮液后,随着病原菌的侵染及其在虫体内的繁殖,大黑鳃金龟2龄幼虫血淋巴中蛋白质质量浓度逐渐减少。接种后第4天,幼虫血淋巴中蛋白质质量浓度均明显下降,接种KMa0107及Bb070610的大黑鳃金龟2龄幼虫血淋巴蛋白质质量浓度下降速度显著大于Bb070917菌株处理。接种后第10天,菌株KMa0107及Bb070610处理的大黑鳃金龟2龄幼虫血淋巴蛋白质质量浓度显著低于对照及Bb070917菌株处理(F=17.36,P<0.01)。综合以上结果,金龟子绿僵菌KMa0107及球孢白僵菌Bb070610菌株对大黑鳃金龟2龄幼虫具有较强的致病力,具有良好的生防制剂开发潜力。

绿僵菌对小云斑鳃金龟毒力及在土壤中的宿存

室内测定了从棕色金龟子HolotrichiatitanisReitter幼虫体上分离的金龟子绿僵菌MetarhiziumanisopliaeMetschnikoff(Sorokin)KMa0107对危害马铃薯的小云斑鳃金龟PolyphyllalaticollalaticollisLewis幼虫的毒力,并用时间-剂量-死亡率模型进行了分析。结果表明,该绿僵菌菌株对小云斑鳃金龟幼虫具有较强的毒力,剂量效应参数为0.74;在108～106孢子/mL下,接种后第10d小云斑金龟的累积死亡率达100%,在102孢子/mL下的累积死亡率为3.3%。在108孢子/mL下对小云斑金龟的LT50和LT90分别为4.6d和6.4d,在106孢子/mL下的LT50和LT90分别为5.6d和7.9d。绿僵菌菌株对小云斑鳃金龟第7d的LD50和LD90分别为5.5×106和2.3×108孢子/mL,第10dLD50和LD90分别为1.0×106和4.7×107孢子/mL。分生孢子在灭菌和未经灭菌的土壤中的宿存量随接种后时间的延续下降,在未经灭菌的土壤处理中分生孢子活力下降快于灭菌土处理,每g土壤中CFU的对数与处理后的天数x成线性相关关系,在未灭菌土和灭菌土中的半衰期分别为17和23d。

6种杀菌剂对金龟子绿僵菌孢子萌发的影响

测定了6种杀菌剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发的抑制作用。结果表明,不同杀菌剂对金龟子绿僵菌的抑制作用不同,且随着杀菌剂浓度的下降而减小。其中以腈菌唑的抑制效果最弱,除Ma103菌株外,对其他菌株抑制率均低于35%。代森锌对Ma202,Ma201和Ma203菌株的平均抑制率都较小。其他几种杀菌剂都明显抑制绿僵菌大部分菌株分生孢子的萌发,特别是百菌清和甲基托布津对Ma103,Ma205,Ma207和Ma208菌株的平均抑制率都为100%。2种药剂也强烈抑制其他菌株分生孢子的萌发。因此,应该尽量避免百菌清和甲基托布津与金龟子绿僵菌同时同地使用,否则会明显影响金龟子绿僵菌制剂的应用效果。

应用白僵菌和绿僵菌防治浙江双栉蝠蛾试验

应用高致病力球孢白僵菌[Beauveria bassiana(Bals.)Vuill]B3和金龟子绿僵菌[Metarhizium anisopliae(Metsch.)Sorokin]Ma1291-2菌株,以不同的施菌方式防治浙江双栉蝠蛾(Bipectilus zhejiangensis Wang),统计分析2 a的防治效果。结果表明,2菌株均体现笋基灌施的防治效果较菌土撒施好,但以3月上旬进行撒施,3月中旬进行灌施(撒施+灌施)的防治效果最好。2菌株防治后第1年的退笋率无显著差异,而绿僵菌防治后第2年退笋率显著较低。以撒施+灌施防治后第1年和第2年,白僵菌B3菌株的防治效果分别为72.20%和36.76%,绿僵菌Ma1291-2菌株的防治效果分别为79.28%和48.70%。因此,2菌株均有林间应用价值,并以不同时间撒施+灌施的施菌方式防治,效果更佳。

绿僵菌属的修订

本文报道绿僵菌属的修订和修订后本属区分种的主要标准。这对于自然界本属复杂类群的研究将起到新的推动和助益。

金龟子绿僵菌(L8500)的分离及液体培养

通过液体发酵培养对定名为金龟子绿僵菌(Metarhiziumanisopliae(Metsch)Sorokin)(L8500)的培养基进行了考察,确定了该菌液体培养的最佳配方,并且制定了L8500菌液体培养的质量控制方案。

绿僵菌对马尾松毛虫的感染反应分析

通过以金龟子绿僵菌菌株M337和M104系列浓度的分生孢子悬液(1.0×1011-1.0×107个孢子.L-1)对马尾松毛虫幼虫的体表接种试验,测定马尾松毛虫对供试菌株的感染反应。运用时间—剂量—死亡率模型,对死亡率随时间和剂量的变化作了拟合,并与球孢白僵菌(Bb01和Bb02菌株)进行比较。接种后第10-12天绿僵菌M337菌株的LC50分别为1.86×109、1.52×108和1.67×107孢子.L-1,在浓度梯度为1.0×1011-1.0×108孢子.L-1下的LT50为7.69-11.18 d。结果表明M337菌株对马尾松毛虫具有较强的致死作用。

7株绿僵菌防治德国小蠊的毒力筛选

本文用7个绿僵菌(Metarhizium)菌株对德国小蠊Blattella germanica(Linnaeus)进行注射生测,筛选出了一个致病菌株进行五代复壮选育.该株绿僵菌Metarhizium anisopli-ae(Metsch)Sorokin复壮前对雌雄成虫注射生测LD50依次为13.2与8.9天;复壮后对雌雄成虫背部点滴生测12天的LD50值均为1.3×105孢子/虫.通过CP包埋剂制作石蜡切片对僵虫体内菌丝核和体表孢子堆进行了观察.

绿僵菌防治低密度草原蝗虫对蝗虫多样性的影响

目前草原蝗虫的防治受到国家及地方高度重视,而因化学农药对生态的破坏严重,生物农药越来越受到各界人士的青睐。针对化学农药和生物农药(绿僵菌)防治草原蝗虫后的对比进一步证实生物农药防治草原蝗虫的对生态的保护作用,同时也证实了生物农药对生物多样性也有一定的影响。

捕食螨对烟草育苗期蓟马防治效果研究

为明确捕食螨对烟草蓟马的防治效果,笔者调查了云南泸西中枢育苗期蓟马发生情况及种类,并对比研究了不同捕食螨释放数量、释放方式及携带微生物菌剂的防治差异。结果表明:蓟马种类主要为西花蓟马,其次为八节黄蓟马,发生高峰期在4月中旬左右;捕食螨投放100头/盘防治效果最好;均匀撒施捕食螨对蓟马防治效果显著优于开袋放置及空白对照(P<0.05);捕食螨搭载球孢白僵菌对蓟马控制效果最好,搭载金龟子绿僵菌与不带菌相差不大,但均显著高于空白对照(P<0.05)。

一株小阔胫绒金龟幼虫绿僵菌的分离鉴定及培养条件的优化研究

【目的】为了弄清从云南省昆明市寻甸县大河桥农场田间自然罹病的小阔胫绒金龟Maladera ovatula(Fairmaire)幼虫僵虫上分离纯化获得的1株绿僵菌Metarhizium sp.(编号MAXD170705)的种类及其培养条件,为蛴螬生防制剂开发提供依据。【方法】室内通过菌株的分离与纯化,并根据形态特征及ITS-5.8SDNA基因序列,对该菌株种类进行鉴定,同时采用正交旋转组合试验设计,测定该菌株在不同培养基上于不同温度、光照、pH值条件下的菌落生长速度及产孢特性。【结果】经形态学与分子鉴定,确定菌株MAXD170705为金龟子绿僵菌Metarhiziumanisopliae,该金龟子绿僵菌MAXD170705菌株在SMAY、PDA和SDAY 3种培养基上均能生长,但在SDAY培养基上孢子萌发率以及菌落生长、产孢时间与产孢量均优于其他2种培养基。在(25±1)℃、16 L︰8 D和pH=7.0条件下MAXD170705菌株生长最快,菌落直径日增量为0.38 cm/d;菌落直径最大,第8天达2.73 cm;产孢时间最早,从第3天开始产孢,并且产孢量最高,达6.68×10^6孢子/cm^2。【结论】营养成分对菌株发育过程中具有重要作用,只有丰富而且恰当的营养条件才有利于不同来源的绿僵菌菌丝生长以及产孢。除此之外,外界环境条件也是影响其生长发育的重要因素。综合以上结果,利用pH=7.0的SDAY培养基,于25℃、光照16L︰8D为金龟子绿僵菌MAXD170705的最适培养条件。